【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蛋白制备，具体为一种蛋白提取及其制备方法。
技术介绍
1、蛋白提取及其制备方法是一种进行蛋白提取与加工的支撑方法，蛋白具有极高的营养，人体摄入蛋白必不可少，蛋白的提取方法多样化，为营养素中的一种，随着科技的不断发展，人们对于蛋白提取及其制备方法的制造工艺要求也越来越高；
2、现有的蛋白在提取的过程中往往需要氢氧化钠一类的酸性或碱性物质来溶解细胞膜和细胞壁，以此来析出蛋白质，但是酸性物质可能导致蛋白质的变性，过高的酸性条件会使蛋白质发生变性，影响其结构和功能，并且在酸性条件下，蛋白质容易受到蛋白酶的降解，降低蛋白质的稳定性和纯度，同样的，碱性物质可能导致蛋白质的聚集，过高的碱性条件会导致蛋白质发生聚集，影响其溶解和提取效率，碱性物质可能导致蛋白质的氨基酸改变，碱性条件可能导致蛋白质中的氨基酸发生改变，影响蛋白质的结构和功能，并且常见的蛋白质在制备的过程中往往同样需要添加酸性或碱性的物质进而影响其不在正常的ph值范围内，使得制得的蛋白质难以长期稳定地保存，为此，我们提出一种蛋白提取及其制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种蛋白提取及其制备方法。
2、以解决上述
技术介绍
中提出的问题，本专利技术提供如下技术方案：一种蛋白提取及其制备方法，包括以下操作步骤：
3、s1：挑选一定量的高蛋白昆虫，所述高蛋白昆虫为风干后的黑水虻成虫，可生产高价值的动物蛋白，挑选一定量的双缩脲试剂，所述双缩脲试剂为0.1g/ml的naoh溶液的a
4、s2：挑选一定数量的ph值为中性的磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液是一种常用的缓冲溶液，以此作为溶解剂，挑选一定数量的tritonx-100溶液，所述tritonx-100溶液是一种非离子表面活性剂，以此来裂解细胞膜，挑选一定数量的蛋白酶抑制剂，所述蛋白酶抑制剂为苯甲酸二甲酰胺；
5、s3：将挑选的黑水虻成虫收集到研钵中，然后通过研钵杵对其进行研磨破碎成粉末状，在研磨破碎完成后，添加一定量的蒸馏水洗涤研钵和研钵并溶解粉末后制成研磨液；
6、s4；依次向研磨液中加入适量的磷酸盐缓冲液和tritonx-100溶液，然后通过玻璃棒对其充分搅拌后振荡，随后静置一段时间，然后向溶液中添加苯甲酸二甲酰胺，再将溶液双等份置于试管中，随后按照对称位置放置在离心机中进行离心；
7、s5：取试管中离心后的上层液，通过滴加盐酸调节ph值，随后再次置于离心机中进行离心，再依次向其中加入双缩脲试剂的a液和b液，通过观察检测蛋白质的生成情况，得到总蛋白溶液。
8、作为本专利技术的进一步方案：所述黑水虻的份额为45％至50％之间，所述磷酸盐缓冲液的份额为8％至11％之间，所述tritonx-100溶液的份额为9％至13％之间，所述双缩脲试剂a液的份额为2％，所述双缩脲试剂b液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为4％至6％之间。
9、作为本专利技术的进一步方案：所述黑水虻的份额为48％，所述磷酸盐缓冲液的份额为9％，所述tritonx-100溶液的份额为10％，所述双缩脲试剂a液的份额为2％，所述双缩脲试剂b液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为5％。
10、作为本专利技术的进一步方案：所述黑水虻的份额为50％，所述磷酸盐缓冲液的份额为11％，所述tritonx-100溶液的份额为13％，所述双缩脲试剂a液的份额为2％，所述双缩脲试剂b液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为4％。
11、一种蛋白制备方法，包括以下操作步骤：
12、s1：挑选一定量的总蛋白溶液，所述总蛋白溶液由黑水虻成虫经过研磨、搅拌、离心和反应后制得，挑选一定量的蛋白上样缓冲液，所述蛋白上样缓冲液主要成分为sds(十二烷基硫酸钠)；
13、s2：挑选一定量的氧化剂，所述氧化剂为过氧化钠，所述过氧化钠有助于蛋白质的稳定和结构形成，挑选一定量的甘油和聚乙二醇；
14、s3：将生成的总蛋白溶液装入烧杯中，对总蛋白溶液进行搅拌，在搅拌的同时加入蛋白上样缓冲液，随后在搅拌均匀之后装入试管中，再将试管置于离心机中进行离心操作；
15、s4：依次向离心后的总蛋白溶液中加入过氧化钠、甘油以及聚乙二醇，充分搅拌均匀后再次置于离心机中进行离心操作，将离心后的总蛋白溶液静置一段时间，随后取其上层清液，再对其进行冷冻密封保存，此时蛋白制备完成。
16、作为本专利技术的进一步方案：所述总蛋白溶液的份额为45％至50％之间，所述蛋白上样缓冲液的份额为8％至12％之间，所述过氧化钠的份额为11％至15％之间，所述甘油的份额为5％至8％之间，所述聚乙二醇的份额为10％至13％之间。
