用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供了用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法及试剂盒，属于多重免疫荧光技术领域，所述方法包括：配制错配修复蛋白的一抗工作液和染料工作液；将待染色样片、所述一抗工作液、所述染料工作液、二抗试剂、抗原修复液、过氧化物酶封闭剂和清洗液放入染色机的相应位置，运行染色程序，按照MSH6、MLH1、PMS2和MSH2的顺序依次对4种错配修复蛋白进行逐一染色，获得染色样片；以防荧光淬灭封片剂对所述染色样片进行复染并封片，获得待测样片。所述待测样片经成像、软件分析，可获得4种错配修复蛋白的分析数据。该方法能够更简便、高效、准确的检测MMR状态，从而更准确的筛选可以从免疫治疗中获益的人群。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于多重免疫荧光，特别涉及用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法及试剂盒。

技术介绍

1、以pd-1/pd-l1抗体等免疫检查点抑制剂为代表的癌症免疫疗法具有与既往传统疗法和靶向治疗药物不同的作用机制，为肿瘤患者带来了新的希望。然而，临床研究数据显示，仅有20-30％的患者对pd-1/pd-l1抗体药物产生反应，因此，如何准确预测pd-1/pd-l1抗体药物获益人群是临床亟需解决的问题。

2、目前，用于预测pd-1/pd-l1抗体药物疗效的生物标志物包括：肿瘤细胞pd-l1蛋白表达、微卫星不稳定性(microsate l l ite instabi l ity，msi)、错配修复缺陷(deficient mi smatch repai r，dmmr)、肿瘤突变负荷(tumor mutat ion burden,tmb)、肿瘤新抗原(neoant igen)等。其中，dmmr在多种癌种中，尤其是结直肠癌中对pd1/pd-l1抗体药物的疗效预测准确度非常高。错配修复(mmr)是重要的dna修复机制，当mmr基因发生胚系突变或甲基化时将本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述待染色样片通过以下方法制备：

3.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述配制错配修复蛋白MSH6、MLH1、PMS2和MSH2的一抗工作液和染料工作液，具体包括：

4.根据权利要求3所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，错配修复蛋白MSH6、MLH1、PMS2和MSH2的一抗分别为兔抗人MSH6单克隆抗体、MLH1鼠抗人MLH1单...

【技术特征摘要】

1.用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述待染色样片通过以下方法制备：

3.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述配制错配修复蛋白msh6、mlh1、pms2和msh2的一抗工作液和染料工作液，具体包括：

4.根据权利要求3所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，错配修复蛋白msh6、mlh1、pms2和msh2的一抗分别为兔抗人msh6单克隆抗体、mlh1鼠抗人mlh1单克隆抗体、兔抗人pms2单克隆抗体和兔抗人msh2单克隆抗体；

5.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述二抗试剂包括增强剂和多聚hrp；

6.根据权利要求1所述的用于检测错配修复蛋白的多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述将所述待染色样片、所述一抗工作液、所述染料工...

【专利技术属性】
技术研发人员：高金良，葛军辉，石志敏，许志红，严梦，
申请(专利权)人：上海阿克曼医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：