一株产L-酪氨酸的大肠杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株产L‑酪氨酸的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术通过理性代谢工程改造获得L‑酪氨酸的重组菌株，在E.coli SA07基础上，通过回补表达aroK、aroL和tyrAfbr(M53I/A354V)，敲除全局调节因子基因tyrR，pheA，trpD，tyrP，发酵罐发酵L‑酪氨酸产量达到45.8g/L；利用中等强度启动子过表达DNA结合转录双调节因子基因marA提高了菌株的存活率，经过5L发酵罐发酵48h，酪氨酸产量可以达到65.9g/L，葡萄糖得率为21.9％，死亡率降低至43.5％。本发明专利技术发酵生产酪氨酸的方法工艺操作简单易行、性能稳定，适用于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株产l-酪氨酸的大肠杆菌及其应用，属于生物。

技术介绍

1、l-酪氨酸(l-tyrosine，tyr)，又名(s)-2-氨基-3-对羟苯基丙酸，是三大芳香族氨基酸之一，在医药、食品、饲料和化工等领域有广泛应用。医药领域中，可作为氨基酸类的药物，用于治疗脑炎、脊髓灰质炎等疾病，在食品、饲料中可作为营养补充剂、增香剂使用，在化工领域中可作为原料用于有机合成多巴、甲状腺素和肾上腺素等。

2、l-酪氨酸的生产方法主要有水解法、化学合成法、生物酶法和生物发酵法。蛋白质水解法和化学合成法，由于过程复杂，收率低，对环境的污染较大，已经逐渐被微生物法取代。微生物直接发酵法生产氨基酸具有可以利用廉价碳源、反应温和、操作简单等优势。大肠杆菌中l-酪氨酸的合成途径和调控机制清晰明确，通过对l-酪氨酸的合成途径进行合理设计和优化以实现l-酪氨酸的高效发酵生产，包括提高前体物质的供应量、解除关键酶的反馈抑制、阻断竞争代谢途径和调节转运系统等方法。周景文团队对l-酪氨酸转运系统进行了改造以减少l-酪氨酸在细胞内的积累，然后引入磷酸酮醇酶途径，并进行辅因子工本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高效生产L-酪氨酸的重组大肠杆菌，其特征在于，所述的重组大肠杆菌中，以E.coli SA07为出发菌株，回补莽草酸激酶I编码基因aroK和莽草酸激酶II编码基因aroL，过表达tyrAfbr(M53I/A354V)基因。

2.根据权利要求1所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，敲除全局调节因子编码基因tyrR，编码分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因pheA和编码苯甲酸合成酶亚基基因trpD。

3.根据权利要求2所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，敲除编码酪氨酸通透酶基因tyrP。

4.根据权利要求3所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，过表达DNA结合转录双...

【技术特征摘要】

1.一种高效生产l-酪氨酸的重组大肠杆菌，其特征在于，所述的重组大肠杆菌中，以e.coli sa07为出发菌株，回补莽草酸激酶i编码基因arok和莽草酸激酶ii编码基因arol，过表达tyrafbr(m53i/a354v)基因。

2.根据权利要求1所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，敲除全局调节因子编码基因tyrr，编码分支酸变位酶/预苯酸脱水酶基因phea和编码苯甲酸合成酶亚基基因trpd。

3.根据权利要求2所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，敲除编码酪氨酸通透酶基因tyrp。

4.根据权利要求3所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，过表达dna结合转录双调节因子基因mara。

5.根据权利要求4所述的的重组大肠杆菌，其特征在于，利用中等强度启动子或强启动子起始...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘佳，吴静，姜雨辰，胡贵鹏，刘立明，陈修来，高聪，宋伟，魏婉清，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：