【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种肽和抗肽的抗体，以及它们在诊断中的用途，特别是诊断骨折、骨硬化和相关疾病。
技术介绍
1、骨骼的重建和软骨的生成是两个独立且严格控制的物理现象。这两个过程由不同的信号机制调节，并由不同的细胞类型控制。例如，软骨细胞负责软骨的重塑，而成骨细胞和破骨细胞则控制骨骼的重建和构塑。骨骼的变化，被描述为重建和构塑，在身体的许多部位同时发生。骨骼在整个生命过程中都处于活跃的代谢状态，每年大约有20％的骨骼被更换。
2、骨构塑根据生理和机械力改变骨骼的形状和大小。这在成长中的动物中最为突出。成年动物的骨构塑将替换并更新旧的骨基质并维持其强度和矿物质稳态。骨骼血管化良好，并且血管生成与骨骼活性有关。
3、另一方面，软骨没有血管化，转换速度非常慢，更新能力也非常低。
4、所述骨基质包括：有机成分例如i型胶原蛋白和蛋白聚糖，以及无机骨盐(主要是羟基磷灰石)。在软骨中，ii型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖是主要的基质分子。双糖链蛋白聚糖是一种富含亮氨酸的重复蛋白聚糖，在软骨和骨结缔组织中表达，被认为在骨的矿化中发挥作用。
5、骨骼的构塑可能发生在不同的情况下，例如剧烈的体育训练、骨折以及骨关节炎。
6、骨关节炎(oa)是一种由关节软骨和下层的骨骼破坏引起的低度慢性全身炎症性疾病。所述疾病从以炎症和受影响关节中基质蛋白开始瓦解表征的早期阶段发展到以下层骨骼受损表征的更严重的阶段。主要症状是关节疼痛。骨关节炎是一个主要的临床问题，其影响着大约3.8％的人群。据估计，50％的nsaid止
7、尽管关节疼痛常常导致医生怀疑是oa，特别是如果患者年龄较大，但目前很难诊断oa的早期阶段。如今，诊断通常基于使用放射学对oa晚期典型的不可逆结构损伤进行识别。然而，因为结构损伤尚不可见，x射线或mri不能用于诊断早期oa。此外，x射线和mri检查需要昂贵的设备，并且需要与放射科医生预约。
8、马的骨关节炎对马主来说是一个大问题。拥有马的主要原因是能够使用它，并且经常在比赛中使用马。oa是马匹因跛行而无法使用的最常见原因，并且oa是马业最大的单一经济损失。
9、除本专利技术上下文所述的oa之外，骨骼重建发生在骨折愈合期间和锻炼后。运动会引起骨骼重建，并在一定程度上生理性的导致软骨下骨硬化。然而，非病理性的骨硬化可能会跨越到病理性水平，从而导致骨和软骨界面出现微裂纹。
10、骨硬化是一种以骨骼硬化和密度增加为特征的疾病，因为在运动员或马的训练过程中骨细胞对机械负荷做出反应。
11、微裂纹是当施加到骨头上的力超过该骨头的强度时导致的骨头上的微小骨折。这可以通过例如跑步、舞蹈、军事训练或体操等剧烈活动来实现。因此，机械负载可能会产生微裂纹。
12、微裂纹可能会导致所谓的碎裂性骨折，其中一部分骨骼和软骨分离。碎裂性骨折是非常有问题的，特别是如果它们发生在马的腕关节。在许多情况下，马无法从这种伤害中恢复，此外，碎裂性骨折可能会发展成灾难性伤害，并且马需要被安乐死。此外，当疾驰的赛马在比赛中发生腕骨骨折时，骑师可能会受到严重性伤害。碎裂性骨折也称为撕脱性骨折。
13、由骨骼创伤引起的骨水肿可能发展为骨硬化。运动员经常感到训练和比赛的冲动，即使他们感到骨骼疼痛，例如骨挫伤引起的疼痛。例如，足球运动员的腿部经常出现这种疼痛。带着这种疼痛进行训练可能会导致以后出现并发症，例如骨质硬化或碎裂性骨折。因此，有很强的需求能够监测这些状况，以便能够知道运动员应该休息多长时间，以防止以后出现并发症。
14、赛马在训练过程中会出现生理性骨硬化，最终会发展为病理性微裂纹，导致碎裂性骨折和急性灾难性关节内骨折(diab et al.j vet diagn invest.2017；29(4):405-413)。
15、受oa影响的关节中的骨重建也可能导致骨骼中的微裂纹。这些微裂纹反过来可能会导致所谓的碎裂性骨折，其中一部分骨头和软骨分离。碎裂性骨折是非常有问题的，特别是当它们发生在马的腕关节时。在许多情况下，马无法从这种伤害中恢复，此外，所述碎裂性骨折可能会导致灾难性伤害，并且马需要被安乐死。
