一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，属于固定化酶技术领域，包括如下步骤：S1、固定化酶液的制备：S11、试剂的配制；S12、固定化酶与载体结合；S2、酶的固定化；S3、固定化酶催化条件探究：S31、温度及pH条件确定；S32、固定化酶重复反应批次确定。本发明专利技术解决了现有的固定化酶，其重复使用次数较少，稳定性差，且酶活损失率较高的问题，本发明专利技术制备的固定化酶可以在腈类物质中稳定存在，具有机械强度高、酶活损失率低及易于保存的特点，进行催化三氰基吡啶生产烟酸时，具有副产物少、产物得率高、反应液澄清等特点，其成本较低，操作方便，反应温和，污染小，重复使用次数较多，具有一定的工业化使用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及固定化酶，具体为一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法。

技术介绍

1、烟酸又称维生素b3，在生物体的生命活动中起着重要作用，烟酸具有抗氧化活性，可以保护蛋白质免受辐射的损害；食用含有烟酸的饮食可以降低牛、火鸡或猪等的脂肪含量，从而改善肉质，此外，烟酸还可以作为原料来合成新的化学中间体，例如烟酰胺、6-羟基烟酸等。

2、利用含有腈水解酶的微生物催化生产酰胺类化合物具有反应效率高、专一性好及条件温和等优点，但游离细胞在反应过程中易发生破碎，释放出所含腈水合酶和细胞组分，不仅酶容易失活，而且细胞无法重复利用，只能转化单批次反应，同时会导致产物分离纯化困难等问题，而细胞固定化技术可以有效解决上述问题，具有重要的工业应用价值。

3、固定化技术主要包括细胞的固定化及游离酶的固定化，据目前的研究报道，绝大多数腈类化合物生物催化都是采用固定化后的生物催化剂进行的，直接采用游离细胞进行生物催化的工艺相对较少。例如，kumar等利用共价交联聚合的方式对恶臭假单胞菌腈水解酶进行了固定化，研究表明固定化后的p.putida腈水解酶能够在4℃的条件本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述S11中，0.02M K2HPO4·3H2O的配制为称取4.56g的K2HPO4溶于1L的H2O中。

3.根据权利要求2所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述S11中，0.02M KH2PO4的配制为称取1.36g的KH2PO4溶于500ml的H2O中。

4.根据权利要求3所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述S12中，磷酸盐缓冲液的加入量为：K2HPO4的单位质量与体积比为总量...

【技术特征摘要】

1.一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述s11中，0.02m k2hpo4·3h2o的配制为称取4.56g的k2hpo4溶于1l的h2o中。

3.根据权利要求2所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述s11中，0.02m kh2po4的配制为称取1.36g的kh2po4溶于500ml的h2o中。

4.根据权利要求3所述的一种固定化腈水解酶生产烟酸的方法，其特征在于，所述s12中，磷酸盐缓冲液的加入量为：k2hpo4的单位质量与体积比为总量的25％，kh2po4的单位质量与体积比为总量的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘博超，周媛，史玉龙，王本超，杨亚航，
申请(专利权)人：安徽瑞邦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：