【技术实现步骤摘要】
本申请涉及检测分析，特别是涉及一种植酸样品的处理方法及植酸样品的质谱检测方法。
技术介绍
1、植酸（又名肌醇六磷酸，ip6）是一种天然的含磷酸类有机化合物，主要存在于植物种子中，是谷物、油料种子和豆科植物中磷的主要储存形式，对种子的生长起着重要作用。目前一些研究表明植酸具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎症、降血压和预防肾结石等多种生物学活性，在符合规定的基础上可作为一种优越的添加剂用于医药和食品工业中，此外，植酸也作为螯合剂、水的软化剂、发酵促进剂和金属防腐蚀剂等被广泛应用于日用化工各个行业中。
2、植酸分子结构中含有12个羟基、6个磷酸酯，具有很强的螯合能力，会与必需矿物质（如ca2+、mg2+、zn2+、fe2+、fe3+、cu2+和mg2+）、蛋白质、脂类和碳水化合物等结合，导致微量元素缺乏，降低机体对蛋白质等物质的生物利用度；此外，人体消化道没有植酸酶因而很难利用植酸盐，大量的营养素无法正常消化吸收，因此植酸也被认为是一种抗营养因子。适量的植酸添加对人体具有良好的保护作用，但过量的植酸摄入会对人体健康造成潜在危害，因此，日常食品中植酸的检测对食品安全至关重要。
3、传统的植酸测定方法有两大类：一类通过将植酸转化成磷间接计算出植酸的含量，另一类是利用植酸与fe3+的定量络合直接或间接测定植酸的含量。但在食品加工过程中，植酸会发生降解形成低级肌醇磷酸盐，上述方法很难将植酸与其分开，测定结果不够准确，对于复杂基质中植酸的测定并不适用。因此亟需一种更加高效的测定方法。
技术实现思路>
1、基于此，本申请提供一种植酸分离提取效率高且重现性好的含植酸样品的处理方法及植酸样品的质谱检测方法。
2、具体技术方案如下：
3、本申请一方面提供了一种植酸样品的处理方法，包括如下步骤：
4、将含有植酸的待测样品加入碱化合物溶液进行混合，固液分离，取液相，制备第一处理样品；
5、将所述第一处理样品加入酸化合物溶液进行混合，固液分离，取固相，制备第二处理样品；
6、向所述第二处理样品中加入尿素溶液进行混合，固液分离，取液相，制备第三处理样品；
7、向所述第三处理样品中加入甲醇和衍生化试剂进行甲酯化反应，固液分离，取固相，制备处理后样品。
8、在其中一个实施例中，将含有植酸的待测样品加入碱化合物溶液进行混合的步骤包括：
9、将含有植酸的待测样品加入碱化合物溶液至体系ph值为8~12。
10、在其中一个实施例中，所述样品包括米糠、大豆和藜麦中的至少一种；及/或
11、所述碱化合物包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂或氢氧化钙中至少一种。
12、在其中一个实施例中，将所述第一处理样品加入酸化合物溶液进行混合的步骤包括：
13、将所述第一处理样品加入酸化合物溶液至体系ph值为4~4.8；
14、所述酸化合物包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸或硝酸中的至少一种。
15、在其中一个实施例中，所述尿素溶液的浓度为4mol/l~8mol/l。
16、在其中一个实施例中，向所述第三处理样品中加入甲醇和衍生化试剂进行甲酯化反应，固液分离，取固相，制备处理后样品的步骤包括：
17、将所述第三处理样品中加入甲醇和衍生化试剂进行甲酯化反应，得到衍生化溶液；
18、将所述衍生化溶液进行氮吹，取固相，制备处理后的样品。
19、在其中一个实施例中，制备处理后的样品满足（1）~（5）中至少一个条件：
20、（1）所述衍生化试剂包括三甲基硅基重氮甲烷；
21、（2）所述第三处理样品和所述甲醇的体积比为1:（90~100）；
22、（3）所述第三处理样品和所述衍生化试剂的体积比为1:（12~16）；
23、（4）所述甲酯化反应的温度为15℃~40℃；
24、（5）所述甲酯化反应的时间为20min~120min。
25、本申请另一方面提供一种植酸样品的质谱检测方法，包括如下步骤：采用上述的植酸样品的处理方法制备处理后样品，以及，对所述处理后样品进行质谱检测，得到检测结果。
26、在其中一个实施例中，所述质谱检测条件包括：采用离子源为电喷雾电离源；扫描模式为正离子扫描模式；毛细管电压为2kv~4.5kv；锥孔电压为20v~70v；流动相为甲醇；流速为0.2ml/min~0.5ml/min。
27、在其中一个实施例中，所述检测方法为所述植酸的定量检测方法，所述检测方法还包括如下步骤：
28、制备植酸的系列不同浓度的标准工作溶液，获取各所述标准工作溶液的碎片离子数据；
