柔嫩艾美耳球虫ET-LDH重组蛋白及应用制造技术

本发明专利技术提供柔嫩艾美耳球虫ET‑LDH重组蛋白及应用，LDH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，ET‑LDH重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术通过构建柔嫩艾美耳球虫ET‑LDH重组蛋白，该重组蛋白作为抗原建立ELISA检测方法，仅对柔嫩艾美耳球虫阳性血清具有敏感性，而对鸡其他艾美耳球虫阳性血清如(毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫)以及IBV、MDV、ALV等阳性血清不具有敏感性。本发明专利技术构建的ELISA检测方法用于诊断柔嫩艾美耳球虫病或者评价柔嫩艾美耳球虫疫苗免疫的效果，比使用计数粪便中卵囊减少数量与肠道病变评分的方法更加方便快捷，效果更好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及柔嫩艾美耳球虫et-ldh重组蛋白及应用。

技术介绍

1、鸡球虫病是由艾美耳属(eimeria)的多种球虫单独或混合寄生于鸡肠道上皮细胞内而引起，是危害养鸡业的重大疾病，其发病率可达50.70％，死亡率为20～30％，严重时可达80％。同时，感染该病还可导致饲料报酬降低和胴体质量下降等。估计全球每年因为球虫病的损失为20亿英镑，我国仅在抗球虫药的年消费就高达2.4～4.8亿元人民币。

2、其中柔嫩艾美耳球虫有很强的致病力，其引发的鸡盲肠球虫病多为急性出血型，常常造成鸡盲肠出血与坏死，导致大量的血液流入肠腔，从而伴发或继发坏死性肠炎。柔嫩艾美耳球虫主要的侵害部位在盲肠，感染的盲肠会出现肿胀，肠腔内有血凝块，浆膜面可看到暗红色的瘀斑。目前柔嫩艾美耳球虫病主要通过实验室镜检粪便中的卵囊，再结合临床解剖症状进行诊断，但是不同艾美耳球虫感染可能表现同样的症状，而且不同球虫的卵囊也比较相似，所以根据临床症状与卵囊比较难确诊，目前尚未开发出通过血清学进行球虫病诊断的方法。

3、鸡柔嫩艾美耳球虫病主要以药物防治与疫苗接种本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.柔嫩艾美耳球虫LDH基因在制备重组蛋白上的应用，所述LDH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种ET-LDH重组蛋白，其特征在于，编码柔嫩艾美耳球虫LDH基因，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.权利要求2所述的ET-LDH重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述载体pMD19-T Vector替换为pUC8，pBR325，pAT153中的一种。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述pET28A(+)表达载体替换为pET...

【技术特征摘要】

1.柔嫩艾美耳球虫ldh基因在制备重组蛋白上的应用，所述ldh基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种et-ldh重组蛋白，其特征在于，编码柔嫩艾美耳球虫ldh基因，所述重组蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.权利要求2所述的et-ldh重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述载体pmd19-t vector替换为puc8，pbr325，pat153中的一种。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述pet28a(+)表达载体替换为pet30a(+)、pet32a(+)、pet43a(+)中的一种。

6.权利要求2所述的et-ldh重组蛋白在制备检测柔嫩艾美耳球虫抗体的产品上的应用。

7.权利要求2所述的et-ldh重...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏观志，覃健萍，张齐，吕丽萍，王占新，周庆丰，王定爱，温家明，方焕新，
申请(专利权)人：温氏食品集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：