【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测，具体涉及一种生物样本中多司马酯定量检测的方法。
技术介绍
1、多司马酯(dosmalfate)是香叶木苷七硫酸酯的碱式铝盐(化学结构式如下)，属于含铝的黄酮类化合物，是天然植物成分地奥司明经过结构改造合成的胃粘膜保护剂。
2、
3、多司马酯片为淡黄色，在水、甲醇或氯仿中几乎不溶，在稀盐酸溶液中易溶，在1mol/l的氢氧化钠溶液中溶解，分子量为2349.96，化学结构中含铝、硫以及香叶木苷七硫酸酯3个官能团，结构较复杂。多司马酯为治疗消化道溃疡(胃溃疡和十二指肠溃疡)的良药，少数病人可能出现呕吐，腹痛，腹泻，胃满胀，反酸，烧心，嗳气，皮疹，便秘等不良反应。并且因其难溶于水，普通片剂存在崩解性能较差、起效缓慢、需大剂量使用等缺点，导致临床使用受限。
4、目前，新药研发开发新靶点越来越难、仿制药竞争越来越大，改良型新药正在成为一个较优选择，逐渐成为研发主力。已有不少研究机构投入到多司马酯的改良型新药研发中，以期通过改制剂、增加适应症等方式扩大多司马酯的临床应用。药代动力学研究是改良型新药临床前研究必须开展的内容。因多司马酯分子量较大，在水和有机溶剂中的溶解性差，且结构复杂，离子化时带多电荷。多电荷的存在给生物样本中的定量检测带来诸多挑战。现有的定量检测多司马酯的方法主要为hplc法，其检出限为100ng/ml，得到的药代动力学结果为大鼠口服多司马酯后实际上不吸收，在给药动物的血浆或尿液中没有检测到多司马酯；口服12h后，实际上在粪便中可完全回收，排泄半衰期为5～6h。人体研究
技术实现思路
1、鉴于此，本专利技术提供了一种生物样本中多司马酯定量检测的方法。本专利技术提供的检测方法特异性好，灵敏度高，具有较高的精密度和准确度，其检测结果能够满足药代动力学研究的要求。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种生物样本中多司马酯定量检测的方法，包括以下步骤：
3、将待测生物样本前处理后和内标物混合，得到待测样品液；所述前处理包括以下步骤：将待测生物样本和蛋白沉淀剂混合进行蛋白沉淀后进行固相萃取；将所述固相萃取后的洗脱液和水混合后进行控温离心；
4、将所述待测样品液进行超高效液相色谱串联质谱检测，得到多司马酯定量检测结果；
5、所述超高效液相色谱串联质谱检测包括超高效液相色谱检测和质谱检测；
6、所述超高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b，所述流动相a为乙酸铵和甲酸的混合溶液，所述流动相b为氨水和甲醇的混合液；
7、所述流动相体系的流速为0.4～1.5ml/min；
8、洗脱方式为梯度洗脱；
9、所述梯度洗脱的程序为：
10、0～0.5min：所述流动相a的体积百分含量为95％，所述流动相b的体积百分含量为5％；
11、0.5～2.5min：所述流动相a的体积百分含量由95％匀速减少到5％，所述流动相b的体积百分含量由5％匀速增加到95％；
12、2.5～4min：所述流动相a的体积百分含量为5％，所述流动相b的体积百分含量为95％；
13、4～5min：所述流动相a的体积百分含量由5％匀速增加到98％，所述流动相b的体积百分含量由95％匀速减少到2％；
14、5～5.6min：所述流动相a的体积百分含量由98％匀速减少到50％，所述流动相b的体积百分含量由2％匀速增加到50％；
15、5.6～7min：所述流动相a的体积百分含量为50％，所述流动相b的体积百分含量为50％；
16、7～8min：所述流动相a的体积百分含量为由50％匀速增加到95％，所述流动相b的体积百分含量由50％匀速减少到5％；
17、所述质谱检测的条件包括：离子源为电喷雾离子源；扫描方式为负离子模式；检测方式为多重反应监测；毛细管电压为2.50kv；锥孔电压为60v；脱溶剂气温度为400℃；脱溶剂气流速为800l/h；锥孔气流速为150l/h；多司马酯的检测离子对为383.20→233.00，锥孔电压为50v，碰撞能量为32v。
18、优选的，所述流动相a中乙酸铵的摩尔浓度为0.5～5mm，所述流动相a中甲酸的质量百分含量为0.01～0.1％。
19、优选的，所述流动相b中甲醇为色谱级甲醇，所述流动相b中氨水的质量百分含量为0.1～2.0％。
20、优选的，所述超高效液相色谱检测的条件：色谱柱为acquity premier peptidecsh c182.1×100mm 1.7μm、acquity cshtm c182.1×100mm 1.7μm或acquitybeh c182.1×50mm 1.7μm；柱温为30～40℃；进样量为1～10μl。
21、优选的，所述内标物为氯沙坦；质谱检测过程中所述氯沙坦的检测离子对为421.13→127.05，锥孔电压为49v，碰撞能量为26v。
22、优选的，所述蛋白沉淀剂包括色谱级乙腈或色谱级甲醇。
23、优选的，所述待测生物样本和蛋白沉淀剂的体积比为1:2.8～3.2。
24、优选的，所述洗脱液和水的体积比为1:0.8～1.2。
25、优选的，所述控温离心的转速为13000～15000r/min，温度为44℃，时间为9～11min。
