System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法技术_技高网

一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法技术

技术编号:41216834 阅读:2 留言:0更新日期:2024-05-09 23:38
本发明专利技术涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其包括了基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的洗液、方法及试剂盒,本申请中根据磁珠结合DNA的原理,改变试剂和组分的比例去除引物和小片段分子。并且,在磁珠纯化和分选流程中使用本发明专利技术的试剂和方法进行操作,优化了磁珠纯化和筛选的操作技术。此外,利用本申请在生物实验操作中可以有效获得更多的目的片段,减少非目的片段的残留和影响,进而获得更加最准确有效的数据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学,具体涉及一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的高效方法。


技术介绍

1、磁珠技术的引入为dna的分离提供了一种新的方法,磁珠是微米级别的磁性颗粒,可以在外加磁场的作用下对目标分子进行选择性捕捉。这种方法相比传统的柱式层析或离心分离更为灵活和高效。

2、磁珠技术是生物学实验中的一种强大工具,尤其在核酸和蛋白质的分离纯化中表现出色。它依赖于磁性微粒与目标生物分子间的特异性结合,实现了快速、高效的分离纯化。这些微小的磁珠表面可以经过特殊化学修饰,以便与dna、rna或蛋白质等生物分子形成稳定结合。

3、由于其出色的特异性和高效率,磁珠技术在基因组学、蛋白质组学、免疫学等领域的应用越来越广泛。此外,它也正在逐步改变医学诊断和治疗的模式,例如用于药物传递和肿瘤治疗等前沿领域。

4、现有几乎众,磁珠法结合/纯化/筛选dna已倍广泛应用,但是在使用过程中仍然存在一些问题,如在筛选dna或纯化dna文库时其仍然会存在大量的小分子片段,去除不够干净和彻底;其次,在多重pcr技术中,在文库纯化时如果引物有二聚体或引物残留,在文库纯化过程中就会有大量的二聚体或引物残留,进而影响多重文库的下一步实验或测序产出,影响数据质量。


技术实现思路

1、因此,本专利技术要解决的技术问题在于磁珠法结合/纯化/筛选dna使用过程中所产生的一些问题。

2、本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:

3、一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的的洗液,用于去除或降低二聚体、引物及dna小片段的残留,其特征在于:所述洗液由下列四种原液试剂中的一种与te溶液构成:

4、原液试剂1

5、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg8000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm

6、;

7、原液试剂2

8、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg6000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm

9、;

10、原液试剂3

11、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg4000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm

12、;

13、原液试剂4

14、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg4000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm

15、。

16、优选的,所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。

17、优选的,所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。

18、本申请还提供了一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的高效方法,所述方法使用上述所述的洗液进行磁珠纯化,所述磁珠纯化在获取文库或dna样本之后。

19、优选的,所述磁珠纯化方法如下所示:

20、a1.向30μl文库中加入18μl纯化磁珠,充分涡旋混匀,室温静置5min;

21、a2将上步磁珠文库混合液,置于磁力架上,静置2min;

22、a3待溶液与磁珠分离,溶液澄清,弃掉上清保留磁珠;

23、a4加入100μl配置好的洗液6,涡旋混匀至溶液均一,室温静置5min;

24、a5将上步中的洗液磁珠混合液置于磁力架上,静置2min;

25、a6待溶液与磁珠分离,溶液澄清,弃掉上清,保留磁珠;

26、a7加入100μl新鲜配置的80%的乙醇,将磁珠在磁力架上来回吸附2-3次,磁力架上静置20s,弃掉80%乙醇;本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的的洗液,用于去除或降低二聚体、引物及DNA小片段的残留,其特征在于:所述洗液由下列四种原液试剂中的一种与TE溶液构成:

2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述TE溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。

3.根据权利要求2所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述TE溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。

4.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其特征在于:所述方法使用权利要求1-3任意一项所述的洗液进行磁珠纯化,所述磁珠纯化在获取文库或DNA样本之后。

5.根据权利要求4所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其特征在于:所述磁珠纯化方法如下所示:

6.根据权利要求4所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其特征在于:所述磁珠纯化方法如下所示:

7.一种基于磁珠法的去除引物、引物二聚体和DNA小片段的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括要求1-3任意一项所述的洗液。

...

【技术特征摘要】

1.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的的洗液,用于去除或降低二聚体、引物及dna小片段的残留,其特征在于:所述洗液由下列四种原液试剂中的一种与te溶液构成:

2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。

3.根据权利要求2所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。...

【专利技术属性】
技术研发人员:李敏杨吉元刘甜甜
申请(专利权)人:上海何因生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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