一种表达人源可溶性Nectin-4胞外域蛋白的真核重组表达载体、重组细胞及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程领域，特别是涉及一种表达人源可溶性Nectin‑4胞外域蛋白的真核重组表达载体、重组细胞及其应用。本发明专利技术成功构建了pCMV3‑Nectin‑4<subgt;ECD</subgt;‑IgG1表达载体，应用该载体成功实现了Nectin‑4胞外域蛋白的分泌表达，通过ProteinA亲和层析纯化法获得了高纯度的融合蛋白，为Nectin‑4靶向药物的研究应用和开发抗麻疹病毒药物奠定了一定的基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程领域，特别是涉及一种表达人源可溶性nectin-4胞外域蛋白的真核重组表达载体、重组细胞及其应用。

技术介绍

1、nectin-4又名脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白，属于免疫球蛋白超家族中的nectin家族，该家族包括4个nectin分子(nectin 1-4)和5个nectin样分子(nectin-like 1-5)。nectin-4由510个氨基酸组成，属于i型单次跨膜蛋白，包括胞外段、跨膜区和胞内段。胞外区由1个可变区和2个稳定区构成，分别是ig-v、2个ig-c2，胞内区包含一段较为保守的序列。

2、nectin-4广泛表达于人胎盘滋养层、胃腺、肺、乳腺及卵巢癌细胞，在扁桃体、口腔黏膜、食道、鼻咽和器官的柱状上皮细胞，以及肺巨噬细胞也有表达。

3、许多研究证实，nectin-4蛋白在乳腺癌、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌和胰腺癌等组织中都具有特异性的高表达，与肿瘤的发生和转移具有密切的关系。因此，nectin-4有望成为多种肿瘤的生物标志物。如何获得nectin-4蛋白对其nectin-4的靶向药物的临床开发、研究本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达人源可溶性Nectin-4胞外域蛋白的真核重组表达载体，其特征在于，所述真核重组表达载体为在真核表达载体的多克隆位点插入Nectin-4胞外域基因；所述真核表达载体为pCMV3-IgG1。

2.根据权利要求1所述的真核重组表达载体，其特征在于，所述Nectin-4胞外域基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的真核重组表达载体，其特征在于，所述真核表达载体的多克隆位点为pCMV3-IgG1质粒的AfeI酶切位点和BmtI酶切位点。

4.表达人源可溶性Nectin-4胞外域蛋白的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞...

【技术特征摘要】

1.一种表达人源可溶性nectin-4胞外域蛋白的真核重组表达载体，其特征在于，所述真核重组表达载体为在真核表达载体的多克隆位点插入nectin-4胞外域基因；所述真核表达载体为pcmv3-igg1。

2.根据权利要求1所述的真核重组表达载体，其特征在于，所述nectin-4胞外域基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的真核重组表达载体，其特征在于，所述真核表达载体的多克隆位点为pcmv3-igg1质粒的afei酶切位点和bmti酶切位点。

4.表达人源可溶性nectin-4胞外域蛋白的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞为将权利要求1-3任一项所述的真核重组表达载体导入293t细胞后获得的。

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【专利技术属性】
技术研发人员：陈楠，丁永斌，赵雅玮，薛宁，
申请(专利权)人：句容市人民医院，
类型：发明
国别省市：