17、作为本专利技术的进一步方案：所述总蛋白溶液的份额为48％，所述蛋白上样缓冲液的份额为9％，所述过氧化钠的份额为11％，所述甘油的份额为6％，所述聚乙二醇的份额为10％。
18、作为本专利技术的进一步方案：所述总蛋白溶液的份额为45％，所述蛋白上样缓冲液的份额为12％，所述过氧化钠的份额为15％，所述甘油的份额为8％，所述聚乙二醇的份额为13％。
19、采用上述技术方案，与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
20、1、本专利技术通过取出一定的黑水虻成虫，然后将其收集到研钵中，然后通过研钵杵对其进行研磨破碎成粉末状，在研磨破碎完成后，添加一定量的蒸馏水洗涤研钵和研钵并溶解粉末后制成研磨液，随后依次向研磨液中添加磷酸盐缓冲液和tritonx-100溶液，通过添加中性的磷酸盐缓冲液和tritonx-100溶液，然后静置一段时间，以此来破碎细胞壁和细胞膜，进而能够释放出蛋白质，然后向溶液中添加苯甲酸二甲酰胺，用以沉淀蛋白质，随手将溶液双等份置于试管中，随后按照对称位置放置在离心机中进行离心，在离心后取上层液，在此过程中无需添加较强的酸性或碱性的物质来影响溶液的ph值，使得蛋白质在提取的过程中蛋白质不会出现变性、纯度降低、稳定性降低、难以溶解和提取等问题，大大提高了蛋白质的提取效率，并且降低了提取难度；
21、2、本专利技术通过选择蛋白上样缓冲液、过氧化钠、甘油以及聚乙二醇来制备蛋白，使得制备过程中酸碱性适中在中性附近，进而使得制得的蛋白无需后期添加酸性或碱性试剂来调节ph值，使得能够大大降低操作难度，并且能够简单快速地对制得的蛋白进行快速保存，并且能够大大提高蛋白的保存期限。
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1.一种蛋白提取方法，其特征在于，包括以下操作步骤：
2.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为45％至50％之间，所述磷酸盐缓冲液的份额为8％至11％之间，所述TritonX-100溶液的份额为9％至13％之间，所述双缩脲试剂A液的份额为2％，所述双缩脲试剂B液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为4％至6％之间。
3.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为48％，所述磷酸盐缓冲液的份额为9％，所述TritonX-100溶液的份额为10％，所述双缩脲试剂A液的份额为2％，所述双缩脲试剂B液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为5％。
4.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为50％，所述磷酸盐缓冲液的份额为11％，所述TritonX-100溶液的份额为13％，所述双缩脲试剂A液的份额为2％，所述双缩脲试剂B液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为4％。
5.一种蛋白制备方法，其特征在于，包括以下操作步骤：
6.根据权利
7.根据权利要求5所述的一种蛋白制备方法，其特征在于：所述总蛋白溶液的份额为48％，所述蛋白上样缓冲液的份额为9％，所述过氧化钠的份额为11％，所述甘油的份额为6％，所述聚乙二醇的份额为10％。
8.根据权利要求5所述的一种蛋白制备方法，其特征在于：所述总蛋白溶液的份额为45％，所述蛋白上样缓冲液的份额为12％，所述过氧化钠的份额为15％，所述甘油的份额为8％，所述聚乙二醇的份额为13％。
...【技术特征摘要】
1.一种蛋白提取方法，其特征在于，包括以下操作步骤：
2.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为45％至50％之间，所述磷酸盐缓冲液的份额为8％至11％之间，所述tritonx-100溶液的份额为9％至13％之间，所述双缩脲试剂a液的份额为2％，所述双缩脲试剂b液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为4％至6％之间。
3.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为48％，所述磷酸盐缓冲液的份额为9％，所述tritonx-100溶液的份额为10％，所述双缩脲试剂a液的份额为2％，所述双缩脲试剂b液的份额为18％，所述苯甲酸二甲酰胺的份额为5％。
4.根据权利要求1所述的一种蛋白提取方法，其特征在于：所述黑水虻的份额为50％，所述磷酸盐缓冲液的份额为11％，所述tritonx-100溶液的份额为13％，所述双缩脲试剂a液的份...
【专利技术属性】
技术研发人员：姚琦，
申请(专利权)人：海口市妇幼保健院海口市妇女儿童医院，
类型：发明
国别省市：
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