26、优选的，所述待测生物样本包括血清、血浆、组织、尿液、胆汁或粪样。
27、本专利技术提供了一种生物样本中多司马酯定量检测的方法，包括以下步骤：将待测生物样本前处理后和内标物混合，得到待测样品液；所述前处理包括以下步骤：将待测生物样本和蛋白沉淀剂混合进行蛋白沉淀后进行固相萃取；将所述固相萃取后的洗脱液和水混合后进行控温离心；将所述待测样品液进行超高效液相色谱串联质谱检测，得到多司马酯定量检测结果；所述超高效液相色谱串联质谱检测包括超高效液相色谱检测和质谱检测；所述超高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b，所述流动相a为乙酸铵和甲酸的混合溶液，所述流动相b为氨水和甲醇的混合液；所述流动相体系的流速为0.4ml/min；洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序为：0～0.5min：所述流动相a的体积百分含量为95％，所述流动相b的体积百分含量为5％；0.5～2.5min：所述流动相a的体积百分含量由95％匀速减少到5％，所述流动相b的体积百分含量由5％匀速增加到95％；2.5～4min：所述流动相a的体积百分含量为5％，所述流动相b的体积百分含量为95％；4～5min：所述流动相a的体积百分含量由5％匀速增加到98％，所述流本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种生物样本中多司马酯定量检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述流动相A中乙酸铵的摩尔浓度为0.5～5mM，所述流动相A中甲酸的质量百分含量为0.01～0.1％。
3.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述流动相B中甲醇为色谱级甲醇，所述流动相B中氨水的质量百分含量为0.1～2.0％。
4.据权利要求1～3任一项所述检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱检测的条件：色谱柱为ACQUITYPREMIERPeptide CSH C182.1×100mm 1.7μm、ACQUITY CSHTMC182.1×100mm 1.7μm或ACQUITYBEH C182.1×50mm 1.7μm；柱温为30～40℃；进样量为1～10μL。
5.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述内标物为氯沙坦；质谱检测过程中所述氯沙坦的检测离子对为421.13→127.05，锥孔电压为49V，碰撞能量为26V。
6.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂包括色谱级乙腈
7.根据权利要求1或6所述检测方法，其特征在于，所述待测生物样本和蛋白沉淀剂的体积比为1:2.8～3.2。
8.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述洗脱液和水的体积比为1:0.8～1.2。
9.根据权利要求1或8所述检测方法，其特征在于，所述控温离心的转速为13000～15000r/min，温度为44℃，时间为9～11min。
10.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述待测生物样本包括血清、血浆、组织、尿液、胆汁或粪样。
...【技术特征摘要】
1.一种生物样本中多司马酯定量检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述流动相a中乙酸铵的摩尔浓度为0.5～5mm，所述流动相a中甲酸的质量百分含量为0.01～0.1％。
3.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述流动相b中甲醇为色谱级甲醇，所述流动相b中氨水的质量百分含量为0.1～2.0％。
4.据权利要求1～3任一项所述检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱检测的条件：色谱柱为acquitypremierpeptide csh c182.1×100mm 1.7μm、acquity cshtmc182.1×100mm 1.7μm或acquitybeh c182.1×50mm 1.7μm；柱温为30～40℃；进样量为1～10μl。
5.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：林俊粒，杨威，张家伟，郭健敏，刘婉沂，王显菲，黄远铿，雷夏凌，颜国伟，
申请(专利权)人：广东莱恩医药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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