【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及发酵工程，尤其是一种多巴胺生产菌株及其构建方法与应用。
技术介绍
1、多巴胺（dopamine）是内源性含氮有机化合物，简称da，是儿茶酚胺类的一种，分子式为c8h11no2，为酪氨酸（芳香族氨基酸）在代谢过程中产生的中间产物。多巴胺系统调节障碍则会导致帕金森病、精神分裂症、注意力缺陷多动综合征和垂体肿瘤等疾病的发生，此外，多巴胺还常被用于治疗多种类型的休克病症。
2、不仅如此，以多巴胺为原料，还可生产如羟基酪醇、红景天苷等高附加值产品，具有非常良好的市场前景。
3、目前多巴胺的合成方法还是主要集中在化学合成法，如用胡椒乙胺一步水解，或者使用香兰素进行一系列化学反应合成多巴胺。但是由于化学合成法反应复杂，成本高昂且部分原料具有毒性，目前急需一种更加绿色、安全、廉价的多巴胺合成方法。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种多巴胺生产菌株。
2、本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供上述多巴胺生产菌株的构建方法。
<...【技术保护点】
1.一种质粒，其特征在于：为质粒PET-DA02，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.18所示。
2.一种多巴胺生产菌株，其特征在于：为多巴胺基因工程菌DA-14，是在E.coli W3110的基础上进行代谢工程改造获得的，缺失了tynA、tyrR、pykF基因，上调了aroGfbr、aroE、tyrAfbr、tyrB、aroP、pdxJ、pdxH基因，异源表达了来源于Corynebacterium glutamicum 的cg0898基因以及Serratia rubidaea的hpaBC基因，同时携带了权利要求1所述质粒PET-DA02，所述质粒PE...
【技术特征摘要】
1.一种质粒，其特征在于：为质粒pet-da02，其核苷酸序列如序列表seq id no.18所示。
2.一种多巴胺生产菌株，其特征在于：为多巴胺基因工程菌da-14，是在e.coli w3110的基础上进行代谢工程改造获得的，缺失了tyna、tyrr、pykf基因，上调了arogfbr、aroe、tyrafbr、tyrb、arop、pdxj、pdxh基因，异源表达了来源于corynebacterium glutamicum 的cg0898基因以及serratia rubidaea的hpabc基因，同时携带了权利要求1所述质粒pet-da02，所述质粒pet-da02异源表达了来源于drosophila melanogaster的dmddc基因。
3.根据权利要求2所述的多巴胺生产菌株，其特征在于：以e.coli w3110作为底盘菌株，敲除了菌株基因组上的tyna、tyrr、pykf基因；利用trc启动子强化来源于arogfbr基因转录，并整合到基因组ygay基因位点；利用trc启动子强化aroe基因转录强度，并整合到基因组ycgh基因位点；利用trc启动子强化tyrafbr基因转录强度，并整合到基因组yeep基因位点；利用trc启动子强化tyrb基因转录强度，并整合到基因组yeel基因位点；利用trc启动子强化arop基因转录强度，并整合到基因组yjip基因位点；利用trc启动子强化pdxj基因转录强度，并整合到基因组rph基因位点；利用trc启动子强化pdxh基因转录强度，并整合到基因组yciq基因位点；利用trc启动子强化cg0898基因转录强度，并整合到基因组yjgx基因位点；利用trc启动子强化hpabc基因转录强度，并整合到基因组ylbe基因位点；利用trc启动子强化hpabc基因转录强度，并整合到基因组ycdn基因位点。
4.根据权利要求2或3所述的多巴胺生产菌株，其特征在于：所述e.coliw3110为e.coliw3110 atcc 27325。
5.根据权利要求3所述的多巴胺生产菌株，其特征在于：所述trc启动子的核苷酸序列如序列表seq id no.1所示； tyna基因的核苷酸序列如序列表seq id no.3所示；tyr...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐庆阳，李旭，姜文静，刘韪玮，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。