一种特异性识别α-鹅膏毒素的核酸适配体及其筛选和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性识别α‑鹅膏毒素的核酸适配体及其筛选和应用，属于生物技术领域。本发明专利技术公开了α‑鹅膏毒素(α‑amatoxin，α‑AMA)特异适配体的核酸序列SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.18，并基于Kd最低为6.128nM的适配体Apt‑14构建电化学及比色多信号检测α‑amatoxin平台，在玻碳电极上镀金后修饰适配体，利用适配体与靶标特异性结合释放适配体互补链，引发HCR扩增进行信号放大，检出限为5ng/mL，效果良好。本方法操作简单，无酶扩增模式更有利于现场检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种特异性识别α-鹅膏毒素的核酸适配体及其筛选和应用。

技术介绍

1、amanitaphalloides被认为是世界上最毒的蘑菇，大部分毒蘑菇中毒事件是由误食amanitaphalloides引起的。从amanitaphalloides中分离鉴定的鹅膏肽类毒素有22种，主要有鹅膏毒肽(amatoxins)，phallotoxins，virotoxins，muscarine，botenic acid，isoxazole衍生物以及muscimol，coprine等。根据毒素的氨基酸和结构可以分为amatoxins，phallotoxins和virotoxins三大类。

2、amanitins是一种双环八肽化合物，根据其侧链取代基团的不同又可以将amatoxins分为α-鹅膏毒肽(α-amanitin，α-ama)、β-鹅膏毒肽(β-amanitin，β-ama)、γ-鹅膏毒肽(γ-amanitin，γ-ama)等9种。其中，α-ama和β-ama是毒蘑菇中引起绝大多数致命影响的毒素，化学性质稳定，耐高温耐干燥和酸碱，一般本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种特异性识别α-鹅膏毒素的核酸适配体Apt-14，其特征在于，所述核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。

2.如权利要求1所述的核酸适配体Apt-14，其特征在于，所述核酸适配体Apt-14的3’端或5’端经修饰物修饰。

3.一种修饰电极，其特征在于，包括权利要求1或2所述的核酸适配体Apt-14。

4.一种制备特异性识别α-鹅膏毒素的检测传感器的方法，其特征在于，所述方法如下：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，将玻碳电极浸入HAuCl4溶液中，于-0.2～0.6V电位范围内循环伏安扫描8～12...

【技术特征摘要】

1.一种特异性识别α-鹅膏毒素的核酸适配体apt-14，其特征在于，所述核酸适配体的核苷酸序列如seq id no.14所示。

2.如权利要求1所述的核酸适配体apt-14，其特征在于，所述核酸适配体apt-14的3’端或5’端经修饰物修饰。

3.一种修饰电极，其特征在于，包括权利要求1或2所述的核酸适配体apt-14。

4.一种制备特异性识别α-鹅膏毒素的检测传感器的方法，其特征在于，所述方法如下：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，将玻碳电极浸入haucl4溶液中，于-0.2～0.6v电位范围内循环伏安扫描8～12周；步骤(3)中，将互补链与纳米金溶液混匀，20℃～28℃反应12～16h；加入pb缓冲液，室温震荡0.5～1h；再分批加入含氯化钠的pb缓冲液，20...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙秀兰，田润，孙嘉笛，叶永丽，张银志，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：