基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法技术

技术编号:41009727 阅读:26 留言:0更新日期:2024-04-18 21:45
本发明专利技术公开了基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,包括:采用尺寸编码的方法,制备不同大小的水凝胶微球;每种大小的水凝胶微球内负载一种捕获探针,一种捕获探针对应一种血清核酸;待测血清不需要前处理,利用水凝胶微球中负载的捕获探针特异捕获血清中的核酸并进行信号放大;通过流式细胞仪来分群地检测水凝胶微球的荧光信号,直接实现血清中多种核酸的同时定量。本发明专利技术方法是一种有潜力的核酸多路定量检测方法,有望用于液体活检以辅助临床诊疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术用于检测血清中的多种核酸,涉及一种基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法


技术介绍

1、目前临床诊断肿瘤及区分亚型依然需要侵入性地获取活体组织,进行形态学检查和免疫组化染色来确定诊断。液体活检是近年来被大量报道的有巨大潜力的非侵入性检查方法。而检测体液中的标志物,如mirna,可以辅助临床诊疗。

2、mirna通过调节基因表达参与多种生物进程,且稳定存在于血液中,通过检测mirna表达水平的变化可以辅助诊断癌症、指导治疗以及评估预后。

3、但是,mirna的丰度低、同源性高,并且存在于复杂的血清环境中,报道的检测方法往往需要繁琐的前处理过程等等问题。

4、mirna多路检测往往需要引入多种与靶标对应的信号并区分这些信号,并且血清复杂的生物环境也会影响结果的准确性,繁琐的样品前处理、复杂的标记和检测步骤,都限制了这些方法的临床应用。此外,mirna的提取仍缺乏标准化的方法,在提取过程中不可避免的会有样品的损失和降解。

5、song等人[1]针对三种目标mirna设计了三种发卡探针,结合靶标本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述通过流式细胞仪来分群地检测水凝胶微球的荧光信号:不同大小的水凝胶微球通过前向散射FSC和侧向散射SSC的区别明显划分成不同的集群,可单独检测每一群水凝胶微球的荧光信号,从而得到该种血清内核酸的表达水平。

3.如权利要求1或2所述的基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述水凝胶微球的大小取决于油相和水相的流速比以及流体本身的物理性质。

4.如权利要求1或2所述的...

【技术特征摘要】

1.基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述通过流式细胞仪来分群地检测水凝胶微球的荧光信号:不同大小的水凝胶微球通过前向散射fsc和侧向散射ssc的区别明显划分成不同的集群,可单独检测每一群水凝胶微球的荧光信号,从而得到该种血清内核酸的表达水平。

3.如权利要求1或2所述的基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述水凝胶微球的大小取决于油相和水相的流速比以及流体本身的物理性质。

4.如权利要求1或2所述的基于尺寸编码水凝胶微球的血清多路核酸定量分析方法,其特征在于,所述水凝胶微球的直径为10-50微米。

5.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:严枫陈大禹
申请(专利权)人:江苏省肿瘤医院
类型:发明
国别省市:

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