【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物模型构建,具体涉及肢芽间充质干细胞中fkbp10基因条件性敲除小鼠模型的建立及其应用。
技术介绍
1、bruck综合征(bs)是一种罕见的常染色体隐性成骨不全症,主要表现为先天性关节挛缩、骨脆性、婴儿或幼儿开始的多发性骨折、四肢畸形和脊柱侧弯等。fkbp脯氨酰异构酶10(fk506 binding protein10,fkbp10)基因为一种高度保守的蛋白质编码基因,也称为oi6、oi11、brks1、fkbp65、ppiase、hfk-bp65,属于fkbp型肽基脯氨酰顺反式异构酶家族,起分子伴侣的作用。
2、fkbp10基因突变可致bruck综合征(bs),然而其致病机制仍不清楚。fkbp10表达于骨骼、肌腱和韧带中。近期,有报道使用成骨细胞特异性col1a1 2.3kb cre重组酶小鼠成骨细胞中敲除fkbp10基因,发现在该动物模型中,骨的数量的变化很小,且骨基质矿化的程度没有差异,未表现出成骨不全表型。表明fkbp10突变导致的成骨不全症状不是由于fkbp10在成骨细胞中的作用缺失而导致。
...【技术保护点】
1.一种肢芽间充质干细胞中FKBP10基因条件性敲除小鼠模型的构建方法,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤S1中所述对小鼠FKBP10基因进行flox修饰的具体方法为在小鼠FKBP10基因的第2-6外显子序列两端插入LoxP序列。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤S1的具体步骤为:
4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述gRNA包括gRNA1和gRNA2;
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述供体载体包括5’同源臂、2.4kb的flox区域和
...【技术特征摘要】
1.一种肢芽间充质干细胞中fkbp10基因条件性敲除小鼠模型的构建方法,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤s1中所述对小鼠fkbp10基因进行flox修饰的具体方法为在小鼠fkbp10基因的第2-6外显子序列两端插入loxp序列。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤s1的具体步骤为:
4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述grna包括grna1和grna2;
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述供体载体包括5’同源...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱明伟,尚丽媛,唐亚平,徐宏文,李霞,农恬颖,李朝晖,徐益波,李敬春,
申请(专利权)人:广州医科大学附属妇女儿童医疗中心,
类型:发明
国别省市:
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