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封装生物样品的方法以及在冷冻电镜成像中的应用技术

技术编号:41339644 阅读:25 留言:0更新日期:2024-05-20 09:57
本发明专利技术属于生物电镜技术领域,涉及封装生物样品的方法以及在冷冻电镜成像中的应用。特别地,本发明专利技术涉及利用两面石墨烯膜封装生物样品的方法以及利用两面石墨烯膜封装的生物样品,用以进行冷冻电镜或常温电镜观测。本文所述一种封装生物样品的方法包括如下步骤:(1)滴加合适浓度的生物样品溶液至石墨烯膜电镜载网,石墨烯膜电镜载网滴加生物样品前经过亲水化处理;(2)在滴加了样品的石墨烯膜电镜载网上方(或所滴加的样品上方)再额外施加自支撑石墨烯膜,以得到石墨烯膜封装样品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物电镜,涉及一种封装生物样品的方法以及封装的生物样品。特别地,本专利技术涉及利用两面石墨烯膜封装生物样品的方法以及利用两面石墨烯膜封装的生物样品,用以进行冷冻电镜或常温电镜观测。


技术介绍

1、冷冻电子显微镜(cryo-em)是一种强大的工具,在结构生物学和材料科学领域中用于分析敏感材料在生理状态下的高分辨率结构。该技术通过冷冻水溶液样品,并在液氮温度下对其进行表征。最近的算法和硬件突破提高了该技术的结构分析效率,使得生物大分子的结构解析能够达到原子分辨率。然而,高质量的样品制备仍然是cryo-em结构分析过程中的一个关键挑战,限制了最终高分辨率结构的重建。

2、石墨烯是一种仅有一个原子厚度的二维材料,具有优越的导电性和机械强度。石墨烯膜已经被开发用作cryo-em样品制备的支撑薄膜,具有改善样品颗粒吸附和减少电子束诱导的样品颗粒漂移等优点。然而,在用石墨烯膜作为支撑膜的现有样品中,石墨烯支撑膜仅存在于样品溶液一侧,而样品的另一侧则是暴露在空气中,因而所述样品仍然存在气液界面干扰的风险。使用无定形薄碳膜或氮化硅薄膜在目标样品溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种封装生物样品的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的方法,其中,在步骤(1)中,将石墨烯膜电镜载网带有石墨烯膜的表面朝上放置于密闭等离子清洗仪器中,抽真空后,用低档电压辉光放电处理,以得到亲水性的石墨烯膜电镜载网。

3.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中,在步骤(1)中,还进一步孵育生物样品和石墨烯膜电镜载网。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中,在步骤(2)中,将滴加了样品的石墨烯膜电镜载网置于缓冲液中,随后将自支撑石墨烯膜也置于缓冲液中并置于滴加了样品的石墨烯膜电镜载网上方,其中样品位于自支撑石墨烯膜和石墨烯膜...

【技术特征摘要】

1.一种封装生物样品的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的方法,其中,在步骤(1)中,将石墨烯膜电镜载网带有石墨烯膜的表面朝上放置于密闭等离子清洗仪器中,抽真空后,用低档电压辉光放电处理,以得到亲水性的石墨烯膜电镜载网。

3.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中,在步骤(1)中,还进一步孵育生物样品和石墨烯膜电镜载网。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中,在步骤(2)中,将滴加了样品的石墨烯膜电镜载网置于缓冲液中,随后将自支撑石墨烯膜也置于缓冲液中并置于滴加了样品的石墨烯膜电镜载网上方,其中样品位于自支撑石墨烯膜和石墨烯膜电镜载网之间,以得到石墨烯膜封装样品;优选地,从缓冲液中取出石墨烯膜封装样品后置于合适载体上,干燥。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中,在步骤(2)中,先将自支撑石墨烯膜置于缓冲液中,然后将滴加了样品的石墨烯膜电镜载网置于缓冲液中并置于自支撑石墨烯膜下方,其中样品位于自支撑石...

【专利技术属性】
技术研发人员:王宏伟彭海琳刘楠徐洁高啸寅郑黎明
申请(专利权)人:清华大学
类型:发明
国别省市:

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