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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物学,具体涉及一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的高效方法。
技术介绍
1、磁珠技术的引入为dna的分离提供了一种新的方法,磁珠是微米级别的磁性颗粒,可以在外加磁场的作用下对目标分子进行选择性捕捉。这种方法相比传统的柱式层析或离心分离更为灵活和高效。
2、磁珠技术是生物学实验中的一种强大工具,尤其在核酸和蛋白质的分离纯化中表现出色。它依赖于磁性微粒与目标生物分子间的特异性结合,实现了快速、高效的分离纯化。这些微小的磁珠表面可以经过特殊化学修饰,以便与dna、rna或蛋白质等生物分子形成稳定结合。
3、由于其出色的特异性和高效率,磁珠技术在基因组学、蛋白质组学、免疫学等领域的应用越来越广泛。此外,它也正在逐步改变医学诊断和治疗的模式,例如用于药物传递和肿瘤治疗等前沿领域。
4、现有几乎众,磁珠法结合/纯化/筛选dna已倍广泛应用,但是在使用过程中仍然存在一些问题,如在筛选dna或纯化dna文库时其仍然会存在大量的小分子片段,去除不够干净和彻底;其次,在多重pcr技术中,在文库纯化时如果引物有二聚体或引物残留,在文库纯化过程中就会有大量的二聚体或引物残留,进而影响多重文库的下一步实验或测序产出,影响数据质量。
技术实现思路
1、因此,本专利技术要解决的技术问题在于磁珠法结合/纯化/筛选dna使用过程中所产生的一些问题。
2、本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
3、一种基于磁
4、原液试剂1
5、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg8000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm
6、;
7、原液试剂2
8、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg6000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm
9、;
10、原液试剂3
11、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg4000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm
12、;
13、原液试剂4
14、 试剂名称 终浓度 nacl 2m peg4000 20% tris-hcl(1m)(ph=7.5) 0.05m edta(ph=8.0)(0.5m) 0.5mm
15、。
16、优选的,所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。
17、优选的,所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。
18、本申请还提供了一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的高效方法,所述方法使用上述所述的洗液进行磁珠纯化,所述磁珠纯化在获取文库或dna样本之后。
19、优选的,所述磁珠纯化方法如下所示:
20、a1.向30μl文库中加入18μl纯化磁珠,充分涡旋混匀,室温静置5min;
21、a2将上步磁珠文库混合液,置于磁力架上,静置2min;
22、a3待溶液与磁珠分离,溶液澄清,弃掉上清保留磁珠;
23、a4加入100μl配置好的洗液6,涡旋混匀至溶液均一,室温静置5min;
24、a5将上步中的洗液磁珠混合液置于磁力架上,静置2min;
25、a6待溶液与磁珠分离,溶液澄清,弃掉上清,保留磁珠;
26、a7加入100μl新鲜配置的80%的乙醇,将磁珠在磁力架上来回吸附2-3次,磁力架上静置20s,弃掉80%乙醇;本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的的洗液,用于去除或降低二聚体、引物及DNA小片段的残留,其特征在于:所述洗液由下列四种原液试剂中的一种与TE溶液构成:
2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述TE溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。
3.根据权利要求2所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述TE溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。
4.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其特征在于:所述方法使用权利要求1-3任意一项所述的洗液进行磁珠纯化,所述磁珠纯化在获取文库或DNA样本之后。
5.根据权利要求4所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和DNA小片段的高效方法,其特征在于:所述磁珠纯化方法如下所示:
6.根据权利要求4所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和
7.一种基于磁珠法的去除引物、引物二聚体和DNA小片段的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括要求1-3任意一项所述的洗液。
...【技术特征摘要】
1.一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的的洗液,用于去除或降低二聚体、引物及dna小片段的残留,其特征在于:所述洗液由下列四种原液试剂中的一种与te溶液构成:
2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为4种所述原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6-1:1的比例进行配置。
3.根据权利要求2所述的一种基于磁珠法去除引物、引物二聚体和dna小片段的洗液,其特征在于:所述洗液为以上4种原液试剂中的一种与所述te溶液按照0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1和1:1的任意一种比例进行配置。...
【专利技术属性】
技术研发人员:李敏,杨吉元,刘甜甜,
申请(专利权)人:上海何因生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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