【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生化检测，具体涉及一种黄曲霉毒素b1的检测试剂及检测方法。
技术介绍
1、黄曲霉毒素(aflatoxin，aft)是黄曲霉、寄生曲霉等菌株代谢产生的双呋喃环类有毒次生代谢产物，其衍生物有约20种，分别命名为b1、b2、g1、g2、m1、m2、gm、p1、q1、毒醇等。常见的有黄曲霉毒素b1、b2、g1、g2，其中黄曲霉毒素b1(aflatoxin b1,afb1)的毒性最大，被世界卫生物组织列为ⅰ类致癌物。黄曲霉毒素b1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮，分子量为312.27，其广泛存在于花生、坚果、玉米、稻谷等发霉食品中，对人类有强烈的致病性及致癌性，是对人类危害最严重的真菌毒素之一。
2、我国2016年颁布的《食品中黄曲霉毒素b族和g族的测定》规定了相关的测定方法，2017年颁布的《食品中真菌毒素限量》规定了粮油中黄曲霉毒素b1的限量值，根据食品类型的不同afb1的限量范围在0.5μg/kg到20μg/kg之间。国际上黄曲霉毒素(aflatoxin，aft)最大允许含量不断降低，2004年欧盟再次修订对婴儿和儿童食品中aft的限量标准，包括谷类食品在内的婴幼儿食品以及具有特殊医疗目的的婴儿食品，afb1的最大允许限量均为0.10μg/kg。
3、目前，黄曲霉毒素b1的检测方法主要有液相色谱法和液相色谱-串联质谱法等仪器方法，以及胶体金免疫层析法、荧光免疫法、酶联免疫分析法等免疫分析方法。仪器分析方法虽然灵敏、准确，但仪器昂贵，耗时长等，对操作人员要求较高，不能满足
技术实现思路
1、基于此，有必要提供一种黄曲霉毒素b1的检测试剂，该检测试剂采用化学发光技术的竞争免疫测试法对食品中黄曲霉毒素b1进行检测，检测过程简单及快速，且检测的灵敏度高及稳定性强。
2、具体技术方案如下：
3、一种黄曲霉毒素b1的检测试剂，所述检测试剂采用化学发光技术的竞争免疫测试法对待测样本中黄曲霉毒素b1进行检测，所述检测试剂包括含有化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素b1抗体的r1试剂、含有黄曲霉毒素b1的第一r2试剂和含有固相载体的r3试剂；或
4、所述检测试剂包括含有化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素b1抗体的r1试剂、含有结合有黄曲霉毒素b1的固相载体的第二r2试剂。
5、在其中一个实施例中，所述r3试剂中的固相载体能够与所述第一r2试剂中的黄曲霉毒素b1结合。在其中一个实施例中，所述固相载体与所述黄曲霉毒素b1通过链霉亲和素-生物素系统结合。
6、一种黄曲霉毒素b1的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：利用所述的试剂对待测样本进行黄曲霉毒素b1的检测。
7、在其中一个实施例中，利用所述检测试剂对待测样本进行黄曲霉毒素b1检测包括如下步骤：
8、将待测样本、所述r1试剂、所述第一r2试剂和所述r3试剂混合孵育，清洗分离后，通过化学发光法检测化学发光物质的相对发光强度，获得待测样本中的黄曲霉毒素b1含量；或者，
9、将待测样本、所述r1试剂和所述第二r2试剂混合孵育，清洗分离后，通过化学发光法检测化学发光物质的相对发光强度，获得待测样本中的黄曲霉毒素b1含量。
10、在其中一个实施例中，利用所述检测试剂对待测样本进行黄曲霉毒素b1检测包括如下步骤：
11、将待测样本与所述r1试剂进行第一次孵育反应，加入所述第一r2试剂和所述r3试剂进行第二次孵育反应，清洗分离后，通过化学发光法检测化学发光物质的相对发光强度，获得待测样本中的黄曲霉毒素b1含量；或者
12、将待测样本与所述r1试剂进行第一次孵育反应，加入所述第二r2试剂进行第二次孵育反应，清洗分离后，通过化学发光法检测化学发光物质的相对发光强度，获得待测样本中的黄曲霉毒素b1含量。
13、相对于传统技术，本申请具备如下有益效果：
14、本申请提供的黄曲霉毒素b1的检测试剂(化学发光法)灵敏度高，重复性好，批间变异系数小，且检测的线性范围广。
15、本申请还提供了利用上述检测试剂对待测样本中黄曲霉毒素b1进行检测的方法，该方法操作简单，成本更低，可以快速获得检验结果，且具有检测灵敏度高、稳定性强、自动化程度高、适用范围广、环境污染小等优势。
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1.一种黄曲霉毒素B1的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂采用化学发光技术的竞争免疫测试法对待测样本中黄曲霉毒素B1进行检测，所述检测试剂包括含有化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素B1抗体的R1试剂、含有黄曲霉毒素B1的第一R2试剂和含有固相载体的R3试剂；或
2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述R3试剂中的固相载体与所述第一R2试剂中的黄曲霉毒素B1通过链霉亲和素-生物素系统结合。
3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述化学发光物质包括吖啶类化学发光物质；
4.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素B1抗体的工作浓度为0.04μg/mL～4.0μg/mL；
5.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述R1试剂、所述第一R2试剂、所述第二R2试剂和所述R3试剂各自独立地还包括钠盐、蛋白保护剂、表面活性剂、防腐剂和缓冲基质中的一种或多种；
6.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂还包括样本稀释液和校准品中的至少一种；
...【技术特征摘要】
1.一种黄曲霉毒素b1的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂采用化学发光技术的竞争免疫测试法对待测样本中黄曲霉毒素b1进行检测，所述检测试剂包括含有化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素b1抗体的r1试剂、含有黄曲霉毒素b1的第一r2试剂和含有固相载体的r3试剂；或
2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述r3试剂中的固相载体与所述第一r2试剂中的黄曲霉毒素b1通过链霉亲和素-生物素系统结合。
3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述化学发光物质包括吖啶类化学发光物质；
4.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述化学发光物质标记的抗黄曲霉毒素b1抗体的工作浓度为0.04μg/ml～4.0μg/ml；
5.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述r1试剂、所述第一r2试剂、所述第二r2试剂和所述r3...
【专利技术属性】
技术研发人员：祝亮，肖文超，胡智，何凡，
申请(专利权)人：深圳市卓润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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