16、马和人类中的骨关节炎是由相似的机制引起的。在人类和马中，oa以炎症为特征的早期阶段经过数月和数年发展到具有广泛组织损伤的后期阶段(goldring,m.b.andotero m.current opinion in rheumatology(2011)23(5):471)。人类和马的oa疾病机制在分子水平上也非常相似(stenberg j,u,e,j,lindahl a.proteome sci.(2013)oct4；11(1):43)(svala e,m,sihlbom c,rüetschi u,lindahl a,ekman s,e.connect tissue res.(2015)；56(4):315-25)。软骨下骨(scb)微环境中与疲劳相关的变化是骨关节炎形成因素的一部分(hu etal bone res.2021；9(1):20)。这通常发生在oa期间软骨产生损伤之前。wo 2017216289公开了comp片段在诊断oa的用途。comp片段是软骨退化的生物标志物。
17、如果有更方便的方法来诊断和分期oa将会是很有用的。oa早期标志物的缺乏阻碍了药物的开发，这些药物可用于在疾病表现为不可逆的组织损伤之前控制该疾病。因此，仍然需要改进的oa生物标志物。
18、目前还没有可以识别最终导致微裂纹，从而导致马匹疼痛和随后的跛行的骨骼重建的早期阶段的诊断工具。
19、需要预防、诊断和防止微裂纹和骨硬化以及过度训练和相关病症。此外，需要改进的方法来诊断癌症，特别是结肠癌。
20、诊断通常使用血液样本进行。这可能会引起患者不适，并且对患者来说并非完全没有风险，因为它涉及从静脉抽取血样。如果能够以更方便的方式进行这样的诊断是有用的。
21、马术场地的地面材料(所谓的“地基”)对于马匹的健康非常重要。例如，太硬的地基可能会导致如软骨下骨增加和骨折。最近开发了新的地基。例如，近年来引入了沙子和聚合物纤维的混合物。新的地基对马匹健康的影响存在一些不确定性。需要更好的方法来研究此类地基。
22、本专利技术解决了这些和其他问题。
技术实现思路
1、本专利技术人惊奇地发现本专利技术表明了双糖链蛋白多糖(bgn262)(n-末端-glghn(seqid no 1))的切割片段在骨破坏和软骨下骨硬化以及其他疾病中是显著的。
2、本专利技术第一方面提供了一种与包含n末端-glghn(seq id no 1)的氨基酸序列的肽特异性地结合的抗体。
3、所述抗体可用于检测暴露n-末端的双糖链蛋白多糖的蛋白水解片段。
4、本专利技术第二方面提供了一种根据本专利技术第一方面所述的抗体在诊断中的用途。所述诊断可能是受试者的骨关节炎、骨硬化本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种诊断疾病的方法，所述疾病选自：骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、癌症、动脉粥样硬化斑块、主动脉瓣狭窄、大骨节病(Kashin-Beckdisease)、肌腱炎、眼科疾病、皮肤病、纤维化、类风湿性关节炎、狼疮性肾炎、糖尿病、钙化主动脉瓣疾病、心包心肌炎、1型胰岛素依赖性糖尿病或克罗恩病，所述方法包括提供先前从受试者分离的样品并分析所述样品中是否存在包含N-末端-GLGHN氨基酸序列的肽。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述疾病为骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、骨挫伤、骨质疏松症或癌症。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述疾病为骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤或骨质疏松症。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述癌症为结肠癌。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述样品为滑液、脊髓液(液体)、血清、血液、血浆、尿液或唾液的样品。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述样品为唾液样品。
