一种污水厂气溶胶中诺如病毒的提取及检测方法技术

本发明专利技术提供一种污水厂气溶胶中诺如病毒的提取及检测方法，包括以下步骤：1)采用质量浓度为1％～2％的牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液为采样液对污水厂中的气溶胶进行采集，得到气溶胶采集液；2)对气溶胶采集液中的病毒进行沉淀浓缩处理，得到病毒浓缩液；3)提取病毒浓缩液中的RNA，根据RNA反转录得到cDNA，根据诺如病毒的DNA片段设计合成上游引物和下游引物，根据上游引物和下游引物对cDNA进行实时荧光PCR扩增反应，得到病毒检测结果。本发明专利技术的方法能够对污水厂气溶胶中的诺如病毒进行浓缩提取定量检测，有利于开展污水处理行业中病原体暴露风险研究、建立健全的污水处理厂健康风险评价体系。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，涉及一种污水厂气溶胶中诺如病毒的提取及检测方法。

技术介绍

1、城市生活污水中富含超过560种可致感染病毒，这些病原体经污水处理过程中的机械运动或曝气逸散形成病原性气溶胶。由于大多数污水厂未实现全自动化，场内工作人员在操作过程中存在吸入病毒气溶胶的风险。

2、气溶胶中的病毒相较于其他微生物更难被有效采集和检测，尤其是rna病毒，rna非常脆弱，相较于水体和固体介质，气体介质中缺乏病毒的团聚媒介，容易被自然界中无处不在的rna酶迅速降解，造成了空气中rna病毒的分离和回收较为复杂和困难。尽管空气中的病毒检出相对含量不高，但由于病毒的低感染浓度和高致病性，其对污水厂内工作人员的安全健康仍然存在较大威胁。

3、污水处理厂多处于室外场所，空气环境复杂，病毒气溶胶较为分散，严重影响了病毒的采集、浓缩提取以及检测，使得病毒的提取与检测难度显著提高。因此，建立污水厂中气溶胶中病毒的提取检测方法，对开展污水厂病原体暴露风险研究具有重要的指导意义。

技术实现思路

<p>1、针对现有技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种污水厂气溶胶中诺如病毒的提取及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的提取及检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述采集在污水厂氧化池曝气区液面上方不高于0.5m处的位置进行；

3.根据权利要求1所述的提取及检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述沉淀浓缩处理包括以下步骤：

4.根据权利要求1或3所述的提取及检测方法，其特征在于，所述气溶胶采集液的总体积与所述病毒浓缩液体积之比为所述病毒浓缩液的浓缩倍数，所述浓缩倍数≥60。

5.根据权利要求1-4任一项所述的提取及检测方法，其特征在于，每毫升所述病毒浓缩液中所含的...

【技术特征摘要】

1.一种污水厂气溶胶中诺如病毒的提取及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的提取及检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述采集在污水厂氧化池曝气区液面上方不高于0.5m处的位置进行；

3.根据权利要求1所述的提取及检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述沉淀浓缩处理包括以下步骤：

4.根据权利要求1或3所述的提取及检测方法，其特征在于，所述气溶胶采集液的总体积与所述病毒浓缩液体积之比为所述病毒浓缩液的浓缩倍数，所述浓缩倍数≥60。

5.根据权利要求1-4任一项所述的提取及检测方法，其特征在于，每毫升所述病毒浓缩液中所含的气溶胶的体积＞1m3。

6.根据权利要求3所述的提取及检测方法，其特征在于，所述静...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘枫，陈祥，王先恺，李锟，乔雪园，王航，李翀，董滨，
申请(专利权)人：中国长江三峡集团有限公司，
类型：发明
国别省市：