一种多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法技术

技术编号:41689417 阅读:27 留言:0更新日期:2024-06-14 15:39
本发明专利技术涉及一种多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法。该方法采取了两种可选的策略以提升全细胞微生物传感器性能,策略一为向全细胞微生物传感器的宿主细胞内引入针对待检测物的抗性基因,以减少所述微生物的细胞内所述待检测物的浓度;策略二为通过适应性实验室进化技术对所述宿主细胞进行进化,以提升所述宿主细胞的抗生素耐受性有毒化学物质耐受性,通过上述两种策略可实现对特定抗生素等毒性化学物质的稳定和高性能检测。此方法有助于开发适用于任何抗生素或有毒化学物质的全细胞微生物传感器,具有广泛的适用性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种基于抗性基因及适应性实验室进化技术的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法


技术介绍

1、全细胞微生物传感器利用微生物细胞作为感知工具,感知环境和医学样品中的目标化学物质,并在原位控制细胞的代谢和行为。这种传感器成本低、易于使用且便携。在全细胞微生物传感器中,转录因子(transcription factor,tf)为基础的生物传感器得到广泛研究和应用。一般而言,生物传感器包括一个对目标配体敏感的转录调控因子(transcriptional factor,tf)、其配对的dna启动子和一个报告基因(例如红色荧光蛋白(red fluorescence protein,rfp))。tf是关键组成部分,它与其特定配体结合并发生构象变化,然后激活或抑制其与dna启动子的结合,进而调节后续执行器基因的表达。这些生物传感器已广泛应用于监测重金属和有机化学物质(如hg2+、ni2+、酚和羟基戊二酸)、环境生物修复以及生物生产中的动态控制。

2、适应性实验室进化(adaptive laboratory evolution,al本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,包括两种策略:

2.如权利要求1所述的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,所述抗性基因包括但不限于待检测物外排泵编码基因、待检测物免疫蛋白编码基因、待检测物降解酶编码基因中的一种或几种。

3.如权利要求2所述的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,对于乳酸链球菌素生物传感器,引入乳酸链球菌素免疫蛋白编码基因nisI,构建质粒pNZ8148-PnisArfp/nisI,并在乳酸链球菌素生物传感器细胞L.lactis NZ9000中表达,形成Sensor-PnisARFP/Nis...

【技术特征摘要】

1.一种多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,包括两种策略:

2.如权利要求1所述的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,所述抗性基因包括但不限于待检测物外排泵编码基因、待检测物免疫蛋白编码基因、待检测物降解酶编码基因中的一种或几种。

3.如权利要求2所述的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,对于乳酸链球菌素生物传感器,引入乳酸链球菌素免疫蛋白编码基因nisi,构建质粒pnz8148-pnisarfp/nisi,并在乳酸链球菌素生物传感器细胞l.lactis nz9000中表达,形成sensor-pnisarfp/nisi菌株,nisi的序列如seq id no:1所示。

4.如权利要求2所述的多策略提升全细胞微生物传感器性能的方法,其特征在于,对于乳酸链球菌素生物传感器,引入乳酸链球菌素免疫相关abc转运蛋白编码基因nisfeg,构建了质粒pnz8148-pnisarfp/nisefg,并在乳酸链球菌素生物传感器细胞l.lactis nz9000中表达,形成sensor-pnisarfp/nisefg菌株,nisfeg的序列如seq id no:2所示...

【专利技术属性】
技术研发人员:肖毅李佳玮秦紫晴
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:

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