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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物组织培养,涉及一种提高完全脱分化植物愈伤组织继代效率的方法。
技术介绍
1、完全脱分化的植物愈伤组织细胞是干细胞,具有全能性,因此可以用于研究细胞分裂周期、植物再生与无性繁殖等,是植物组织培养工程重要的一个环节。
2、植物愈伤组织继代是植物愈伤组织培养和扩繁的基础性工作,传统的植物愈伤组织继代是先将超净工作台灭菌后,再将植物组培镊子在酒精灯外焰上加热消毒,有安全隐患,然后冷却至室温再进行继代,整个过程需要很长时间;且一次能加热消毒的植物组培镊子数量有限,极大地限制了一次实验中大批量继代不同株系愈伤组织的数量。
3、在愈伤悬浮培养时,用植物组培镊子转移愈伤组织到液体培养基中,不能很好地将愈伤组织打散,有很多较大的组织块,影响悬浮细胞的生长;实验完成后还需清理植物组培镊子,整个实验过程步骤繁琐又耗时。
技术实现思路
1、本专利技术目的是提供一种简单、快速、大批量继代完全脱分化植物愈伤组织的实验方法,具体为提供一种提高完全脱分化植物愈伤组织继代效率的方法。
2、第一方面,本专利技术提供了一种转移植物愈伤组织的方法,包括如下步骤:用1000μl或200μl移液器吸头挑取植物愈伤组织,转移到培养容器中。
3、上文所述方法在无菌的环境中进行。
4、上文所述方法中,所述培养容器为装有培养基的培养皿或培养瓶。
5、上文所述方法中,所述培养基为固体或液体。
6、上述方法还包括如下步骤:在将所述植物愈
7、上文所述方法中,1000μl或200μl移液器吸头均为灭菌后吸头。
8、第二方面,本专利技术提供了一种继代植物愈伤组织的方法,包括如下步骤:
9、将用1000μl或200μl移液器吸头挑取植物愈伤组织,转移到继代培养基中进行继代培养,实现继代植物愈伤组织。
10、第三方面,本专利技术提供了一种悬浮培养植物愈伤组织细胞的方法,包括如下步骤:
11、1)将用1000μl或200μl移液器吸头挑取植物愈伤组织,转移到悬浮培养的液体培养基,得到含有植物愈伤组织的液体培养基;
12、2)用5ml移液器吸头轻轻地吹打,分散所述含有植物愈伤组织的液体培养基中的植物愈伤组织,得到含有植物悬浮细胞的培养基;
13、3)培养所述含有植物悬浮细胞的培养基,实现悬浮培养植物愈伤组织细胞。
14、第四方面,本专利技术提供了第一至三任一方面所述方法在继代植物愈伤组织中的应用。
15、第五方面,本专利技术提供了第一至三任一方面所述方法在悬浮培养植物愈伤组织细胞中的应用。
16、第六方面,本专利技术提供了1000μl或200μl移液器吸头在继代植物愈伤组织中的应用。
17、第七方面,本专利技术提供了1000μl或200μl移液器吸头在悬浮培养植物愈伤组织细胞中的应用。
18、本专利技术具有如下优点:
19、1、将一盒密封的国产1000μl吸头(60或100个)或200μl吸头(96个)高压蒸汽灭菌并烘干。将烘干吸头和移液器放入超净工作台中,紫外灭菌后,即可立即使用,极大地节省实验时间;
20、2、且一次实验中可以大批量继代不同株系的愈伤组织;
21、3、此外,如果一次实验中吸头未使用完,可以在超净工作台中重新密封后,留存其中,下次再继续使用。
22、4、在愈伤组织细胞悬浮培养时,先用无菌的1000μl吸头或200μl吸头转移愈伤组织到液体培养基中,
23、5、再用5ml移液器插上吸头,轻轻地吸入、吹出,便能很好地将愈伤组织打散,分散成单细胞或很小的组织块,有利于悬浮细胞的生长;吸头使用后直接丢弃即可,无需清理,国产吸头也比较便宜。
24、总之,本专利技术的方法,操作简易,减少繁琐的步骤,极大地提高了完全脱分化植物愈伤组织的继代效率,且可大批量继代,减少安全隐患,同时减少植物愈伤组织的污染率。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种转移植物愈伤组织的方法,包括如下步骤:用1000μL或200μL移液器吸头挑取植物愈伤组织,转移到培养容器中。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法在无菌的环境中进行。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述培养容器为装有培养基的培养皿或培养瓶。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
5.一种继代植物愈伤组织的方法,包括如下步骤:
6.一种悬浮培养植物愈伤组织细胞的方法,包括如下步骤:
7.权利要求1-4中任一所述方法在继代植物愈伤组织中的应用。
8.权利要求1-4中任一所述方法在悬浮培养植物愈伤组织细胞中的应用。
9.1000μL或200μL移液器吸头在继代植物愈伤组织中的应用。
10.1000μL或200μL移液器吸头在悬浮培养植物愈伤组织细胞中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种转移植物愈伤组织的方法,包括如下步骤:用1000μl或200μl移液器吸头挑取植物愈伤组织,转移到培养容器中。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法在无菌的环境中进行。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述培养容器为装有培养基的培养皿或培养瓶。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
5.一种继代植物愈伤组织的方法,包括...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜平州,薛秀花,马涌洁,曹施霖,任海云,
申请(专利权)人:北京师范大学珠海校区,
类型:发明
国别省市:
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