7.一种特异性地
8.根据权利要求7所述的抗体，在诊断受试者的疾病中的用途，所述疾病包括：骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、癌症、动脉粥样硬化斑块、主动脉瓣狭窄、克汀病、肌腱炎、眼科疾病、皮肤病、纤维化、类风湿性关节炎、狼疮性肾炎、糖尿病、钙化主动脉瓣疾病、心包心肌炎、1型胰岛素依赖性糖尿病或克罗恩病。
9.根据权利要求7所述的抗体的用途，其中，所述诊断为骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤或骨质疏松症疾病的诊断。
10.根据权利要求7-9中任意一项所述的抗体的用途，其中，所述抗体用于检测来源于受试者的样本中的包含N-末端-GLGHN氨基酸序列的肽的量。
11.根据权利要求10所述的抗体的用途，其中，所述样品为滑液、脊髓液(液体)、血清、血液、血浆、尿液或唾液的样品。
12.一种预防受试者患骨关节炎、骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折或撕脱性骨折的方法，包括以下步骤：
13.一种包含权利要求7所述的抗体的试剂盒。
14.根据权利要求13所述的试剂盒，其中，所述抗体被包含于一次性使用的诊断装置中，其中，所述试剂盒另外包含唾液取样装置。
15.根据权利要求14所述的试剂盒，其中，所述诊断装置为侧流装置。
16.一种包含N末端-GLGHN(SEQ ID NO：1)氨基酸序列的肽。
17.包含N末端-GLGHN(SEQ ID NO：1)氨基酸序列的肽在生产抗体中的用途。
18.一种用于测定赛马场的地基特性的方法，包括从已经在该地基上锻炼的马获得样品并分析该样品是否存在包含N末端-GLGHN氨基酸序列的肽。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种诊断疾病的方法，所述疾病选自：骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、癌症、动脉粥样硬化斑块、主动脉瓣狭窄、大骨节病(kashin-beckdisease)、肌腱炎、眼科疾病、皮肤病、纤维化、类风湿性关节炎、狼疮性肾炎、糖尿病、钙化主动脉瓣疾病、心包心肌炎、1型胰岛素依赖性糖尿病或克罗恩病，所述方法包括提供先前从受试者分离的样品并分析所述样品中是否存在包含n-末端-glghn氨基酸序列的肽。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述疾病为骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、骨挫伤、骨质疏松症或癌症。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述疾病为骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤或骨质疏松症。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述癌症为结肠癌。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述样品为滑液、脊髓液(液体)、血清、血液、血浆、尿液或唾液的样品。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述样品为唾液样品。
7.一种特异性地结合肽的抗体，所述肽包含n末端-glghn(如seq id no：1所示)的氨基酸序列。
8.根据权利要求7所述的抗体，在诊断受试者的疾病中的用途，所述疾病包括：骨硬化、骨折、关节碎裂性骨折、撕脱性骨折、骨挫伤、骨质疏松症、癌症、动脉粥样硬化斑块、主动脉瓣狭窄、克汀病、...
【专利技术属性】
技术研发人员：伊娃·斯蔻德布兰德，安德斯·林达尔，斯蒂娜·艾克曼，
申请(专利权)人：斯格普斯生命科学公司，
类型：发明
国别省市：
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