29、获取所述碎片离子数据中定性离子的峰面积与所述标准工作溶液的浓度的标准关系；
30、根据所述标准关系与所述处理后样品的碎片离子数据中定性离子的峰面积，得到所述样品中植酸的含量。
31、在含有植酸的待测样品首先加入碱化合物，可以分离提取样品中的蛋白质，得到第一处理样品，再通过酸化合物沉淀第一处理样品中蛋白质，得到第二处理样品，再通过尿素分散并溶解第二处理样品中的蛋白质，其中尿素分子可以与蛋白质的氢键和离子键相互作用，降低它们之间的结合能，使得蛋白质分子中的氢键和离子键变得不稳定，导致蛋白质的结构松弛和解开，释放出与蛋白质结合的植酸分子，得到第三处理样品，进一步通过衍生化试剂，能使植酸上的磷酸基团快速全部甲酯化，通过甲酯化取代磷酸羟基的活泼质子，从而提高植酸类的稳定性，极大降低其极性、酸性和金属离子的络合能力，提高了后续植酸检测的精准性。
32、与传统的色谱质谱联用（lc-ms/ms）相比，本申请植酸样品的质谱检测方法无需色谱柱分离，直接进样的方式可以大大缩短了分析时间，适用于高通量分析。
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1.一种植酸样品的处理方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，将含有植酸的待测样品加入碱化合物溶液进行混合的步骤包括：
3.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，所述样品包括米糠、大豆和藜麦中的至少一种；及/或
4.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，将所述第一处理样品加入酸化合物溶液进行混合的步骤包括：
5.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，所述尿素溶液的浓度为4mol/L~8 mol/L。
6.根据权利要求1~5任一项所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，向所述第三处理样品中加入甲醇和衍生化试剂进行甲酯化反应，固液分离，取固相，制备处理后样品的步骤包括：
7.根据权利要求6所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，制备处理后的样品满足（1）~（5）中至少一个条件：
8.一种植酸样品的质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：采用权利要求1~7任一项所述的植酸样品的处理方法制备处理后样品，以及，对所述处理
9.根据权利要求8所述的植酸样品的质谱检测方法，其特征在于，所述质谱检测条件包括：采用离子源为电喷雾电离源；扫描模式为正离子扫描模式；毛细管电压为2 kV~4.5 kV；锥孔电压为20 V~70 V；流动相为甲醇；流速为0.2mL/min~0.5mL/min。
10.根据权利要求8~9任一项所述的植酸样品的质谱检测方法，其特征在于，所述检测方法为所述植酸的定量检测方法，所述检测方法还包括如下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种植酸样品的处理方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，将含有植酸的待测样品加入碱化合物溶液进行混合的步骤包括：
3.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，所述样品包括米糠、大豆和藜麦中的至少一种；及/或
4.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，将所述第一处理样品加入酸化合物溶液进行混合的步骤包括：
5.根据权利要求1所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，所述尿素溶液的浓度为4mol/l~8 mol/l。
6.根据权利要求1~5任一项所述的植酸样品的处理方法，其特征在于，向所述第三处理样品中加入甲醇和衍生化试剂进行甲酯化反应，固液分离，取固相，制备处理后样品的步骤包括：
【专利技术属性】
技术研发人员：陈波，朱思洁，杨志远，何文，
申请(专利权)人：湖南生平米业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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