【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗肿瘤免疫，具体涉及一种ltp-dc抗肿瘤疫苗及其制备方法和应用。
技术介绍
1、等离子体(plasma)是中性气体分子在强电场作用下电离而形成的由离子、电子和中性粒子(原子和分子)、活性自由基、紫外线等所组成的集合体。通常将电子温度很高，但重粒子温度很低且接近于室温的非热平衡态等离子体称为低温等离子体(lowtemperature plasma，ltp)。ltp中含有丰富的活性氧和活性氮(reactive oxygen andnitrogen species，rons)，rons被认为在ltp直接和间接处理肿瘤的过程中发挥着至关重要的作用。自从2007年首次发现ltp的抗癌效果以来，人们一直致力于研究其在各种类型癌症中的肿瘤治疗效果，并已被证实对多种肿瘤有效。ltp可以剂量依赖的方式触发不同的细胞死亡事件，包括细胞周期停滞、自噬、凋亡、铁死亡、免疫原性细胞死亡(immunogeniccell death,icd)等。ltp还被认为可以调节癌细胞的免疫原性应答和药物敏感性，阻止肿瘤的侵袭和转移和重新编辑恶性细胞的代谢程序等。随着越来越多的证据表明ltp对癌症具有选择性，以及其多样化的抗癌特性不断被发现，ltp已被认为是一种能够控制肿瘤的新兴治疗方法。
2、ltp除可以直接诱导肿瘤细胞死亡外，还对免疫细胞活性和免疫应答均有影响。树突状细胞(dendritic cell,dc)作为专职抗原呈递细胞，其成熟对启动机体适应性免疫应答方面起着关键作用。而癌症患者体内dc功能缺陷或成熟dc数量减少，影响机体免疫功能
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种ltp-dc抗肿瘤疫苗制备方法及其应用，利用低温等离子体诱导肿瘤细胞免疫原性细胞死亡，增加抗原的免疫原性，进一步改善dc疫苗的治疗潜力。
2、本专利技术具体采用如下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种ltp-dc抗肿瘤疫苗的制备方法，包括以下步骤：
4、将低温等离子体与黑色素瘤细胞悬液接触作用160-200s，培养20-24h后，消化、收集黑色素瘤细胞，将收集的黑色素瘤细胞与树突状细胞混合培养20-24h后得到所述ltp-dc抗肿瘤疫苗。
5、作为本专利技术所述制备方法的优选，采用低温等离子体接触作用时，工作气体为氦气，电压为8-12kv。
6、作为本专利技术所述制备方法的进一步优选，所述黑色素瘤细胞为b16细胞。
7、作为本专利技术所述制备方法的进一步优选，所述树突状细胞为dc2.4细胞。
8、作为本专利技术所述制备方法的进一步优选，所述黑色素瘤细胞与树突状细胞的数量比为1:1。
9、第二方面，本专利技术提供所述ltp-dc抗肿瘤疫苗在制备预防和/或治疗黑色素瘤的药物中的应用。
10、第三方面，本专利技术提供所述ltp-dc抗肿瘤疫苗联合顺铂在制备治疗黑色素瘤的药物中的应用。
11、第四方面，本专利技术提供一种预防和/或治疗黑色素瘤的ltp-dc抗肿瘤疫苗，所述药物以所述ltp-dc抗肿瘤疫苗作为唯一有效成分或有效成分之一。
12、作为本专利技术所述药物的优选，当所述ltp-dc抗肿瘤疫苗作为有效成分之一时，所述药物中还包含顺铂。
13、作为本专利技术所述药物的进一步优选，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述药学上可接受的载体包括常规的稀释剂(如注射用水、微晶纤维素等至少一种)，稳定剂(如乙二胺四乙酸二钠、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、乙醇胺、碳酸氢钠、醋酸钠、烟酰胺、维生素c等至少一种)，渗透压调节剂(如氯化钠、葡萄糖等至少一种)，ph调节剂(如三乙醇胺、氢氧化钠、枸橼酸钠等至少一种)。
14、本专利技术具有如下有益效果：
15、本专利技术提供了一种基于低温等离子体制备dc疫苗的方法，低温等离子体具有安全性、成品低等优势，本专利技术利用其制备dc疫苗，不需要添加任何细胞因子，操作简单易行，且成本低。
16、本专利技术的疫苗具有高度免疫原性和高度特异性等特点，在肿瘤预防和治疗中具有明显的作用，且与化疗药物顺铂联合使用能够产生协同增效作用，显著减缓了肿瘤的发展。
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1.一种LTP-DC抗肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，采用低温等离子体接触作用时，工作气体为氦气，电压为8-12KV。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述黑色素瘤细胞为B16细胞。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述树突状细胞为DC2.4细胞。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述黑色素瘤细胞与树突状细胞的数量比为1:1。
6.权利要求5所述制备方法制备的LTP-DC抗肿瘤疫苗。
7.权利要求6所述LTP-DC抗肿瘤疫苗在制备预防和/或治疗黑色素瘤的药物中的应用。
8.权利要求6所述LTP-DC抗肿瘤疫苗联合顺铂在制备治疗黑色素瘤的药物中的应用。
9.一种预防和/或治疗黑色素瘤的LTP-DC抗肿瘤疫苗，其特征在于，所述疫苗以权利要求6所述LTP-DC抗肿瘤疫苗作为唯一有效成分或有效成分之一。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，当所述LTP-DC抗肿瘤疫苗作为
...【技术特征摘要】
1.一种ltp-dc抗肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，采用低温等离子体接触作用时，工作气体为氦气，电压为8-12kv。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述黑色素瘤细胞为b16细胞。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述树突状细胞为dc2.4细胞。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述黑色素瘤细胞与树突状细胞的数量比为1:1。
6.权利要求5所述制备...
【专利技术属性】
技术研发人员：石兴民，王香妮，张冠军，刘进仁，王曦迎，鹿佳佳，许桂敏，崔怡馨，许玉琳，何芷柔，袁网，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：
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