一种高效表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的工程菌及应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种高效表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的工程菌，该工程菌中包含构建的重组表达载体和共表达载体，所述重组表达载体包含表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的基因和组成型启动子HCE基因，所述共表达载体包含分子伴侣蛋白的基因，所述分子伴侣蛋白包括dnaJ、dnaK、GroEL和grpE。本发明专利技术通过替换启动子更高效的进行表达，并使D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶与分子伴侣共表达，有效减少包涵体蛋白的形成，分子伴侣进行辅助折叠形成四聚体高级结构，提高表达出可溶蛋白的效率，从而提高D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的表达水平，降低制备成本。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种高效表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶的工程菌及应用。

技术介绍

1、阿洛酮糖又称d-阿洛酮糖，为d-果糖三号位碳所对应的差向异构体，阿洛酮糖具有与蔗糖相似的口感，但其甜度相当于蔗糖的70％，热量相当于蔗糖的0.3％，且几乎不在体内代谢。并且由于可以通过抑制葡萄糖的吸收来抑制葡萄糖，因此具有降血糖的功效，是最具潜力的蔗糖替代品之一。

2、阿洛酮糖天然存在于葡萄干、无花果、猕猴桃和红糖等食物中，是自然界中含量极少的稀有单糖，依靠天然产物提取的方法成本高，且很难达到量产。现有技术中，制造d-阿洛酮糖的方法中有化学方法和生物方法。如比利克(bilik)等人曾研发利用钼酸离子的催化作用来由果糖生产阿洛酮糖的技术。麦克唐纳(mcdonald)通过对1,2:4,5-二-o-丙酮缩甘油-β-d-果糖进行三步骤化学处理过程来生产了阿洛酮糖。

3、但化学方法会产生大量的副产物和使用大量化学试剂，且生产效率并不高。近年来，生物方法制备阿洛酮糖以其安全、绿色、环保的优势而逐渐成为未来的主流趋势。早期，肯·伊兹莫里(keni本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.如下任意项在生产D-阿洛酮糖中的应用：

2.表达元件，其特征在于，所述表达元件包括表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的基因和组成型启动子HCE基因。

3.如权利要求2所述的表达元件，其特征在于，还包括RBS序列。

4.如权利要求2或3所述的表达元件，其特征在于，所述D-阿洛酮糖3-差向异构酶具有：

5.共表达元件，其特征在于，所述共表达元件包括分子伴侣蛋白的基因和/或缺失lacZ基因；

6.如权利要求5所述的共表达元件，其特征在于，包括如下任意项和/或缺失lacZ基因：

7.如权利要求5或6所述的共表达元件，其特征在...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.如下任意项在生产d-阿洛酮糖中的应用：

2.表达元件，其特征在于，所述表达元件包括表达d-阿洛酮糖3-差向异构酶的基因和组成型启动子hce基因。

3.如权利要求2所述的表达元件，其特征在于，还包括rbs序列。

4.如权利要求2或3所述的表达元件，其特征在于，所述d-阿洛酮糖3-差向异构酶具有：

5.共表达元件，其特征在于，所述共表达元件包括分子伴侣蛋白的基因和/或缺失lacz基因；

6.如权利要求5所述的共表达元件，其特征在于，包括如下任意项和/或缺失lacz基因：

7.如权利要求5或6所述的共表达元件，其特征在于，还包括rbs序列和/或lac启动子。

8.如权利要求5至7任一项所述的共表达元件，其特征在于，包括如下任意项：

9.如权利要求5至8任一项所述的共表达元件，其特征在于，所述dn...

【专利技术属性】
技术研发人员：华君，裴亮，李政泓，潘月，刘超，
申请(专利权)人：四川盈嘉合生科技有限公司，
类型：发明
国别省市：