【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及甲状旁腺激素检测的，具体而言，涉及一种基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法。
技术介绍
1、过去数十年间，甲状旁腺激素(parathyroid hormone，简称pth)的检测方法历经了三代更迭。“第一代检测方法”即放射免疫测定法(radioimmunoassay，简称ria)，直接对于抗原(即pth)进行放射标记。此后，随着放射免疫测定法的发展，诞生了“第二代检测方法”和“第三代检测方法”，即对抗体进行标记和检测。虽然检验技术已经历三代发展，但传统的pth检测方法时效性差，检测时间通常在60分钟以上。
2、其中，第一代检测方法——放射免疫测定法(ria)：第一代pth检测技术始于20世纪60年代初，采用单个抗体识别pth的靶抗原位点。该方法测得的pth值往往被高估，且可重复性差、特异性差、抗体结合率低，已被临床所淘汰。
3、第二代检测方法：第二代pth检测技术由nichols diagnostics于1987年首次提出。采用双抗体夹心法。该类方法应用两组抗体。其中，(a)组为捕获抗体，捕获循环中pth1-84和有39-84氨基酸的pth片段，与羧基端结合用以标记待测抗原；(b)组为检测抗体，识别氨基末端靶抗原(13-34氨基酸)。如下所示：
4、
5、第二代检测方法，称为全段pth检测方法(intact parathyroid hormone，简称ipth)，是目前临床应用最为广泛的方法，该方法较ria更敏感和特异。kdoqi指南和kdig
6、第三代检测方法：第三代pth检测技术由scantibodies laboratories在1999年首次研发成功，被称为生物活性pth(biological parathyroid hormone，简称bi-pth)检测法或整段pth(whole pth)检测法。采用与ipth检测方法相同的技术，只是其检测抗体的结合部位改进为单独使用氨基端1-4氨基酸残基作为抗原表位，避免了检测结果中包括pth 7-84的问题，特异性更强。目前，已实现roche elecsys法和diasorin liaison法两种自动化的第三代检测方法。
7、甲状旁腺激素(parathyroid hormone，pth)测定可判断甲状旁腺手术是否成功及甲状腺手术中甲状旁腺受影响程度，对临床工作具有十分重要的意义。目前，甲状旁腺激素术中检测多采用全段pth检测方法。但是，全段pth检测方法的检测时间较长，时效性差，且无法做到精准地定量检测，造成延长病人术中的等待时间和麻醉手术时间，增加病人手术风险和医疗成本等问题。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术或相关技术中存在的技术问题之一。
2、为此，本专利技术的目的在于提出基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法。
3、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案提供了一种基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，该方法包括：步骤s1：获取pth的检测试剂；其中，所述检测试剂包括至少一种试剂，且所述检测试剂具有生物功能化的超顺磁纳米粒子；步骤s2：使用检测设备对含有所述检测试剂的溶液的初始磁化响应信号的强度进行测量，并将此时的测量结果记为u0；步骤s3：将被检测试剂与所述检测试剂混合均匀在预设温度下进行孵育，并等待所述被检测试剂与检测试剂的孵育时间到达设定时间，以使得所述被检测试剂中的全链pth抗原与所述检测试剂进行充分反应；步骤s4：再次使用所述检测设备对所述被检测试剂与所述检测试剂的混合液的磁化响应信号的强度进行测量，并将此时的测量结果记为u1；步骤s5：计算所述测量结果u0和所述测量结果u1之间的磁化响应强度变化率，并将该磁化响应强度变化率记为k；所述k的表达式如下：
4、k＝[(u0-u1)/u0]*100％
5、步骤s6：获取计算所述被检测试剂中的全链pth抗原的浓度值的标准曲线的表达式；其中，所述表达式以所述被检测试剂中的全链pth抗原浓度值为自变量，以所述磁化响应强度变化率k为因变量；步骤s7：将计算出来的磁化响应强度变化率代入到所述标准曲线的表达式中，计算出所述被检测试剂中的全链pth抗原的浓度值，以实现对所述被检测试剂中的全链pth抗原的浓度值的快速定量检测；其中，所述步骤s3在步骤s2之前或者之后。
6、优选地，所述步骤s6，具体包括：获取被检测试剂中的若干个不同的全链pth抗原的浓度值下对应的所述测量结果u0和所述测量结果u1之间的磁化响应强度变化率；根据所述被检测试剂中的若干个不同的全链pth抗原的浓度值和所述磁化响应强度变化率，去拟合所述计算被检测试剂中的全链pth抗原的浓度值的标准曲线，并得到该标准曲线的表达式。
