【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及一种蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其也为一种蚕类绢丝腺单核悬液的制备方法。
技术介绍
1、单细胞技术能够在单细胞分辨率下解析细胞间的异质性,确定所有类型细胞中基因的表达模式、生理状态、发育轨迹等信息,从而为研究发育和基因表达调控提供前所未有的数据资源。最近几年来,单细胞相关技术蓬勃发展,将生命科学研究推进到前所未有的高分辨率视场。
2、蚕丝业是发端于我国的传统优势农业产业,为推动经济社会发展和世界贸易及人文交流做出了卓越历史贡献。随着蚕丝及其蛋白功能被广泛挖掘和再认识,蚕丝(蛋白)在组织工程、生物医药、食品、日化等诸多领域展现出了广阔应用前景。蚕类绢丝腺作为不同蚕类(桑蚕、大蚕蛾科等物种)专一合成并分泌丝蛋白的产丝器官,其含有大约2000-3000个细胞;蚕类绢丝腺合成分泌丝蛋白的效率关乎蚕丝产量,丝蛋白的组分和结构等决定了蚕丝关键品质(纤度、净度、解舒率、机械性能等),它们均受严格的分子机制调控。现有研究或在先研究从丝蛋白合成与调控的器官基础、基因概貌、表达特征等进行了组织水平的揭示,然而在组
...【技术保护点】
1.一种蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,其选取家蚕、野蚕、樗蚕、柳蚕、蓖麻蚕绢丝腺为材料,对绢丝腺进行完整解剖和净化处理,采用多酶联用和冷冻裂解技术分别制备出质量和产量高的单细胞和单细胞核悬液。
2.根据权利要求1所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,步骤S1中针对蚕卵用1×PBS的缓冲液将其进行充分浸泡,确保蚕卵附着的杂质和蚕连纸充分清洗干净;针对幼虫个体用1×PBS的缓冲液清理表皮附着蚕粪等污渍。
4.根据权利要求2所述
...【技术特征摘要】
1.一种蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,其选取家蚕、野蚕、樗蚕、柳蚕、蓖麻蚕绢丝腺为材料,对绢丝腺进行完整解剖和净化处理,采用多酶联用和冷冻裂解技术分别制备出质量和产量高的单细胞和单细胞核悬液。
2.根据权利要求1所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,步骤s1中针对蚕卵用1×pbs的缓冲液将其进行充分浸泡,确保蚕卵附着的杂质和蚕连纸充分清洗干净;针对幼虫个体用1×pbs的缓冲液清理表皮附着蚕粪等污渍。
4.根据权利要求2所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,步骤s1对不同蚕类样本进行洁净处理,其采用多化性家蚕的蚕卵和其他蚕类蚕卵,将选择的蚕卵均置于25℃、相对湿度85%的环境中进行孵化,孵化出蚁蚕。
5.根据权利要求4所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,步骤s1进一步包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的蚕类绢丝腺单细胞悬液的制备方法,其特征在于,步骤s3中用镊子将绢丝腺...
【专利技术属性】
技术研发人员:马艳,李志伟,徐小清,唐艺芸,李青俊,胡杰,向仲怀,徐汉福,
申请(专利权)人:西南大学,
类型:发明
国别省市:
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