【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药制剂领域。本专利技术涉及一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒(本专利中以下简称为：融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶复方纳米粒)及其制备方法。
技术介绍
1、精氨酸作为条件必需氨基酸之一，在细胞分裂和代谢中起着关键作用。正常细胞可以合成精氨酸，部分肿瘤缺乏精氨酸合成的关键限速酶精氨酸琥珀酸合成酶1(ass1)难以合成精氨酸。因此，靶向精氨酸的饥饿疗法成为治疗ass1缺陷肿瘤的有效策略。精氨酸脱亚胺酶是针对精氨酸的专一水解酶，具有特异性强，催化效率高的特点，可将精氨酸分解为瓜氨酸且不生成毒性代谢物，可作为一种靶向策略消耗肿瘤生长需要的精氨酸，导致细胞器功能障碍，诱发自噬和衰老，诱导肿瘤t细胞浸润，调节肿瘤免疫微环境进行抗癌。精氨酸脱亚胺酶的活性易受到外界环境的影响，具有半衰期短、免疫原性高和生物利用度低等缺点，其临床应用受到限制。将精氨酸脱亚胺酶制备成不同的递送系统，可更好地满足临床应用。
2、淫羊藿素可以抑制癌细胞增殖，促进癌细胞凋亡。普鲁士蓝纳米酶具有类过氧化氢酶活性，可缓解肿瘤缺氧，改善肿瘤微环境；普鲁士蓝纳米酶在近红外光区域有较高的光热转换效率，可作为光热剂发挥抗癌作用。内质网膜约占细胞总膜面积的50％，是真核细胞中最多的膜。双亲性的聚乙二醇1000维生素e琥珀酸酯修饰的脂质体可以提高酶的包封率，增强稳定性。透明质酸修饰的环糊精与脂质体融合，可以延长药物在体内的时间。红细胞膜对制剂的修饰可以增加生物相容性，延长体内循环时间，增加药物的稳定性。癌细胞膜具有肿瘤归巢作用，可
3、经查询专利及文献，目前尚无精氨酸脱亚胺酶联合淫羊藿素应用的任何研究报道，尚无精氨酸脱亚胺酶联合纳米酶(包括碳点普鲁士蓝纳米酶)应用的任何研究报道，尚无淫羊藿素联合一种或多种酶类药物(包括精氨酸脱亚胺酶和碳点普鲁士蓝纳米酶)应用的任何研究报道，尚无碳点普鲁士蓝纳米酶联合一种或多种药物(包括蛋白酶类药物和小分子药物)应用的任何研究报道，尚无精氨酸脱亚胺酶/小分子药物(包括淫羊藿素)/纳米酶(包括碳点普鲁士蓝纳米酶)复方制剂的任何研究报道，尚无内质网膜负载一种或多种酶类药物和小分子药物的任何研究报道，尚无红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜的任何研究报道，尚无红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹一种或多种药物(包括酶类药物和小分子药物)的任何研究报道，尚无红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹纳米粒的任何研究报道，尚无红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/小分子药物(包括淫羊藿素)/纳米酶(包括碳点普鲁士蓝纳米酶)的复方制剂任何研究报道，尚无任何生物膜(包括红细胞膜、肺癌细胞膜、红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜)与内质网膜共同构建纳米递送系统的任何研究报道，尚无任何生物膜(包括红细胞膜、肺癌细胞膜、红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜)与内质网膜共同构建纳米递送系统负载一种或多种药物(包括蛋白酶类药物和小分子药物)的任何研究报道。本专利技术制备得到的融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒可以增加精氨酸脱亚胺酶的催化活性、增强稳定性、延长作用时间，同时降低免疫原性，联合饥饿疗法、化学疗法、免疫疗法和光热疗法，使药物有效、稳定和安全，发挥疗效，降低副作用。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是提供融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒及其制备方法。融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒克服了精氨酸脱亚胺酶稳定性差、易被降解、生物利用度低和靶向性低等缺点；结合了淫羊藿素的化疗和肿瘤免疫微环境调节作用；联合碳点普鲁士蓝纳米酶改善肿瘤缺氧微环境的能力，以及化疗和光疗的作用。本专利技术首次构建得到的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒，用内质网膜负载精氨酸脱亚胺酶，提高药物的稳定性，赋予制剂内质网靶向功能，引起细胞内质网应激以及肿瘤免疫原性细胞死亡。本专利技术采用脂质纳米粒和融合膜包裹内质网膜负载的精氨酸脱亚胺酶、小分子药物淫羊藿素和碳点普鲁士蓝纳米酶，实现了饥饿疗法、化学疗法、免疫疗法和光热疗法在癌症治疗上的联合应用，可以提高药物稳定性，延长作用时间，提高生物利用度，增加肿瘤靶向性，增强抗癌疗效，降低毒副作用。本专利技术提供的融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒制备工艺简单，成本较低，易于控制，易于工业化生产。本研究为精氨酸脱亚胺酶提供了可供选择的新型制剂，可用于癌症治疗。
2、本专利技术提供的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒，其特征在于，包括精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒、红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹层，所述的碳点普鲁士蓝纳米酶包括以下组分，其各组分质量比为：铁氰化钾1-24份，聚乙烯吡咯烷酮25-600份，尿素400-1600份，柠檬酸130-540份，0.01m盐酸20000-80000份；所述的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒中精氨酸脱亚胺酶含量为0.36-35.80u/ml，内质网膜含量为0.1-1mg/ml，淫羊藿素含量为2-20mg/ml，碳点普鲁士蓝纳米酶含量为2-20mg/ml，缓冲液1和缓冲液2在同一个配方中是同一种类型的缓冲液，浓度相等均为50-150mm，ph相同均为5.5-8.5，其余各组分质量比为：卵磷脂10-100份，胆固醇3-30份，聚乙二醇1000维生素e琥珀酸酯3-30份，透明质酸30-120份，环糊精为17-66份，1-乙基-3-[3-(二甲胺基)丙基]碳化二亚胺盐酸盐34-132份，无水甲酰胺1为3000-15000份，无水甲酰胺2为3000-15000份，缓冲液1为1000-10000份，缓冲液2为1000-10000份；所述的环糊精，包括羟丙基-α-环糊精、磺丁基-α-环糊精、甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丁基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、磺丁基-γ-环糊精中的一种或多种；所述的缓冲液1和缓冲液2，包括双(2-羟基乙胺基)三(羟甲基)甲烷-盐酸盐缓冲液、磷酸氢二钾-磷酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸盐缓冲液的一种；内质网膜提取于大鼠、小鼠、兔、牛、羊、狗、猪的心、肝、脾、肺、肾组织的一种，红细胞膜提取于大鼠、小鼠、兔、牛、羊、狗、猪血和人血的一种，肺癌细胞膜提取于h1688、h446、h1299、llc和a549细胞系中的一种；红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜由红细胞膜与肺癌细胞膜以膜蛋白质量比1:3至3:1超声融合；所述的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒的制备方法，包括下列步骤：(1)碳点普鲁士蓝纳米酶的制备方法：将处方量的铁氰化钾、聚乙烯吡咯烷酮和0.01m盐酸混合搅拌20-60分钟，70-90℃反应0.5-2小时；用超纯水洗涤3-5次，离心，收集沉淀，得到固体a；将处方量的柠檬酸、尿素本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒，其特征在于，包括精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒、红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹层；
【技术特征摘要】
1.一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶/淫羊藿素/碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒，其特征在于，包括...
【专利技术属性】
技术研发人员：张景勍，杨婕，吴诗情，袁誉铭，刘煜莹，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：
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