【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测，具体涉及一种检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒及其用途。
技术介绍
1、除了育龄期的生殖障碍，pcos患者往往伴有长期、明显的代谢异常，包括肥胖、血脂异常、胰岛素抵抗、代谢综合征等。pcos妇女中肥胖的发生率30%-60%，且与年龄和体重相匹配的对照人群相比，pcos患者更容易发生腹型肥胖，瘦型pcos患者也容易出现腹部脂肪堆积。pcos患者合并血脂异常的比例高达70%，主要表现为高密度脂蛋白（high densitylipoprotein, hdl）降低，而低密度脂蛋白（low density lipoprotein, ldl）、甘油三酯（triglyceride, tg）和胆固醇（total cholesterol, t-cho）浓度升高。因此，pcos不仅是育龄期生殖系统问题，作为一种长期代谢紊乱性疾病，pcos几乎影响女性一生健康，特别是长期生活质量，该疾病无法治愈，但可以通过监测及调整机体内分泌代谢紊乱状态，控制代谢疾病发生风险。
2、血脂异常也是心血管疾病的主要危险因素之一，尽管目前临床越来越重视对pcos患者的代谢筛查，然而目前尚缺乏全球统一诊断标准，不同国家地区的学术机构不断提出、修订相关诊断标准。针对血脂异常，目前我国临床应用较为广泛的是《中国成人血脂异常防治指南（2016年修订版）》中的标准，满足以下一项或几项即可诊断血脂异常：甘油三酯（tg）³ 2.3 mmol/l；胆固醇（tcho）³ 6.2 mmol/l；低密度脂蛋白（ldl-c）³ 4.1 mmol/l
3、鉴于以上临床空腹采血检测多个生化指标（总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白），且判断其是否发生血脂异常的标准较为复杂，目前尚缺乏无创、快速、便捷的风险评估指标。由于pcos是一种遗传易感疾病，专利技术人团队结合孟德尔随机化分析筛选出bcat2 rs493841位点与pcos疾病发生密切关联，从而开发了一种利用taqman技术检测bcat2 rs493841位点多态性的pcr试剂盒，并利用测序方法验证了该试剂盒snp检测结果的准确性。此外，专利技术人开展大样本pcos患者临床研究，利用开发的试剂盒检测患者bcat2基因多态性，通过关联分析进一步明确bcat2 rs493841多态性与pcos患者发生血脂紊乱和高脂血症的风险密切相关。因此可以利用上述试剂盒检测pcos患者bcat2 rs493841位点基因型，通过实验操作简单、成本低廉、检测快速、结果准确、同时可实现无创采样的方法，结合pcos患者基因分型结果来评估其血脂异常风险，为患者的长期健康管理提供指导。
技术实现思路
1、本专利技术填补了现有技术的空白，提供了一种检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒及其用途。
2、为了达到本专利技术的目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、在第一个方面中，本专利技术提供了一种检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒，所述试剂盒包括基于荧光定量pcr taqman探针法检测该snp位点基因型的引物和探针，
4、所述引物包括：正向引物，其核苷酸序列如seq id no. 1所示，反向引物，其核苷酸序列如seq id no. 2所示；
5、优选地，所述引物为：正向引物（bcat2_841_f），其核苷酸序列如seq id no. 1所示，反向引物（bcat2_841_r），其核苷酸序列如seq id no. 2所示；
6、所述探针包括：探针1，其核苷酸序列如seq id no. 3所示，探针2，其核苷酸序列如seq id no. 4所示；
7、优选地，所述探针为：探针1（fam_841_t_p），其核苷酸序列如seq id no. 3所示，探针2（vic_841_c_p），其核苷酸序列如seq id no. 4所示；
8、每个所述探针分别有荧光基团和淬灭基团。
9、作为可选的方式，在上述检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒中，所述荧光基团选自fam、vic、hex、rox、ned、cy3或cy55。所述淬灭基团为nfq-mgb。
10、优选地，所述探针1的荧光基团为fam；所述探针2的荧光基团为vic。
11、优选地，所述探针1和所述探针2的淬灭基团均为nfq-mgb。
12、作为可选的方式，在上述检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒中，所述试剂盒还包括标准品，所述标准品选自以下以一种或多种：1899y、2081y或2805r。
13、优选地，基因型1为fam_t和基因型2为fam_t时，标准品为1899y；基因型1为fam_t和基因型2为vic_c时，标准品为2081y；基因型1为vic_c和基因型2为vic_c时，标准品为28055y。
14、作为可选的方式，在上述检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒中，所述试剂盒的pcr扩增程序为：预pcr读取：60℃持续1 min；保持阶段：95℃持续5 min；循环阶段步骤1：95℃持续15 s，35个循环；循环阶段步骤2：66℃持续30 s，35个循环；后pcr读取：60℃持续1min。
15、作为可选的方式，在上述检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒中，所述试剂盒包括酶反应液，所述酶反应液包括taq酶。
