一种用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法技术

本发明专利技术公开了一种用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，属于生物技术领域。本发明专利技术方法包括磁性纳米粒子与聚‑L‑赖氨酸的偶联，聚‑L‑赖氨酸修饰的磁性纳米粒子复合物与叶酸的偶联，聚‑L‑赖氨酸介导的叶酸修饰的磁性纳米粒子捕获血液中的肺癌循环肿瘤细胞，在外加磁场的作用下，将捕获的肺癌循环肿瘤细胞与血液进行分离等步骤。本发明专利技术的磁珠具有良好的生物相容性和分散性，且具有较低的生理毒性，和细胞结合后，具有高效的分离和捕获效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法。

技术介绍

1、循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,ctcs)是一种从原发肿瘤中脱落进入外周血流循环中的肿瘤细胞。ctc与人体内肿瘤的产生、转移、复发直接相关，其作为一种新型的肿瘤检测标志物，提供的宝贵信息对于肿瘤的早期诊断、预后判断和治疗具有重要意义。在我国，肺癌是对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近年来，我国的肺癌患者人数逐年增加且呈年轻化趋势，死亡率居高不下。肺癌的预防和早期发现已成为我国肿瘤控制的重点内容。然而，在复杂外周血液基质中肺癌循环肿瘤细胞的痕量分布给诊断带来了一定的困难。因此，迫切需要建立一种用于肺癌循环肿瘤细胞的高效分离和富集的方法。

2、许多技术已经用于ctcs的分离与富集，例如：密度梯度离心法、膜过滤法、介电分离、流式细胞术等。然而，现有方法存在操作复杂、分离效果差、稳定性不佳、破坏细胞生物特性等问题，影响检测的最终结果。

技术实现思路

1、针对现有技术的缺陷，本专利技术的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，其特征在于，步骤1)所述磁性纳米粒子为市售的工业化羧基磁珠(超顺磁性聚合物纳米微球)，磁核为四氧化三铁，壳层为聚苯乙烯，表面修饰有羧基官能团，其粒径为50～180nm。

3.根据权利要求1所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，其特征在于，所述洗涤、重悬均采用无菌MES缓冲液。

4.根据权利要求1或3所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，其特征在于，所述MES缓冲液的浓度为10mM，pH为6.0～7.0。</p>

5.根据...

【技术特征摘要】

1.一种用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，其特征在于，步骤1)所述磁性纳米粒子为市售的工业化羧基磁珠(超顺磁性聚合物纳米微球)，磁核为四氧化三铁，壳层为聚苯乙烯，表面修饰有羧基官能团，其粒径为50～180nm。

3.根据权利要求1所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的磁分离方法，其特征在于，所述洗涤、重悬均采用无菌mes缓冲液。

4.根据权利要求1或3所述用于富集肺癌循环肿瘤细胞的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹叶青，许恒毅，申阳，滕红，
申请(专利权)人：南昌大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：