【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及一种犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡及其制备方法和应用。
技术介绍
1、犬c-反应蛋白(canine c-reactive protein，ccrp)是犬的一种急性时相反应蛋白，可作为犬全身性炎症的敏感指标，当犬炎症发作期间，ccrp在血液里的浓度水平会迅速显著升高，随着炎症原的清除，浓度水平又会迅速下降至正常水平。ccrp虽然是一种非特异性反应蛋白，但对于评价微生物感染、判断疾病情况和严重性，以及评估治疗效果和过程具有良好的指导作用，尤其是对抗生素的合理使用有提示性作用。但由于犬c反应蛋白是通过肝脏合成，通常肝脏发生损伤的时候，会影响c反应蛋白的合成，而科研用的elisa甘胆酸试剂盒又不试用于宠物急症检测。
2、甘胆酸是血清甘胆酸(cholyglycine，cg)是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸之一。甘胆酸是妊娠晚期血清中最主要的胆汁酸组分。当肝细胞受损时，肝细胞摄取cg能力下降，致使血中cg含量增高。胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍，而返流血液循环的cg含量增高，也使血cg含量增高。目前极少有针对犬的cg的商业化检测试剂盒，而在人甘胆酸通常用免疫比浊的方法来进行测定，但是这种方法存在灵敏度低，检测低值样本出现0值的问题。
3、目前针对犬c反应蛋白的检测手段有很多，比如免疫比浊法，elisa法、胶体金定量，免疫荧光定量检测，但是存在准确性低，特异性差，灵敏度不高，操作复杂，成本高等问题。cn207248896u公开了一种犬c反应蛋白时间分辨荧光免疫层析检测试剂盒，所述试剂盒的
4、综上所述，目前检测犬c反应蛋白的试剂盒存在准确性低，特异性差，灵敏度不高，无法排除肝脏损伤导致的犬c反应蛋白检测结果偏低等问题。如何提供一种准确性高，特异性强，灵敏度高的犬c反应蛋白检测试剂卡，排除肝脏损伤带来的影响，已成为目前生物
亟待解决的问题之一。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供一种犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡及其制备方法和应用，解决了目前犬c反应蛋白检测方法准确性低，特异性差，灵敏度不高，无法排除肝脏损伤导致的犬c反应蛋白检测结果偏低等问题，能够快速准确地检测c反应蛋白，成本低，操作简单。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供了一种犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，所述双联检测试剂卡包括犬c反应蛋白与甘胆酸双联免疫层析试纸条，所述双联免疫层析试纸条包括依次相连接的样品垫、标记垫、分析膜和吸水垫，所述分析膜上设置有两条测试线和一条质控线。
4、本专利技术创造性地设计了同时检测c反应蛋白和甘胆酸的双联检测试剂卡，准确性高，特异性强，灵敏度高，只要一次加样就可以在很短的时间内同时得到两个项目的结果，为临床诊断带来了很大的便捷，也为生产节约了成本，能够排除肝脏损伤导致的c反应蛋白含量偏低情况。
5、优选地，所述两条测试线为包被有甘胆酸抗体的测试线t1和包被有犬c反应蛋白抗体的测试线t2；质控线包被有质控抗体。
6、优选地，所述质控抗体包括羊抗兔igg。
7、优选地，所述标记垫含有甘胆酸抗原、犬c反应蛋白的抗原和质控标记物，所述甘胆酸抗原、犬c反应蛋白的抗原和质控标记物具有荧光微球标记。
8、优选地，所述荧光微球包括时间分辨荧光微球或荧光素微球、上转发光荧光纳米颗粒或量子点荧光微球中任意一种或至少两种的组合。
9、优选地，所述荧光微球表面修饰官能团包括羟基、磺酸基、羧基或氨基中任意一种或至少两种的组合。
10、优选地，所述质控标记物包括鸡igy或兔igg。
11、本专利技术中的质控标记物为不与检测线交叉的独立免疫反应质控物质。
12、优选地，所述甘胆酸的测定方法包括免疫层析竞争法，所述犬c反应蛋白的测定方法包括免疫层析夹心法。
13、第二方面，本专利技术提供了一种第一方面所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡的制备方法，所述制备方法包括：
14、标记犬c反应蛋白抗体及甘胆酸抗体，制备标记垫、样品垫和免疫试纸组板，组装试剂卡，得到所述犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡。
15、第三方面，本专利技术提供了一种犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂盒，所述试剂盒包括第一方面所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡。
16、第四方面，本专利技术提供了第一方面所述的试剂卡或第三方面所述的试剂盒在检测犬c反应蛋白和/或甘胆酸中的应用。
17、第五方面，本专利技术提供了一种检测犬c反应蛋白和/或甘胆酸的方法，所述方法包括：
18、将待测样品滴加到第一方面所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡的样品垫上，根据显示结果判断待测样品中是否含有犬c反应蛋白和/或甘胆酸。
19、优选地，所述待测样品包所述待测样品包血清、血浆、全血中的任意一种或至少两种的组合。
20、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
21、本专利技术创造性地设计了同时检测c反应蛋白和甘胆酸的荧光免疫层析试剂盒，准确性高，特异性强，灵敏度高，只要一次加样就可以在很短的时间内同时得到两个项目的结果，为临床诊断带来了很大的便捷，也为生产节约了成本，能够排除肝脏损伤导致的c反应蛋白含量偏低情况。
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1.一种犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述双联检测试剂卡包括犬C反应蛋白与甘胆酸双联免疫层析试纸条；
2.根据权利要求1所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述两条测试线为包被有甘胆酸抗体的测试线T1和包被有犬C反应蛋白抗体的测试线T2；质控线包被有质控抗体；
3.根据权利要求1或2所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述标记垫含有甘胆酸抗原、犬C反应蛋白的抗抗体和质控标记物；所述甘胆酸抗原、犬C反应蛋白的抗原和质控标记物具有荧光微球标记。
4.根据权利要求3所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述荧光微球包括时间分辨荧光微球或荧光素微球、上转发光荧光纳米颗粒、量子点荧光微球中任意一种或至少两种的组合；
5.根据权利要求3或4所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述质控标记物包括鸡igY或兔igG。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述甘胆酸的测定方法包括免疫层析竞争法，所述犬C反
7.权利要求1-6中任一项所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
8.一种犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1-6中任一项所述的犬C反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡。
9.权利要求1-6中任一项所述的试剂卡或权利要求8所述的试剂盒在检测犬C反应蛋白和/或甘胆酸中的应用。
10.一种检测犬C反应蛋白和/或甘胆酸的方法，其特征在于，所述方法包括：
...【技术特征摘要】
1.一种犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述双联检测试剂卡包括犬c反应蛋白与甘胆酸双联免疫层析试纸条；
2.根据权利要求1所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述两条测试线为包被有甘胆酸抗体的测试线t1和包被有犬c反应蛋白抗体的测试线t2；质控线包被有质控抗体；
3.根据权利要求1或2所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述标记垫含有甘胆酸抗原、犬c反应蛋白的抗抗体和质控标记物；所述甘胆酸抗原、犬c反应蛋白的抗原和质控标记物具有荧光微球标记。
4.根据权利要求3所述的犬c反应蛋白与甘胆酸双联检测试剂卡，其特征在于，所述荧光微球包括时间分辨荧光微球或荧光素微球、上转发光荧光纳米颗粒、量子点荧光微球中任意一种或至少两种的组合；
5.根据权利要求3或...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑磊，费建枫，
申请(专利权)人：杭州纽太斯特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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