一种RNA G-四链体/ThT荧光传感反应体系及其在生物检测中应用制造技术

技术编号:41315114 阅读:38 留言:0更新日期:2024-05-13 14:56
本发明专利技术属于生物检测技术领域,具体公开了一种RNA G‑四链体/ThT荧光传感反应体系及其在生物检测中应用。所述反应体系包括RNA G‑四链体(RNA G4)和硫黄素T(ThT),RNA G4结构相比于传统DNA G4,与ThT呈二聚化结合状态,形成双分子嵌合模式。相比于现有的DNA G4/ThT反应体系,二聚化RNA G4/ThT反应体系具备更高的荧光输出效率,更稳定的环境耐受能力以及更低的离子依赖性;而且,RNA G4/ThT反应体系可通用于现有核酸扩增体系并作为高灵敏信号输出元件,拓宽现有G4体系的生物检测应用场景,实现低丰度突变基因(例如BCR/ABL融合基因)的高灵敏检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,特别是涉及一种rna g-四链体/tht荧光传感反应体系及其在生物检测中应用。


技术介绍

1、鸟嘌呤(g)四链体(g4)是由富含鸟嘌呤序列形成的非典型核酸二级构象,可分为dna型或rna型。g-四链体结构广泛存在于人类基因组和转录组中,与许多生理过程和疾病进展密切相关。近年来,研究者通过对g4结构的深入探究表明,g-四链体可与小分子配体以高亲和力相互结合,而特定分子结构配体结合后可产生诸如类酶催化、共轭荧光等不同化学信号。这一现象引起研究者的高度关注,g4/小分子配体所构成的信号元件在生物检测领域得到了广泛应用。

2、经典的g4/小分子配体体系,如dna g4/硫黄素t(thioflavin t,tht)等,利用tht与g4结合时,其分子片段的内旋被抑制,可导致tht荧光信号强度增强数百倍。利用g4/tht特殊的“结合即发光”特性,已被广泛用于疾病突变基因、蛋白、激素等生物标志物检测。然而,传统的dna g4/tht荧光传感体系仍面临信号输出效率低、结合稳定性不足以及高离子依赖等局限。如何从结合特性、分子结构等方面入手,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种RNA G-四链体/ThT荧光传感反应体系,其特征在于,包括RNA G-四链体和配体硫黄素T,所述RNA G-四链体的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的RNA G-四链体/ThT荧光传感反应体系,其特征在于:所述RNAG-四链体与硫黄素T呈二聚化结合状态,形成双分子嵌合模式。

3.根据权利要求1所述的RNA G-四链体/ThT荧光传感反应体系,其特征在于:所述反应体系还包括缓冲液。

4.根据权利要求1所述的RNA G-四链体/ThT荧光传感反应体系,其特征在于:所述RNAG-四链体Tm值为54-...

【技术特征摘要】

1.一种rna g-四链体/tht荧光传感反应体系,其特征在于,包括rna g-四链体和配体硫黄素t,所述rna g-四链体的序列如seq id no.1或seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的rna g-四链体/tht荧光传感反应体系,其特征在于:所述rnag-四链体与硫黄素t呈二聚化结合状态,形成双分子嵌合模式。

3.根据权利要求1所述的rna g-四链体/tht荧光传感反应体系,其特征在于:所述反应体系还包括缓冲液。

4.根据权利要求1所述的rna g-四链体/tht荧光传感反应体系,其特征在于:所述rnag-四链体tm值为54-57℃。

5.根据权利要求1-4任一项所述的rna g-四链体/tht荧光传感反应体系的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述rna g-四链体与配体结合组装形成反应体系。

6.根据权利要求1-4任一项所述的rna g-四链体/tht荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员:程伟蒋蓝欣滕洁李佳
申请(专利权)人:重庆医科大学
类型:发明
国别省市:

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