【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及临床标本病原微生物基因检测，属于分子生物学领域。
技术介绍
国内外报道的标本前处理方法比较少，没有专门针对各种不同临床原始标本的前处理方法。目前主要应用到临床的标本前处理有碱裂解法、免疫磁珠 法。碱裂解法利用碱液使标本中蛋白质发生变性溶解于碱液中，通过洗脱碱液 达到分离病原微生物基因的目的。免疫磁珠法通过磁珠吸附蛋白质与其它干扰 因子达到分离病原微生物基因的目的。临床利用基因直接鉴定临床体液标本中病原菌实际应用很少，存在的最大 技术难点在于临床体液标本中含有蛋白质、细胞因子等干扰因素，而研究证明 蛋白质和细胞中的人类基因组DNA都会干扰抑制病原菌的核酸扩增反应。这 种抑制作用在脓性的标本尤为突出。免疫磁珠法是目前国内最流行的处理方法， 但其抗干扰能力弱，对纯培养的细菌效果好，不适合直接用于临床标本。传统 的碱裂解法裂解不彻底，很难裂解脓性标本。同时碱裂解时间长，容易破坏细 菌基因，降低提取效率。荧光定量PCR是1995年美国PE公司专利技术一种核酸定量技术，在普通PCR的基础上使用荧光探针达到核酸定量的目的。具有灵敏度高、结果准确、操作 简单的特...
【技术保护点】
一种临床标本中病原菌基因鉴定前处理方法，包括以下步骤： （１）胰蛋白酶裂解； （２）碱裂解。
【技术特征摘要】
1、一种临床标本中病原菌基因鉴定前处理方法，包括以下步骤(1)胰蛋白酶裂解；(2)碱裂解。2、 根据权利要求1所述的临床标本中病原菌基因鉴定前处理方法，其特征 在于，胰蛋白酶裂解是在标本中加入等量20mg/l的胰蛋白酶37°C 2 -4h至标本 基本液化，抽吸顺畅。3、 根据权利要求l所述的临床标本...
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