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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学工程领域,特别涉及一种抗cd155蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、cd155(分化簇155)是一种免疫球蛋白样黏附分子,一种单次跨膜的细胞表面蛋白,作为细胞黏附分子参与肿瘤细胞的粘附、迁移,还作为免疫调节分子介导nk和t细胞的免疫。cd155基因位于人类19号染色体上,由8个外显子417个氨基酸组成,具有两种跨膜的选择性剪接亚型(cd155δ和cd155α)和两种缺乏跨膜区域的剪接亚型(cd155β和cd155γ)。cd155β和cd155γ有可能作为癌症发展和进展的潜在标志。
2、cd155是免疫细胞上激活和抑制受体识别的少数配体之一。cd155的配体有3种,dnax辅助分子-1(cd226)在大多数免疫细胞上表达,包括t细胞、b细胞、nk细胞和单核细胞。t细胞免疫球蛋白(tigit)是一种在nk细胞、活化和记忆性t细胞和treg上表达的抑制性受体。cd155还与免疫球蛋白超家族的cd96相互作用。cd155作为免疫调节分子,通过与激活和抑制受体相互作用影响免疫反应的结果。
3、研究已经证实cd155在正常组织中表达量很少或不表达,但在包括胰腺癌、胆管癌、结直肠癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、乳腺癌在内的多种人类恶性肿瘤中高表达。cd155的表达水平与肿瘤的组织分化程度、tnm分期及淋巴转移等病理参数密切相关。有研究表明cd155的过表达与宫颈癌、尿路上皮癌、肺癌患者的不良预后明显相关。
技术实现思路
1、专利技术人提供了
2、seq id no.1:
3、qsveesggrlvtpgtpltltctvsgidlssyamiwvrqapgqgleyigftyiggpiyyaswakgrftisktsttvdlkmtslttedtatyfcasghgiwgpgtlvtvss
4、seq id no.2:
5、qvltqtpspvsaavggtvtincqasqsvynnknlawfqqkpgqppkrliyaasnlasgvpsrfkgsgsgtqftltisdvqcddaatyyclgefscssadclafgggtevvvk
6、进一步的,所述单克隆抗体的重链可变区的编码dna序列为seq id no.3所示的核苷酸序列,所述单克隆抗体的轻链可变区的编码dna序列为seq id no.4所示的核苷酸序列。
7、seq id no.3:
8、cagtcggtggaggagtccgggggtcgcctggtcacgcctgggacacccctgacactcacctgcacagtctctggaatcgacctcagtagttatgcaatgatctgggtccgccaggctccagggcaggggctggaatacatcggattcacgtatattggtggtcccatatattacgcgagctgggcgaaaggccggttcaccatctccaaaacctcgaccacggtggatctgaaaatgaccagtctgacaaccgaggacacggccacctatttctgtgccagtggccatggcatctggggcccaggcaccctggtcaccgtctcctca
9、seq id no.4:
10、caagtgctgacccagactccatcccctgtgtctgcagctgtgggaggcacagtcaccatcaactgccaggccagtcagagtgtttataataacaaaaatttagcctggtttcagcagaaaccagggcagcctcccaagcgcctgatctatgctgcatccaatctggcatctggggtcccatcgcggttcaaaggcagtggatctgggacacagttcactctcaccatcagcgacgtgcagtgtgacgatgctgccacttactactgtctaggcgaatttagttgtagtagtgctgattgtttggctttcggcggagggaccgaggtggtcgtcaaa
11、进一步的,所述单克隆抗体特异性识别cd155蛋白。
12、进一步的,所述单克隆抗体为兔单克隆抗体。
13、进一步的,所述兔单克隆抗体的克隆号为18c1。
14、专利技术人还提供了一种抗cd155蛋白单克隆抗体的制备方法,用于免疫兔的抗原为重组蛋白,所述重组蛋白由大肠杆菌重组表达。
15、进一步的,所述重组蛋白包含cd155蛋白片段及his蛋白标签。
16、进一步的,所述cd155蛋白片段为21-343位点的片段,其为seq id no.5所示的氨基酸序列。
17、seq id no.5:
18、wpppgtgdvvvqaptqvpgflgdsvtlpcylqvpnmevthvsqltwarhgesgsmavfhqtqgpsyseskrlefvaarlgaelrnaslrmfglrvedegnytclfvtfpqgsrsvdiwlrvlakpqntaevqkvqltgepvpmarcvstggrppaqitwhsdlggmpntsqvpgflsgtvtvtslwilvpssqvdgknvtckvehesfekpqlltvnltvyyppevsisgydnnwylgqneatltcdarsnpeptgynwsttmgplppfavaqgaqllirpvdkpinttlicnvtnalgarqaeltvqvkegppsehsgmsrn
19、进一步的,重组过程中选用的质粒载体为pet-28a-sumo。
20、专利技术人还提供了一种cd155蛋白免疫检测试剂,所述免疫检测试剂含有上述抗cd155蛋白的单克隆抗体为其有效成分。
21、区别于现有技术,本专利技术所产生的有益技术效果为:上述技术方案提供一种抗cd155蛋白兔单克隆抗体,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列;所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的氨基酸序列。该抗体具有高特异性、敏感性,可以特异性识别表达cd155蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。
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1.一种抗CD155蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQID NO.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的编码DNA序列为SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列,所述单克隆抗体的轻链可变区的编码DNA序列为SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体特异性识别CD155蛋白。
4.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体为兔单克隆抗体,克隆号为18C1。
5.一种抗CD155蛋白单克隆抗体的制备方法,其特征在于,用于免疫兔的抗原为重组蛋白,所述重组蛋白由大肠杆菌重组表达。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述重组蛋白包含CD155蛋白片段及HIS蛋白标签。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述CD155蛋白片段为21-343位点的片
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,重组过程中选用的质粒载体为pET-28a-sumo。
9.一种CD155蛋白免疫检测试剂,其特征在于,所述免疫检测试剂含有权利要求1所述抗CD155蛋白单克隆抗体为其有效成分。
10.根据权利要求9所述的免疫检测试剂,其特征在于,所述免疫检测包括免疫组织化学法,免疫印迹法和酶联免疫法。
...【技术特征摘要】
1.一种抗cd155蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列;所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seqid no.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的编码dna序列为seq id no.3所示的核苷酸序列,所述单克隆抗体的轻链可变区的编码dna序列为seq id no.4所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体特异性识别cd155蛋白。
4.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体为兔单克隆抗体,克隆号为18c1。
5.一种抗cd155蛋白单克隆抗体的制备方法,...
【专利技术属性】
技术研发人员:高惠然,杨清海,陈惠玲,吴楠楠,蒋宁城,
申请(专利权)人:福州迈新生物技术开发有限公司,
类型:发明
国别省市:
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