鉴定幽门螺杆菌抗原肽的方法及应用技术

本发明专利技术涉及免疫检测技术领域，尤其涉及一种系统鉴定幽门螺杆菌抗原肽的方法及应用。本发明专利技术提供的方法包括：制备幽门螺杆菌裂解液；使用树突状细胞摄取所述幽门螺杆菌裂解液中的抗原肽，形成MHC‑II抗原肽复合物；裂解提呈抗原的树突状细胞，从树突状细胞裂解液中捕获所述MHC‑II抗原肽复合物；通过质谱法鉴定幽门螺杆菌抗原肽。本发明专利技术提供的方法能极大地增加进入DC的病原体蛋白含量，使其被提呈的概率增高，同时消除了吞噬完整病原体对DC抗原提呈功能的影响。由本发明专利技术方法筛选出的抗原表位具有更高的可靠性，覆盖度更高，可筛选出优势抗原的优势表位，为H.pylori疫苗研发提供重要的抗原表位选择，具有重要的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫检测，尤其涉及一种鉴定幽门螺杆菌抗原肽的方法及应用。

技术介绍

1、幽门螺杆菌( helicobacter pylori, h. pylori)可在胃黏膜表面定植，引起严重的胃肠道疾病，包括慢性和萎缩性胃炎、消化性溃疡、malt淋巴瘤和胃癌。全世界90%的非贲门胃癌是由 h. pylori感染引起的。目前根除 h. pylori 感染的一线治疗方案是基于ppi和抗生素的四联疗法，但随着 h. pylori 对常用抗生素的耐药性不断增强，根除率已经下降到80%以下。针对 h. pylori感染带来的严重疾病负担以及耐药现状，目前认为发展和应用 h. pylori疫苗是预防和治疗感染最有效的措施。

2、抗原及表位的选择是疫苗研发中最关键的环节，抗原表位筛选常用方法包括免疫印迹联合质谱法、蛋白质芯片联合免疫荧光法、免疫本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.鉴定幽门螺杆菌抗原肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：制备幽门螺杆菌裂解液；使用树突状细胞摄取所述幽门螺杆菌裂解液中的抗原肽，形成MHC-II抗原肽复合物；裂解提呈抗原的树突状细胞，从树突状细胞裂解液中捕获所述MHC-II抗原肽复合物；通过质谱法鉴定幽门螺杆菌抗原肽。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述幽门螺杆菌裂解液通过反复冻融结合超声的方法获得；

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述树突状细胞由人外周血单核细胞经诱导分化得到。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述诱导分化使用的培养基为Dc-M完全培养基；

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【技术特征摘要】

1.鉴定幽门螺杆菌抗原肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：制备幽门螺杆菌裂解液；使用树突状细胞摄取所述幽门螺杆菌裂解液中的抗原肽，形成mhc-ii抗原肽复合物；裂解提呈抗原的树突状细胞，从树突状细胞裂解液中捕获所述mhc-ii抗原肽复合物；通过质谱法鉴定幽门螺杆菌抗原肽。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述幽门螺杆菌裂解液通过反复冻融结合超声的方法获得；

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述树突状细胞由人外周血单核细胞经诱导分化得到。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述诱导分化使用的培养基为dc-m完全培养基；

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，使用树突状细胞摄取幽门螺杆菌裂解液中的抗原肽的方法包括：向树突状细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫雅楠，翟康乐，张建中，孙路，何利华，肖迪，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所，
类型：发明
国别省市：