7、优选地，所述检测试剂只包括有一种试剂；所述步骤s1之后，还包括：将所述检测试剂加入到检测试剂瓶中；所述步骤s2，具体为：步骤s2.1：使用检测设备对检测试剂瓶中的检测试剂的初始磁化响应信号的强度进行测量，并将此时的测量结果记为u0；以及所述步骤s2.1之后，还包括：步骤s2.2：将被检测试剂加入到所述检测试剂瓶中；其中，所述步骤s3在步骤s2.2之后；在所述被检测试剂中的全链pth抗原与所述检测试剂进行充分反应时，所述检测试剂利用共价键或非共价偶联的方式，将所述被检测试剂中的全链pth抗原相匹配的特异性抗体修饰在超顺磁纳米粒子的表面，以使得所述检测试剂与被检测试剂中的全链pth抗原发生特异性反应。
8、优选地，所述检测试剂包括有两种不同的试剂，这两种不同的试剂分别为第一试剂和第二试剂；所述第一试剂具有生物功能化的超顺磁纳米粒子和抗体1，所述抗体1修饰于超顺磁纳米粒子的表面；所述第二试剂为捕获试剂，所述第二试剂具有磁纳米粒子和抗体2，以及所述抗体2修饰于第二试剂的磁纳米粒子上；所述步骤s1之后，还包括：将所述第一试剂和第二试剂依次加入到检测试剂瓶中；待所述第一试剂和第二试剂混合均匀后，获取混合均匀后的所述第一试剂和第二试剂的混合液；或者直接获取事先混合均匀后的所述第一试剂和第二试剂的混合液，并将该混合液加入到所述检测试剂瓶中；以及所述步骤s2，具体为：步骤s2.11：使用检测设备对所述混合均匀后的第一试剂与第二试剂的混合液的磁化响应信号的强度进行测量，并将此时的测量结果记为u0；所述步骤s2.11之后，还包括：步骤s2.12：将被检测试剂加入到所述检测试剂瓶中；其中，所述步骤s3在步骤s2.12之后；以及所述步骤s4，具体为：使用检测设备对所述充分反应后的第一试剂、第二试剂及被检测试剂的混合液的磁化响应信号的强度进行测量，并将此时的测量结果记为u1；其中，在所述混合均本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述步骤S6，具体包括：
3.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂只包括有一种试剂；
4.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂包括有两种不同的试剂，这两种不同的试剂分别为第一试剂和第二试剂；所述第一试剂具有生物功能化的超顺磁纳米粒子和抗体1，所述抗体1修饰于超顺磁纳米粒子的表面；所述第二试剂为捕获试剂，所述第二试剂具有磁纳米粒子和抗体2，以及所述抗体2修饰于第二试剂的磁纳米粒子上；
5.根据权利要求4所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，
6.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂包括有三种
7.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，还包括：
8.根据权利要求1至7中任一项所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述被检测试剂为人体的血液、血清或血浆。
9.根据权利要求1至7中任一项所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测设备为弱磁检测线圈或TMR传感器。
10.根据权利要求1至7中任一项所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链PTH全液相免疫分析方法，其特征在于，所述预设温度为37℃。
...【技术特征摘要】
1.一种基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，所述步骤s6，具体包括：
3.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂只包括有一种试剂；
4.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂包括有两种不同的试剂，这两种不同的试剂分别为第一试剂和第二试剂；所述第一试剂具有生物功能化的超顺磁纳米粒子和抗体1，所述抗体1修饰于超顺磁纳米粒子的表面；所述第二试剂为捕获试剂，所述第二试剂具有磁纳米粒子和抗体2，以及所述抗体2修饰于第二试剂的磁纳米粒子上；
5.根据权利要求4所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，
6.根据权利要求1所述的基于超顺磁纳米粒子交流磁化响应的全链pth全液相免疫分析方法，其特征在于，所述检测试剂包括有三种不同的试剂，这三种不同的试剂分别为第三试剂、第四试剂和第五试剂；所述第三试剂具有生物...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔豪，白石，侯福旭，张巍，祁峰，郭大可，富焱，李龙飞，白思嘉，张钦妍，李伟，司羽，程广明，史力伏，殷俞，
申请(专利权)人：沈阳工业大学，
类型：发明
国别省市：
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