【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物分离工程领域，具体而言，涉及一种高分辨率分离系统及其应用，更具体地，涉及一种基于毛细管区带电泳的高分辨率分离系统及其应用。
技术介绍
1、毛细管电泳(capillary electrophoresis，ce)是基于被分离物质的带电荷量和分子量差异进行分离。ce具有消耗样品体积小、柱效高和灵敏度高的优势，在微量样品分离分析中具有广阔的应用前景。
2、但目前已经ce制备分离平台存在以下问题：1、分离毛细管末端需要同轴鞘流式接口，分离期间分析物合并到鞘流液中，因此存在严重的样品稀释效应；2、使用的未经过涂层的大内径分离毛细管，导致分离窗口窄，分离度差；3、分馏之后的样品需要冻干、复溶，增加操作流程和样品损失。
3、针对以上问题，需要发展一种操作步骤简单、样品损失小和分离度高的ce制备分离平台，提高对微量生物样品的分级效率和灵敏度。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的问题是如何提高毛细管电泳的分离效率和分离度。
2、为解决上述问题，本专利技术第一方面提供一种高分辨率分离系统，所述分离系统包括以下构件：样品瓶、毛细管、紫外吸收检测器、金属针、接受器，所述样品瓶中含有分离缓冲液和待分离样品并具有进气压力口，所述样品瓶与分离电极电性连接，所述毛细管进样口一端浸入样品瓶中分离缓冲液液面之下，所述毛细管出样口一端通过套管与金属针连接，所述金属针外接地线，所述接受器内含有接收缓冲液，所述金属针出样口浸入接受器中接收缓冲液的液面之下，所述毛细管内
3、作为优选，所述涂层选自中性亲水涂层、阳离子涂层、阴离子涂层中的一种。
4、作为优选，所述分离缓冲液为醋酸缓冲液或eaca-teta缓冲液。
5、作为优选，所述毛细管的全长为95～120cm，净长为85～110cm，内径为30～100μm。
6、作为优选，所述接收缓冲液为甲酸水溶液。
7、作为优选，所述甲酸水溶液的浓度为0.05～0.3％。
8、作为优选，所述分离缓冲液为浓度0.5～2m的乙酸水溶液。
9、作为优选，通过进气压力口注入的气体选自氮气、二氧化碳、氦气中的一种。
10、进一步地，本专利技术第二方面提供一种微量蛋白的分离方法，即使用前述高分辨率分离系统分离微量蛋白，分离方法包含以下步骤：打开紫外吸收检测器(5)，向样品瓶(1)中加入待分离样品，打开分离电极(3)，通过进气压力口(2)注入气体后，从接受器(9)中收集微量蛋白。。
11、作为优选，分离微量蛋白的参数为：进样体积为50～200nl，分离电极电压为20～30kv，注入气体的压力为5～20mbar，分离时间为60～120min。
12、本专利技术具备的有益效果：本专利技术提供了一种基于毛细管区带电泳(cze)的高分辨率分离系统，该分离系统采用涂层毛细管对样品进行分离，在分离过程中避免使用鞘流，这解决了传统ce分离平台操作繁琐、分级效率低、灵敏度低的问题，有利于提高亚微克级蛋白、多肽等复杂样品的分离量。
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1.一种高分辨率分离系统，其特征在于，所述分离系统包括以下构件：样品瓶(1)、毛细管(4)、紫外吸收检测器(5)、金属针(8)、接受器(9)，所述样品瓶(1)中含有分离缓冲液和待分离样品并具有进气压力口(2)，所述样品瓶(1)与分离电极(3)电性连接，所述毛细管(4)进样口一端浸入样品瓶(1)中分离缓冲液液面之下，所述毛细管(4)出样口一端通过套管(6)与金属针(8)连接，所述金属针(8)外接地线(7)，所述接受器(9)内含有接收缓冲液，所述金属针(8)的出样口浸入接受器(9)中接收缓冲液的液面之下，所述毛细管(4)内具有涂层，毛细管(4)中还具有紫外吸收检测器(5)用以将毛细管(4)的流出物中样品的组成和含量转化为电信号。
2.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述涂层选自中性亲水涂层、阳离子涂层、阴离子涂层中的一种。
3.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述分离缓冲液为醋酸缓冲液或EACA-TETA缓冲液。
4.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述毛细管(4)的全长为95～120cm，净长为85
5.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述接收缓冲液为甲酸水溶液。
6.如权利要求5所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述甲酸水溶液的浓度为0.05～0.3％。
7.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述分离缓冲液为浓度0.5～2M的乙酸水溶液。
8.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，通过进气压力口(2)注入的气体选自氮气、二氧化碳、氦气中的一种。
9.一种微量蛋白的分离方法，其特征在于，使用权利要求1～8任一所述高分辨率分离系统分离微量蛋白，分离方法包含以下步骤：打开紫外吸收检测器(5)，向样品瓶(1)中加入待分离样品，打开分离电极(3)，通过进气压力口(2)注入气体后，从接受器(9)中收集微量蛋白。
10.如权利要求9所述微量蛋白的分离方法，其特征在于，分离微量蛋白的参数为：进样体积为50～200nL，分离电极(3)电压为20～30kV，注入气体的压力为5～20mbar，分离时间为60～120min。
...【技术特征摘要】
1.一种高分辨率分离系统，其特征在于，所述分离系统包括以下构件：样品瓶(1)、毛细管(4)、紫外吸收检测器(5)、金属针(8)、接受器(9)，所述样品瓶(1)中含有分离缓冲液和待分离样品并具有进气压力口(2)，所述样品瓶(1)与分离电极(3)电性连接，所述毛细管(4)进样口一端浸入样品瓶(1)中分离缓冲液液面之下，所述毛细管(4)出样口一端通过套管(6)与金属针(8)连接，所述金属针(8)外接地线(7)，所述接受器(9)内含有接收缓冲液，所述金属针(8)的出样口浸入接受器(9)中接收缓冲液的液面之下，所述毛细管(4)内具有涂层，毛细管(4)中还具有紫外吸收检测器(5)用以将毛细管(4)的流出物中样品的组成和含量转化为电信号。
2.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述涂层选自中性亲水涂层、阳离子涂层、阴离子涂层中的一种。
3.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述分离缓冲液为醋酸缓冲液或eaca-teta缓冲液。
4.如权利要求1所述的高分辨率分离系统，其特征在于，所述毛细管(4)的全长为95～120cm，...
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