一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，属于医学检验检测技术领域。本发明专利技术包括以下步骤：(1)<supgt;18</supgt;O标记的合成；(2)血清样本处理；(3)UPLC‑MRM分析；(4)数据处理。本发明专利技术首次建立了以去甲泽拉木醛为例的血清中天然药物快速、便捷的准确定量策略。通过实验，逐步确定了一种较好的SPE法提取血清中去甲泽拉木醛。我们收集了10例糖尿病肾病患者的60例样本。采用该方法获得的患者血清中去甲泽拉木醛的定量结果显示，治疗性药物监测(TDM)与尿蛋白降低之间存在相关性。这项工作可能对体内药物代谢的研究和低丰度30和难以量化的天然生物活性化合物的临床应用具有广泛的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，属于医学检验检测。

技术介绍

1、中药等天然药物存在成分多、结构复杂等问题，而在人体药代动力学研究中，存在体内药效与药物浓度关系不清等问题。制定合理的人体内药代动力学研究方法是解决上述问题的必要条件。考虑到生物样品的低丰度和复杂的基质效应，利用稳定同位素标记对体内药物进行绝对定量是一种有效的方法。然而，天然药物含有多种成分，使得目标化合物的商业内标和难以承受的价格，其中稳定同位素的数量更少。

2、雷公藤多苷片是从传统中药雷公藤中提取的。在临床中具有显著的抗炎和免疫抑制作用，可用于类风湿关节炎、肾病、亚急性甲状腺炎、自身免疫性疾病等疾病。雷公藤多苷片广泛应用于糖尿病肾病的临床治疗。是目前治疗糖尿病肾病不可替代的一线药物。但其毒性大，临床应用时需长期服用，才能根据指标变化确定雷公藤多苷片的有效剂量，对患者生殖系统危害较大。此外，目前研究的雷公藤甲素a、雷公藤甲素b等化合物毒性较大，无法解释其疗效。

3、去甲泽拉木醛是从雷公藤中提取的一种三萜单体化合物，可能是雷公藤多苷片的有效成分。最早本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，所述18O标记的合成是指：用H218O将30μl 1mg ml-1去甲泽拉木醛溶液稀释至100μgml-1(含1％甲酸)，95℃PCR孵育15h；取出-20℃保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，所述血清样本处理是指：将100μl血清与400μl 50％甲醇和1％甲酸混合；将混合物涡旋3min,13300rpm离心10min，收集上清液，稀释至含50％甲醇；稀释后的样品用SP...

【技术特征摘要】

1.一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，所述18o标记的合成是指：用h218o将30μl 1mg ml-1去甲泽拉木醛溶液稀释至100μgml-1(含1％甲酸)，95℃pcr孵育15h；取出-20℃保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，所述血清样本处理是指：将100μl血清与400μl 50％甲醇和1％甲酸混合；将混合物涡旋3min,13300rpm离心10min，收集上清液，稀释至含50％甲醇；稀释后的样品用spe进行处理；然后将洗脱液在45℃真空浓缩器中干燥，用30μl的20ng/ml18o标记的同位素内标进行复溶；将重组溶液涡旋10分钟，然后在13300rpm转速下离心10分钟，取上清液进行样品检测。

4.根据权利要求3所述的一种血清中去甲泽拉木醛的定量检测方法，其特征在于，所述稀释后的样品用spe进行处理是指：稀释后的样品上样于oasis prime hlb spe小柱，以3ml50％的甲醇水溶液洗涤小柱后，以1ml乙腈：甲醇＝9：1的溶液洗脱，收集洗脱液。

5.根据权利要求1所述的一种血清中去甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛永辉，赵班，铁偲，
申请(专利权)人：北京医院，
类型：发明
国别省市：