一种用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器及其应用，属于传感器技术领域。本发明专利技术用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器包括端粒酶RPA恒温扩增体系试剂、CRISPR/Cas12a试剂和荧光探针。本发明专利技术的荧光定量传感器利用CRISPR‑Cas12a系统的反式剪切酶活性，结合荧光探针能够进一步简化端粒酶活性的检测过程，提高检测特异性和灵敏度；本发明专利技术的荧光定量传感器检测成本低、时间短，能够使检测结果与端粒酶活性之间建立准确的线性关系，使结果可视化有利于实现早期大批量筛查，具备实现快速早期诊断膀胱癌的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于传感器，具体涉及一种用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器及其应用。

技术介绍

1、膀胱癌(bca)是发生在膀胱黏膜上的最常见的泌尿系统恶性肿瘤，同时是全球第十大最常见的癌症和第二大最常见的泌尿系统恶性肿瘤。现在每年新增病例约50万和死亡病例约200,000例，其中男性的发病率是女性的四倍，严重威胁人类健康。膀胱癌的诊断可大概分为非肌肉浸润性膀胱癌(nmibc)(约为75％-80％)和肌肉浸润性膀胱癌(mibc)(约为20％-25％)。其中nmibc具有肿瘤异质性，进展为mibc的可能性约为0.8-45％，复发可能性则高达50-78％。再加上由于缺乏可靠的早期诊断与筛查方法以及初始治疗后的高复发率等原因，导致大部分患者需要长期进行膀胱镜进行监测以及各种治疗干预，这使得bca成为诊断和治疗最具挑战性和最昂贵的癌症之一，这将给患者甚至整个公共卫生系统带来巨大经济负担。降低bca死亡率和发病率的最大希望仍然是早期发现并随后手术切除nmibc。因此准确的早期诊断以正确和快速地确定nmibc患者就显得尤为重要。现有的检测膀胱癌的方法包括尿液细胞学、膀胱镜检本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，包括端粒酶RPA恒温扩增体系试剂、CRISPR/Cas12a试剂和荧光探针。

2.根据权利要求1所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述端粒酶RPA恒温扩增体系试剂包括端粒酶恒温扩增引物；所述端粒酶恒温扩增引物选择以下任意一对：

3.根据权利要求1所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述CRISPR/Cas12a试剂包括特异性crRNA引物、Cas12a蛋白。

4.根据权利要求3所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述特异性crRNA引物包括上...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，包括端粒酶rpa恒温扩增体系试剂、crispr/cas12a试剂和荧光探针。

2.根据权利要求1所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述端粒酶rpa恒温扩增体系试剂包括端粒酶恒温扩增引物；所述端粒酶恒温扩增引物选择以下任意一对：

3.根据权利要求1所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述crispr/cas12a试剂包括特异性crrna引物、cas12a蛋白。

4.根据权利要求3所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述特异性crrna引物包括上游引物和下游引物；所述上游引物的序列如seq id no:9所示；所述下游引物的序列如seq id no:10所示。

5.根据权利要求1所述的用于检测端粒酶活性的荧光定量传感器，其特征在于，所述荧光探针为含有ttatt序列的fq探针；所述fq探针的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏星，王梦婷，陈文哲，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院广州呼吸中心，
类型：发明
国别省市：