一种布鲁菌的可视化检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种布鲁菌的可视化检测试剂盒及检测方法，所述试剂盒包括LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组包括外引物对、内引物对。本发明专利技术根据布鲁菌表面蛋白相关基因(bp26)保守区序列设计引物组，利用环介导等温扩增技术扩增靶基因的特定区域，从分子水平上实现布鲁菌的快速检测。本发明专利技术利用钙黄绿素对反应结果进行可视化判断，大大简化了操作流程，提高了检测效率。本申请建立的布鲁菌LAMP检测方法可检测样品中低至10ng/μL的布鲁菌DNA，灵敏度高，特异性好，为布鲁菌检测提供一种有效、快速的核酸检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其涉及一种布鲁菌的可视化检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

1、布鲁菌病(brucellosis)简称布病，是由布鲁菌(brucella)引起的人畜共患传染病，其临床特点为长期发热、多汗、关节痛及肝脾肿大等，严重威胁养殖业健康发展和公共卫生安全。该病在我国属于乙类传染病，该病的净化对于保障人民生命安全和减少经济损失具有重要的意义。通常认为传统病原培养是微生物鉴定的“金标准”，但经过分离培养、生化鉴定、测序比对分析等，周期长，效率低，因此，建立快速和精准的布鲁菌检测方法尤为重要。目前布鲁菌感染诊断主要包括血清学和病原学，血清学诊断方法更适用于生产和应用，目前我国现行的布鲁菌病诊断国家标准gb/t 18646-2018中使用的方法也主要为试管凝集试验(sat)、虎红平板凝集试验(rbt)等血清学检测方法居多，但其特异性仍有待提高。病原学检测方法中，pcr检测方法虽然速度快，精准度高，但仪器成本较高，因此开发一种高效、灵敏、低廉的检测方法尤为重要。

2、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplif本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测布鲁菌的试剂盒，所述试剂盒包括LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组包括外引物对、内引物对；

2.如权利要求1所述试剂盒，所述试剂盒还包括Bst 2.0DNA聚合酶、DNA模板和反应液。

3.根据权利要求1所述试剂盒，所述试剂盒还包括钙黄绿素和水合氯化锰溶液，所述水合氯化锰溶液的浓度为0.08-0.12mM。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括MgSO4溶液，所述MgSO4浓度为7-9mM。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括阳性对照，所述阳性对照为含有bp26全基因的质粒。

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【技术特征摘要】

1.一种用于检测布鲁菌的试剂盒，所述试剂盒包括lamp引物组，其特征在于，所述lamp引物组包括外引物对、内引物对；

2.如权利要求1所述试剂盒，所述试剂盒还包括bst 2.0dna聚合酶、dna模板和反应液。

3.根据权利要求1所述试剂盒，所述试剂盒还包括钙黄绿素和水合氯化锰溶液，所述水合氯化锰溶液的浓度为0.08-0.12mm。

4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩先干，蒋蔚，马世辉，王福成，贾沅铮，陈兆国，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心，
类型：发明
国别省市：