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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种装配定位机构,特别是涉及基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,属于装配定位机构。
技术介绍
1、现有技术中4-喹诺酮类是一类合成抗生素,通过作用于dna旋转酶来治疗或预防细菌感染,对细菌dna造成不可逆转的损伤,氟喹诺酮类化合物是一类新的喹诺酮类化合物,氟原子位于6位,如图7所示,氟喹诺酮类化合物的一般化学结构,r1-r6表示不同的取代基,x通常表示c或n原子,y通常表示h或f原子,但该4-喹诺酮类因对水产养殖和人类健康具有潜在风险,因此,必须开发有效的检测工具,以解决对氟喹诺酮类药物使用日益严格的限制;
2、现有技术中液相色谱-四极飞行时间质谱(ms)、紫外检测、固相萃取和串联质谱(ms/ms)是最常用的方法,因为它们具有高通量筛选、高灵敏度和高精度的优点,分析技术的缺点包括复杂仪器的高成本,这些技术耗时且不适合实时现场分析,免疫分析技术依赖于广泛特异性抗体的可用性,前期筛选复杂,技术难度高,检测时基质干扰大的问题;
3、荧光分析方法因其重现性好、简单、方便、灵敏度高等优点引起了人们的广泛关注,随着纳米科学和纳米技术的快速发展,荧光纳米材料为检测喹诺酮类药物提供了新的思路,但这些方法存在着探针毒性高、合成和后处理过程复杂检测,因此,有必要开发一种新型的荧光探针用于喹诺酮类药物的检测方法来解决上述问题。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的是为了提供基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法。
2、本专利技术
3、基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,包括如下步骤:
4、步骤一:将ova与离子水采用1g:25ml进行溶解混合;
5、步骤二:向步骤一中离子水内加入0.8g/l硼氢化钠在20-30℃温度下搅拌1h;
6、步骤三:搅拌完成后放置在加热器内保持70℃;
7、步骤四:加热至没有气泡产生后恢复至室温,并加入9ml、24.3mm haucl4并搅拌2min;
8、步骤五:加入4ml 1m氢氧化钠,在高温油浴下反应3h;
9、步骤六:用0.45μm滤头过滤大颗粒金,10kda超滤管超滤13min后得到浅白色溶液,即得到卵清蛋白-金纳米簇,避光保存于4℃下,备用。
10、优选的,步骤二离子水内加入0.8g/l硼氢化钠在温度为20℃下搅拌1h。
11、优选的,步骤二离子水内加入0.8g/l硼氢化钠在温度为30℃下搅拌1h。
12、优选的,在步骤六中卵清蛋白-金纳米簇100μl与不同浓度的诺氟沙星混合;
13、加入1.0mol/l tris-hcl缓冲溶液得到混合溶液,在一定温度下进行孵育;
14、测定含有不同浓度诺氟沙星的卵清蛋白-金纳米簇在521nm激发波长下的荧光强度;
15、计为f,计算荧光强度变化率(f-f0)/f0的值;
16、以诺氟沙星浓度为横坐标,荧光强度变化率(f-f0)/f0为纵坐标,绘制标准曲线图,获得最低检测限。
17、本专利技术的有益技术效果:
18、本专利技术提供的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,探针合成方法简便、步骤少、绿色合成、无需添加还原剂,合成时间合理。
19、利用荧光传感方法检测喹诺酮类药物,并能做到线性范围广、灵敏度。
20、整体的检测方法响应过程简单,检测体系中无需经过多种中间元素传递信号,利用卵清蛋白可以直接与有机磷酸酯阻燃剂特异结合的优势,这种直接检测的方式可以有效规避检测体系组成过多、响应机制复杂、信号转换次数多、检测不灵敏抗干扰性弱等不足。
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1.基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:步骤二离子水内加入0.8g/L硼氢化钠在温度为20℃下搅拌1h。
3.根据权利要求2所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:步骤二离子水内加入0.8g/L硼氢化钠在温度为30℃下搅拌1h。
4.根据权利要求3所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:在步骤六中卵清蛋白-金纳米簇100μL与不同浓度的诺氟沙星混合;
5.根据权利要求4所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:诺氟沙星浓度设置浓度为0.01、0.05、0.1、0.5、1、3、5、7、10、15、20nM。
6.根据权利要求4所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:温度采用梯度设置30、40、50、60、70、80、90、100℃。
【技术特征摘要】
1.基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:步骤二离子水内加入0.8g/l硼氢化钠在温度为20℃下搅拌1h。
3.根据权利要求2所述的基于卵清蛋白-金纳米簇的喹诺酮类药物荧光检测方法,其特征在于:步骤二离子水内加入0.8g/l硼氢化钠在温度为30℃下搅拌1h。
4.根据权利要求3所述的基于卵清蛋白-金纳米簇...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘煌睿,陈晨,陈禧,闫海虎,
申请(专利权)人:生态环境部华南环境科学研究所生态环境部生态环境应急研究所,
类型:发明
国别省市:
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