一种重组光裂合酶、编码基因及其表达菌株与应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种重组光裂合酶、编码基因及其表达菌株与应用。本发明专利技术以嗜热栖热菌的光裂合酶的核苷酸序列为模板，采用易错PCR进行随机突变，构建大肠杆菌表达文库。然后通过高剂量紫外暴露筛选抗逆性强的转化子。在此基础上，通过菌落PCR扩增目的基因片段，测序确定突变位点后进行密码子优化，将优化后的目的基因序列在乳酸克鲁维酵母进行异源表达，得到重组光裂合酶。本发明专利技术获得的重组光裂合酶具有修复性能好、表达水平高、生产工艺简单等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种重组光裂合酶、编码基因及其表达菌株与应用。

技术介绍

1、皮肤癌是当前最常见的癌症，通常发生于光暴露部位。户外工作者、运动员和日光浴者的发病率最高。发病率与皮肤黑色素含量呈负相关；浅肤色人种最易发病(gregoryl.wells,md,ada west dermatology and dermatopathology)。深层次的原因在于紫外线与电离辐射等高能射线对核酸造成损伤所致。

2、光裂合酶(photolyase)是一类具有dna损伤修复功能的酶，它能高效快速地修复嘧啶二聚体。中国专利cn112877317b公开了一种嗜热栖热菌光裂合酶的提取方法，该方法采用含有结冷胶的发酵培养基发酵培养耐热栖热菌，然后再通过菌体破碎、过滤或离心、肝素柱分离纯化等步骤，得到耐热栖热菌光裂合酶；通过该方法提取的耐热栖热菌光裂合酶在80℃高温条件下，依旧具有较好的生物活性。尽管如此，因其提取的得率较低，大大限制了其应用。

3、dna重组技术可以实现功能蛋白的异源表达，是一种较为成熟的技术，理论上可以通过对底盘细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组光裂合酶，其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述的重组光裂合酶的基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQ IDNO.2或SEQ ID NO.3所示。

3.一种重组表达载体，其特征在于是通过将权利要求2所述的编码重组光裂合酶的基因的核苷酸序列与表达载体连接得到。

4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：

5.一种表达重组光裂合酶的菌株，其特征在于是将权利要求3或4所述的重组表达载体转入宿主菌株得到。

6.根据权利要求5所述的表达重组光裂合酶的菌株，其特征在于：

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【技术特征摘要】

1.一种重组光裂合酶，其特征在于其氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述的重组光裂合酶的基因，其特征在于其核苷酸序列如seq idno.2或seq id no.3所示。

3.一种重组表达载体，其特征在于是通过将权利要求2所述的编码重组光裂合酶的基因的核苷酸序列与表达载体连接得到。

4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：

5.一种表达重组光裂合酶的菌株，其特征在于是将权利要求3或4所述的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：张齐，梁清莲，梁凤婷，陈桂兰，
申请(专利权)人：肽源广州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：