【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于蛋白催化，尤其涉及一种催化合成苦橙油醇的基因、蛋白及其在生产苦橙油醇中的应用。
技术介绍
1、苦橙油醇(nerolidol，又名橙化叔醇、3,7,11-三甲基-1,6,10-十二碳三烯-3-醇等)。苦橙油醇是一种美妙的芳香物质，广泛应用在香料、化妆品行业，以及食品和饮料的香味提升等情境。
2、化学上，苦橙油醇具有酒精骨架，是一种单萜醇类化合物，其结构式为c10h18o。独特的是，它存在反式和顺式的异构体，使得自然界和实验室中通常出现的是苦橙油醇的混合物。
3、值得关注的是，医药领域的研究表明，苦橙油醇展现出消炎、止痛和抗紧张等药理活性，具备广阔的研究和开发价值。加上其较高的水溶性和良好的生物相容性，又是优秀的溶剂，使它能作为辅助物质，增强药物的溶解性和吸收效率。
4、现有的苦橙油醇多采用化学合成和自然提取的方法，化学合成的方法存在环境污染问题，自然提取方法效率低、成本高。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种催化合成苦橙油醇的基因、蛋白及其在生产苦橙油醇中的应用；本专利技术提供了基于生物合成的苦橙油醇制备方法，能够实现高效生产苦橙油醇，既解决了化学合成中可能产生的环境污染问题，也突破了自然提取效率低、成本高的局限，具备巨大的实用价值和市场潜力。
2、本专利技术提供了一种催化合成苦橙油醇的基因，所述基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。
3、本专利技术提供了一种催化合成苦橙油醇的蛋白，
4、本专利技术提供了所述的蛋白的制备方法，包括以下步骤：
5、1)将所述的基因克隆连接到初始载体中获得重组载体；
6、2)将所述重组载体转入初始菌株中获得重组菌株；
7、3)培养所述重组菌株获得菌体细胞；
8、4)破碎所述菌体细胞获得细胞裂解液，纯化获得目标蛋白。
9、优选的，所述初始载体为pcold载体。
10、本专利技术提供了一种生产苦橙油醇的方法，包括以下步骤：
11、将底物、反应液和所述的蛋白混合孵育，终止反应后，添加小牛肠道碱性磷酸酶进行产物的去磷酸化，获得苦橙油醇。
12、优选的，所述混合孵育的温度为25～35℃，所述混合孵育的时间为10～20min。
13、优选的，所述底物为香叶基焦磷酸，所述底物在反应体系中的浓度为8～12mm；所述蛋白在反应体系中的浓度为0.5～10mg/ml。
14、优选的，所述反应液包括tris-hcl、mgcl2、二硫苏糖醇dtt、苯甲基磺酰氟pmsf。
15、优选的，所述小牛肠道碱性磷酸酶的体积为反应体系体积的1～2％；所述去磷酸化的温度为36～38℃，所述去磷酸化的时间为50～70min。
16、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供的生物酶能够实现高效生产苦橙油醇，既解决了化学合成中可能产生的环境污染问题，也突破了自然提取效率低、成本高的局限，具备巨大的实用价值和市场潜力。根据实施例记载，所述生物酶催化生产苦橙油醇的最高产量为15mg/l。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种催化合成苦橙油醇的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种催化合成苦橙油醇的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.权利要求2所述的蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述初始载体为pCold载体。
5.一种生产苦橙油醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述混合孵育的温度为25～35℃，所述混合孵育的时间为10～20min。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述底物为香叶基焦磷酸，所述底物在反应体系中的浓度为8～12mM；所述蛋白在反应体系中的浓度为0.5～10mg/mL。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述反应液包括Tris-HCl、MgCl2、二硫苏糖醇DTT和苯甲基磺酰氟PMSF。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述小牛肠道碱性磷酸酶的体积为反应体系体积的1～2％；所述去
...【技术特征摘要】
1.一种催化合成苦橙油醇的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.一种催化合成苦橙油醇的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.权利要求2所述的蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述初始载体为pcold载体。
5.一种生产苦橙油醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述混合孵育的温度为25～35℃，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈贤情，王筱，白涛，
申请(专利权)人：嘉兴欣贝莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。