D-泛酸生产菌的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种构建D‑泛酸生产菌的方法，包括下述步骤：以大肠杆菌MG1655为底盘菌，弱化或下调泛酸激酶基因coaA的表达，得到能通过发酵产生D‑泛酸的菌株。本发明专利技术还公开了一种能提高D‑泛酸发酵产量的乙酰羟酸合成酶突变体。本发明专利技术构建的工程菌能够以葡萄糖为碳源通过发酵来高效生产D‑泛酸，有较好的工业化前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于代谢工程领域，涉及一种d-泛酸生产菌的构建方法。

技术介绍

1、d-泛酸(dpa)又称维生素b5、3-吡啶羧酸酰胺，是一种水溶性维生素，广泛存在于动植物中而得“泛酸”之名。在原核生物、真菌、霉菌和植物的细胞内可以通过酶促反应合成，生物体还可以通过依赖na+的多维生素转运体(smvt，又称泛酸透酶)将维生素b5转运到细胞内。维生素b5在体内转变成辅酶a(coa)或酰基载体蛋白(acp)参与脂肪酸代谢反应。泛酸由两部分组成，一部分是2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酸，又称泛解酸，另一部分是β-丙氨酸。

2、目前工业上d-泛酸的生产工艺为全化学法和化学酶法组合两种工艺，两种方法都有需要一个重要的中间体dl-泛酸内酯，该中间体合成需要使用剧毒氰化物。随着中国对化工生产环保要求不断升级，日益增长的下游产品需求和上游中间体的限制使得开发一种全新的d-泛酸生产途径成为必要。

3、近年来，利用基因工程菌发酵法生产d-泛酸引起了生物合成领域的极大兴趣，例如cn114181875b公开了以大肠杆菌dpa11为底盘菌，通过代谢工程进行基因改本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种D-泛酸生产菌，其特征在于，通过包括以下步骤的方法构建：

2.如权利要求1所述的D-泛酸生产菌，其特征在于，步骤A通过下述方式实施：

3.如权利要求1所述的D-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

4.如权利要求1或2所述的D-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的D-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的D-泛酸生产菌，其特征在于，其为大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号...

【技术特征摘要】

1.一种d-泛酸生产菌，其特征在于，通过包括以下步骤的方法构建：

2.如权利要求1所述的d-泛酸生产菌，其特征在于，步骤a通过下述方式实施：

3.如权利要求1所述的d-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

4.如权利要求1或2所述的d-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的d-泛酸生产菌，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的d-泛酸生产菌，其特征在于，其为大肠埃希氏菌(escherichiacoli)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.297...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金刚，梁岩，任亮，步绪亮，韦炎龙，
申请(专利权)人：上海邦林生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：