【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种脑组织切片的染色试剂及其应用，属于生物。
技术介绍
1、脑科学作为一个新兴的科学领域，一直是研究者们极为感兴趣的领域之一。目前多组学技术逐渐应用于脑科学领域，极大拓展了脑科学研究的疆界，也将脑科学研究热潮推向了前所未有的高度。另外，单细胞空间转录组学的兴起为深入理解大脑结构和功能提供了大量的基础数据。其中，高质量的rna是单细胞空间转录组学研究的基础。降解的rna会降低结果的准确性和可靠性。组织切片的制备是空间转录组研究的第一步。从组织切片上获取的rna的完整性是准确分析单细胞空间转录组的关键。如果rna质量过差会对转录组测序产物产生影响，进而导致错误的分析结果。这些效应可能会干扰甚至掩盖大脑中本身存在的差异，使研究结果出错。对于脑组织的转录组分析，已知冷冻组织比ffpe样品更可取，因为冷冻切片获得的rna降解更少。由于冷冻切片的制备简单且不需要固定，它已成为当前脑组织的空间转录组研究中切片制备的主要方法。冷冻切片主要用激光捕获显微切割以获得单细胞，可用于单细胞空间转录组的基因检测。由于细胞和其他组织成分是不可见的，为了使它们在显微镜下可见，有必要进行先前的染色程序。在可视化的条件下，通过显微切割的方式获取单个细胞的脑组织样本，然后才能进行细胞裂解以获得rna，最后进行转录组建库。
2、也就是说，脑组织的空间转录组研究通常需要对冷冻切片进行染色以区分细胞类型。目前的冷冻切片必须经过染色才能分离靶细胞。由于染色的过程是一个亲水状态，在较长时间的染色过程中造成rnase的复活从而造成细胞rna的降解，为
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术的第一目的是提供了一种可以保留组织切片中rna的完整性的染色试剂。本专利技术的第二目的是提供了含有上述染色试剂的脑组织切片的染色试剂盒。本专利技术的第三目的是提供了一种脑组织切片染色方法。
2、技术方案：本专利技术提供的一种脑组织切片的染色试剂，包括无水乙醇和人工脑脊液组成的缓冲液，以及溶解于缓冲液中的甲酚紫。
3、其中，所述缓冲液中无水乙醇和人工脑脊液体积比为2:1～4:1。
4、其中，所述甲酚紫浓度为1％。
5、本专利技术还提供了一种脑组织切片的染色试剂盒，所述试剂盒包含上述的染色试剂。
6、其中，所述试剂盒还包括乙醇。
7、其中，所述乙醇浓度为70～100％。
8、本专利技术还提供了一种脑组织切片染色方法，，包括以下步骤：
9、(1)依次用无水乙醇、90％乙醇和70％乙醇冲洗脑组织冷冻切片；
10、(2)冲洗过后将染色试剂滴加于脑组织切片上，室温静置；所述染色试剂包括无水乙醇和人工脑脊液组成的缓冲液，以及溶解于缓冲液中的甲酚紫；
11、(3)再依次用70％乙醇、90％乙醇和无水乙醇冲洗静置后的脑组织切片。
12、其中，步骤(1)中冲洗时间为10秒～20秒。
13、其中，步骤(2)中所述缓冲液中无水乙醇和人工脑脊液体积比为2:1～4:1；甲酚紫浓度为1％；所述室温静置时间为30秒～40秒。
14、其中，步骤(3)中冲洗时间为10秒～20秒。
15、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下突出的显著优点：本专利技术首次发现在含有甲酚紫的染色试剂中加入人工脑脊液不仅能够对中枢神经系统起到物理性支持和保护作用，而且可以为脑组织冷冻切片提供相对稳定的内环境，使样本rna的降解更低，能够有效保护脑组织切片中的rna的完整性。且该方法总体用时短、操作简单、染色成本低，染色试剂可长期保存，能够广泛地应用于脑科学研究之中。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述染色试剂包括无水乙醇和人工脑脊液组成的缓冲液，以及溶解于缓冲液中的甲酚紫。
2.根据权利要求1所述的脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述缓冲液中无水乙醇和人工脑脊液体积比为2:1～4:1。
3.根据权利要求1所述的脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述甲酚紫浓度为1％。
4.一种脑组织切片的染色试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～3任一项所述的染色试剂。
5.根据权利要求4所述的脑组织切片的染色试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括乙醇。
6.根据权利要求5所述的脑组织切片的染色试剂盒，其特征在于，所述乙醇浓度为70～100％。
7.一种脑组织切片染色方法，其特征在于，包括以下步骤：
8.根据权利要求7所述的脑组织切片染色方法，其特征在于，步骤(1)中冲洗时间为10秒～20秒。
9.根据权利要求7所述的脑组织切片染色方法，其特征在于，步骤(2)中所述缓冲液中无水乙醇和人工脑脊液体积比为2:1～4:1；甲酚紫浓度为1％；所述室温静置
10.根据权利要求7所述的脑组织切片染色方法，其特征在于，步骤(3)中冲洗时间为10秒～20秒。
...【技术特征摘要】
1.一种脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述染色试剂包括无水乙醇和人工脑脊液组成的缓冲液，以及溶解于缓冲液中的甲酚紫。
2.根据权利要求1所述的脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述缓冲液中无水乙醇和人工脑脊液体积比为2:1～4:1。
3.根据权利要求1所述的脑组织切片的染色试剂，其特征在于，所述甲酚紫浓度为1％。
4.一种脑组织切片的染色试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～3任一项所述的染色试剂。
5.根据权利要求4所述的脑组织切片的染色试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括乙醇。
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