HPV等温试剂盒制造技术

技术编号：41278904 阅读：6 留言：0更新日期：2024-05-11 09:30

本发明专利技术公开了一种HPV等温试剂盒，属于生物技术领域发明专利技术。试剂盒包括13对高危型HPV特异性扩增引物和1对内标基因扩增引物。本发明专利技术具有检测速度快，特异性高，价格低廉，操作简便等特点，可满足临床快速检测需求，适合基层医疗单位推广使用。

全部详细技术资料下载

【技术实现步骤摘要】

本专利技术所属生物检测领域，特别是涉及一种利用等温扩增技术检测人高危型乳头瘤病毒的引物、试剂盒。

技术介绍

1、人乳头瘤病毒(human papillomavirus，hpv)是一种无包膜包裹的双链闭环小dna病毒，属于多空病毒科的乳头瘤空泡病毒a属，具有普遍传染性，易引发多种疾病，尤其是宫颈癌。国际癌症研究机构将与宫颈癌发生有关的hpv亚型分为三种类型，分别为高风险型hpv(hpv16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82)、假定的高风险型(hpv26、53、66)以及低风险型(hpv6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81)等。流行病学调查资料表明，hpv感染基因型分布存在地域差异，甚至一国之内不同地区的hpv流行亚型也可能不同；但检出的亚型基本是hpv的高危型，说明导致宫颈癌发生、发展的必要条件是高危型hpv的持续性感染。

2、目前hpv的检测方法主要包括hpv细胞学检测、hpv蛋白检测、hpv dna检测以及hpv感染的血清学检测。其中pcr检测hpv dna的方法因其灵敏准确，是较理想的检测生物制品污染的方法；但是pcr法对检测设备和操作技能要求较高，不利于基层单位推广。细胞学检测敏感性和阳性率都较低，且存在观察者差异，不容易大规模推广使用。由于hpv难以进行体外培养，且不是所有的感染者都有可检测的抗体反应，因此血清学和蛋白检测开展不多。基层单位广泛推广使用的检测仪器，最好是具备以下条件：检测方法足够灵敏、特异性较高；检测设备不能太昂贵；检

3、lamp是一种较新型的核酸等温扩增方法，其广泛应用于细菌、病原微生物、寄生虫以及病毒等的快速检测。与real time qpcr 技术相比，只需要四到六条模板特异性的引物以及具有链置换活性的dnapolymerase，在等温条件下 1 h 内即可完成扩增；扩增产物肉眼可见，或者加入相应的检测染料即可判断是否有扩增产物存在，无需昂贵的荧光定量pcr 仪或者电泳设备等；lamp检测方法具有特异性好，灵敏度高及检测范围广泛等优势，可与real time qpcr 检测技术相媲美。

技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种能涵盖且能完全区分13种高危亚型的hpv等温试剂盒，其能够区分13种高风险型hpv，具有良好专一性、灵敏性以及变异株高度覆盖性等优点。

2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：

3、一种hpv等温试剂盒，包括13对高危型hpv特异性扩增引物和1对内标基因扩增引物，用于特异性扩增13种高危型hpv病毒，引物如下：

4、hpv16引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 1-4所示；

5、hpv18引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 5-8所示；

6、hpv31引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 9-12所示；

7、hpv33引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 13-16所示；

8、hpv35引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 17-20所示；

9、hpv39引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 21-24所示；

10、hpv45引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 25-28所示；

11、hpv51引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 29-32所示；

12、hpv52引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 33-36所示；

13、hpv56引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 37-40所示；

14、hpv58引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 41-44所示；

15、hpv59引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 45-48所示；

16、hpv68引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 49-52所示；

17、ck13引物：f3； b3；fip；bip；如seq id no. 53-56所示。

18、所述的试剂盒，使用等温扩增酶和特异性扩增引物，扩增不同亚型的高危型hpv病毒。

19、所述的试剂盒，结果分析采用染料法直接观察。

20、本专利技术的有益效果是，可以较快速的检测分型高危型hpv病毒，检测方法特异性高，检测仪器简便，费用较低，适用基层单位推广。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种HPV等温试剂盒，其特征是：包括13对高危型HPV特异性扩增引物和1对内标基因扩增引物，用于特异性扩增13种高危型HPV病毒，引物如下：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征是：使用等温扩增酶和特异性扩增引物，扩增不同亚型的高危型HPV病毒。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征是：结果分析采用染料法直接观察。

【技术特征摘要】

1.一种hpv等温试剂盒，其特征是：包括13对高危型hpv特异性扩增引物和1对内标基因扩增引物，用于特异性扩增13种高危型hpv病毒，引物如下：

2.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪巧珍，
申请(专利权)人：衢州市柯城区人民医院，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人