一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法及其应用，属于向日葵种皮带菌检测技术领域。一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，步骤如下：S1、种皮真菌富集，将向日葵种子去壳后，取种皮/种壳加入装有无菌ddH<subgt;2</subgt;O的离心管中，经摇动、振荡、超声、振荡后，离心取沉淀；S2、真菌菌丝DNA提取及鉴定，将步骤S1获得的沉淀晾干后，液氮速冻，研磨，提取DNA，然后进行PCR，将PCR产物送公司测序，将获得的测序数据进行Blast，确定真菌种类。本发明专利技术提供的检测方法可以实现向日葵种皮中真菌的快速富集；检测灵敏度高、结果可靠性好，可以实现种皮中真菌菌株的检测；检测过程简单、易操作、检测成本低，适于向日葵种皮中致病真菌的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及向日葵种皮带菌检测，尤其是涉及一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法及其应用。

技术介绍

1、向日葵(helianthus annuus l.)为一年生草本植物，因花序随太阳转动而得名，其花序为头状花序，直径在10-30cm之间，是世界第四大油料作物，现如今在我国的栽培面积仅次于大豆和油菜，是我国的第三大油料作物。除了有用于榨油的向日葵品种，还有观赏类向日葵和直接食用类向日葵。

2、向日葵是病虫害发生较多的作物，全世界已报道的向日葵病害至少有30种，其中较为常见的病害主要有3种：真菌性病害、细菌性病害，以及病毒性病害。基于向日葵的实际生长发育而言，真菌性病害在很大程度上影响着向日葵的生长与产量。而真菌性病害大多数以孢子形态越冬或规避不适宜生长的环境条件，种皮是其重要的负载媒介。

3、向日葵霜霉病，随带菌的种子传播蔓延，由霍尔斯轴霜霉或向日葵单轴霉引起，叶片受害后叶面沿叶脉开始出现褪绿斑块，病株生长缓慢或朽住不长，后期叶片变褐焦枯，花盘畸形，结实失常或空杆。

4、向日葵菌核病，以菌核在土壤内、病残体中及种子间越冬本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于，所述步骤S2替换成S2′：

3.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤S1中ddH2O的用量为：2-3粒向日葵种子的种壳加入1.5mL无菌ddH2O。

4.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤S1中摇动指以110-120rpm的速度常温下摇动3h；振荡指在研磨机上高速振荡2-3min；超声指于超声波细胞破碎机中处理20-30min。

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【技术特征摘要】

1.一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于，所述步骤s2替换成s2′：

3.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤s1中ddh2o的用量为：2-3粒向日葵种子的种壳加入1.5ml无菌ddh2o。

4.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤s1中摇动指以110-120rpm的速度常温下摇动3h；振荡指在研磨机上高速振荡2-3min；超声指于超声波细胞破碎机中处理20-30min。

5.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤s1中离心指以13000-15000rpm离心5min，离心前于超净工作台中将种皮用无菌镊子取出。

6.根据权利要求1所述的一种向日葵种皮带菌快速富集检测方法，其特征在于：所述步骤s2中晾干指置于超净工作台中10-15min，研磨指于研磨机上高...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文兵，张键，曼德拉，杨佳乐，张之为，赵君，杨剑锋，孔祥久，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：