一种修饰的Pae CasDinG解旋酶及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种修饰的Pae CasDinG解旋酶及其应用，涉及基因测序技术领域。本发明专利技术首先提供了具有解旋活性的CasDinG解旋酶截短体，进一步提供了通过连接分子将HD1结构域中WalKerA基序和WalkerB基序共价连接的经修饰的Pae CasDinG解旋酶，所述修饰提高了本发明专利技术Pae CasDinG解旋酶与多核苷酸结合的稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因测序、分子检测以及临床检测，具体涉及一种修饰的paecas ding解旋酶及其应用。

技术介绍

1、casding是细菌用于抵抗外来入侵遗传因子的crispr-cas获得性免疫iv-a型系统中的一个关键组分，其具有依赖于腺嘌呤核苷三磷酸(atp)和金属离子的5′-3′dna解旋活性，为了进一步开发该蛋白的测序应用，提出了本专利技术。

技术实现思路

1、本专利技术首先提供截短的pae casding解旋酶，其为pea casding解旋酶(pdb:8e2w)蛋白去除n端结构域，其序列为seq id no:1所示。

2、本专利技术再一方面提供一种修饰的pae casding解旋酶，所述修饰的pae casding解旋酶的亲本序列为seq id no:1或与seq id no:1具有90％同源性的序列；所述修饰的paec asding在164-171和326-344之间，或354-361和492-495之间存在至少一个共价连接。

3、优选地，所述修饰的pae casding本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种修饰的Pae CasDinG解旋酶，其特征在于，所述修饰的Pae CasDinG解旋酶的亲本序列为SEQ ID NO:1或与SEQ ID NO:1具有至少90％同源性的序列；所述修饰的Pae CasDinG解旋酶在E167、S166、D168位中的至少一个和R327、D328、R330、S331位中的至少一个，或在P356和K493组合之间存在至少一个共价连接，所述氨基酸位置以SEQ ID N O:1为参考。

2.根据权利要求1所述的修饰的Pae CasDinG解旋酶，其特征在于，在167位和327位的之间存在共价连接。

3.根据权利要求1所述的修饰的Pa...

【技术特征摘要】

1.一种修饰的pae casding解旋酶，其特征在于，所述修饰的pae casding解旋酶的亲本序列为seq id no:1或与seq id no:1具有至少90％同源性的序列；所述修饰的pae casding解旋酶在e167、s166、d168位中的至少一个和r327、d328、r330、s331位中的至少一个，或在p356和k493组合之间存在至少一个共价连接，所述氨基酸位置以seq id n o:1为参考。

2.根据权利要求1所述的修饰的pae casding解旋酶，其特征在于，在167位和327位的之间存在共价连接。

3.根据权利要求1所述的修饰的pae casding解旋酶，其特征在于，在所述位点替换或插入半胱氨酸，通过二硫键或连接分子实现半胱氨酸之间共价连接；所述连接分子包括：双马来酰亚胺乙烷、1,4-双马来酰亚胺丁烷、双马来酰亚胺己烷、二硫代马来酰亚胺乙烷、三(2-双马来酰亚氨基乙基)胺、1,8-双马来酰亚胺-二乙二醇以及1,11-双...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷天燕，崔洋，娄继忠，
申请(专利权)人：北京普译生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：