16、在第二个方面中，本专利技术提供了上述第一个方面所述的检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒在制备评估多囊卵巢综合征（pcos）患者血脂异常风险的产品中的用途。
17、作为可选的方式，在上述用途中，bcat2 rs493841位点cc型pcos患者的甘油三酯、低密度脂蛋白水平较bcat2 rs493841位点tt型或tc型pcos患者显著升高，总胆固醇水平较bcat2 rs493841位点tt型或tc型pcos患者有升高趋势，高密度脂蛋白水平没有差异。
18、作为可选的方式，在上述用途中，bcat2 rs493841位点cc型pcos患者发生血脂异常风险较bcat2 rs493841位点tt型或tc型pcos患者显著升高。
19、作为可选的方式，在上述用途中，所述血脂异常是高脂血症。
20、作为可选的方式，在上述用途中，所述产品的检测样本为全血或者通过口腔拭子采集的口腔粘膜上皮脱落细胞。
21、优选地，所述产品的检测样本为通过口腔拭子采集的口腔粘膜上皮脱落细胞。
22、本专利技术相对于现有技术，具有以下有益效果：
23、目前临床空腹采血检测多个生化指标（总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白），且判断其是否发生血脂异常的标准较为复杂，目前尚缺乏无创、快速、便捷的风险评估指标。本专利技术是通过检测bcat2 rs493841多态性，根据基因分型结果从而对pcos患者发生血脂异常本文档来自技高网...
【技术保护点】
1. 一种检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括基于荧光定量PCR TaqMan探针法检测该SNP位点基因型的引物和探针，
2. 根据权利要求1所述的检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述荧光基团选自FAM、VIC、HEX、ROX、NED、CY3或CY55；所述淬灭基团为NFQ-MGB。
3. 根据权利要求1所述的检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括标准品，所述标准品选自以下以一种或多种：1899Y、2081Y或2805R。
4. 根据权利要求1所述的检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的PCR扩增程序为：预PCR读取：60℃持续1 min；保持阶段：95℃持续5 min；循环阶段步骤1：95℃持续15 s，35个循环；循环阶段步骤2：66℃持续30 s，35个循环；后PCR读取：60℃持续1 min。
5. 根据权利要求1所述的检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒
6. 权利要求1至5中任一项所述的检测BCAT2 rs493841多态性的试剂盒在制备评估多囊卵巢综合征（PCOS）患者血脂异常风险的产品中的用途。
7. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于：BCAT2 rs493841位点CC型PCOS患者的甘油三酯、低密度脂蛋白水平较BCAT2 rs493841位点TT型或TC型PCOS患者显著升高，总胆固醇水平较BCAT2 rs493841位点TT型或TC型PCOS患者有升高趋势，高密度脂蛋白水平没有差异。
8. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于：BCAT2 rs493841位点CC型PCOS患者发生血脂异常风险较BCAT2 rs493841位点TT型或TC型PCOS患者显著升高。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述血脂异常是高脂血症。
10.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述产品的检测样本为全血或者通过口腔拭子采集的口腔粘膜上皮脱落细胞。
...【技术特征摘要】
1. 一种检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括基于荧光定量pcr taqman探针法检测该snp位点基因型的引物和探针，
2. 根据权利要求1所述的检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述荧光基团选自fam、vic、hex、rox、ned、cy3或cy55；所述淬灭基团为nfq-mgb。
3. 根据权利要求1所述的检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括标准品，所述标准品选自以下以一种或多种：1899y、2081y或2805r。
4. 根据权利要求1所述的检测bcat2 rs493841多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的pcr扩增程序为：预pcr读取：60℃持续1 min；保持阶段：95℃持续5 min；循环阶段步骤1：95℃持续15 s，35个循环；循环阶段步骤2：66℃持续30 s，35个循环；后pcr读取：60℃持续1 min。
5. 根据权利要求1所述的检测bcat2 rs493841...
【专利技术属性】
技术研发人员：乔杰，赵越，木良善，孙海鹏，李蓉，董曦，
申请(专利权)人：北京大学第三医院北京大学第三临床医学院，
类型：发明
国别省市：
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