一种麦角硫因的合成方法技术

本发明专利技术属于生物合成技术领域，公开了一种麦角硫因的合成方法。该合成方法，以组氨酸为主底物，对甲苯磺酸甲酯为副底物，在EgtD酶和甲基转移酶的催化下，制得组氨酸甜菜碱；然后加入聚硫化物，于St酶的催化下，生成麦角硫因；EgtD酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，甲基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示，St酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明专利技术提供的合成方法通过对副底物进行选择，对HMT酶、St酶进行筛选，不仅能够避免有毒物质碘甲烷的使用，而且筛选的St酶能够直接催化第一步生成的组氨酸甜菜碱，能够大幅度简化工艺，适于工业放大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物合成，具体涉及一种麦角硫因的合成方法。

技术介绍

1、麦角硫因(ergothioneine，简称egt)是一种特殊的硫代组氨酸甜菜碱的氨基酸，具有独特的氧化还原特性，且对植物和动物具有独特的生理作用，是天然的抗氧化剂和潜在的营养食品，在食品、化妆品和医药等行业具有巨大的应用前景。因此，研究出产量高，适于工业放大的合成方法对麦角硫因的应用具有重要意义。

2、麦角硫因的传统生物合成主要以平菇、猴头菇和榆黄菇等天然蘑菇发酵。直至2010年，florian p.seeback报道了耻垢分枝杆菌代表的细菌来源的麦角硫因合成基因簇egtabcde，表达的5种酶可以利用组氨酸、腺苷蛋氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、atp在有氧条件下合成egt。但是该途径较长、所用酶较多，效率低。2012年，波士顿大学刘平华证实链孢霉菌代表的真菌来源相对简单的3步合成途径egt1-egt2/egte，使得生物工程大量合成麦角硫因成为可能。2017年florian p.seeback又报道了绿硫细菌来源的厌氧合成途径eana/egtd/egt1-eanb，后又证明嗜热本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种麦角硫因的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中所述缓冲液中包含甘氨酸。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，在步骤(1)所述反应的体系中对甲苯磺酸二硫酸腺苷蛋氨酸的添加量为0.5mM-8mM；优选地，所述对甲苯磺酸二硫酸腺苷蛋氨酸的添加量为0.75mM-8mM。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的合成方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述反应进行后补加对甲苯磺酸甲酯，反应体系中所述对甲苯磺酸甲酯的总添...

【技术特征摘要】

1.一种麦角硫因的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中所述缓冲液中包含甘氨酸。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，在步骤(1)所述反应的体系中对甲苯磺酸二硫酸腺苷蛋氨酸的添加量为0.5mm-8mm；优选地，所述对甲苯磺酸二硫酸腺苷蛋氨酸的添加量为0.75mm-8mm。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的合成方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述反应进行后补加对甲苯磺酸甲酯，反应体系中所述对甲苯磺酸甲酯的总添加量为150mm-400mm；优选地，反应体系中所述对甲苯磺酸甲酯的总添加量为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李英，陈有朋，闫修瑜，吕文博，
申请(专利权)人：珠海宝锐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：