肢芽间充质干细胞中FKBP10基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用制造技术

技术编号:41569098 阅读:41 留言:0更新日期:2024-06-06 23:49
本发明专利技术公开了一种肢芽间充质干细胞中FKBP10基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用;本发明专利技术首次发现在肢芽间充质干细胞中条件性敲除FKBP10之后有明显的骨量减少与关节畸形,解决了既往对于FKBP10布鲁克综合征的研究在成骨细胞中条件敲除FKBP10基因之后没有明显表型的问题;对于后续FKBP10基因在骨骼发育及骨形成中的功能研究提供了很好的动物模型;可以直接用于FKBP10缺失导致布鲁克综合征或成骨不全等骨形成障碍性疾病的发病机制研究,具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于动物模型构建,具体涉及肢芽间充质干细胞中fkbp10基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用。


技术介绍

1、bruck综合征(bs)是一种罕见的常染色体隐性成骨不全症,主要表现为先天性关节挛缩、骨脆性、婴儿或幼儿开始的多发性骨折、四肢畸形和脊柱侧弯等。fkbp脯氨酰异构酶10(fk506 binding protein10,fkbp10)基因为一种高度保守的蛋白质编码基因,也称为oi6、oi11、brks1、fkbp65、ppiase、hfk-bp65,属于fkbp型肽基脯氨酰顺反式异构酶家族,起分子伴侣的作用。

2、fkbp10基因突变可致bruck综合征(bs),然而其致病机制仍不清楚。fkbp10表达于骨骼、肌腱和韧带中。近期,有报道使用成骨细胞特异性col1a1 2.3kb cre重组酶小鼠成骨细胞中敲除fkbp10基因,发现在该动物模型中,骨的数量的变化很小,且骨基质矿化的程度没有差异,未表现出成骨不全表型。表明fkbp10突变导致的成骨不全症状不是由于fkbp10在成骨细胞中的作用缺失而导致。

3、因此需要构本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肢芽间充质干细胞中FKBP10基因条件性敲除小鼠模型的构建方法,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤S1中所述对小鼠FKBP10基因进行flox修饰的具体方法为在小鼠FKBP10基因的第2-6外显子序列两端插入LoxP序列。

3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤S1的具体步骤为:

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述gRNA包括gRNA1和gRNA2;

5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述供体载体包括5’同源臂、2.4kb的flox区域和3’同源臂。

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【技术特征摘要】

1.一种肢芽间充质干细胞中fkbp10基因条件性敲除小鼠模型的构建方法,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤s1中所述对小鼠fkbp10基因进行flox修饰的具体方法为在小鼠fkbp10基因的第2-6外显子序列两端插入loxp序列。

3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤s1的具体步骤为:

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述grna包括grna1和grna2;

5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述供体载体包括5’同源...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱明伟尚丽媛唐亚平徐宏文李霞农恬颖李朝晖徐益波李敬春
申请(专利权)人:广州医科大学附属妇女儿童医疗中心
类型:发明
国别省市:

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