【技术实现步骤摘要】
专利技术涉及生物化学,具体涉及一种用于mrna合成的氘代加帽化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
1、5’端帽结构是mrna中非常关键的组成部分,对mrna的稳定性、mrna转运以及蛋白质合成等各方面发挥非常重要的作用。
2、在mrna体外转录合成反应中,相对于酶法加帽共转录加帽一步到位,可以减少反应步骤和酶的使用量,合成的mrna可以直接纯化。
3、用氘代帽合成的mrna分子量更大一些代谢速度会慢,可用于研究mrna的代谢动力学。氘代帽子类似物可以作为内标分析用于分析帽子类似物的纯度,提高分析准确性。mrna合成过程会产生大量杂质,分析起来较为困难,氘代帽子类似物由于分子量的差异可用于mrna体外合成的杂质分析,且氘代帽合成的mrna翻译效率更高,可以得到更多的蛋白质。
4、因此,提供一种用于mrna合成的氘代加帽化合物及其制备方法和应用,是本专利技术亟需解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术提供的一种用于mrna合成的氘代加帽化合物及其制备方法和
...【技术保护点】
1.一种用于mRNA合成的氘代加帽化合物,其特征在于,具有如下式(I)或式(II)所示的结构:
2.一种如权利要求1所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
3.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述鸟苷二磷酸或氘代修饰的鸟苷二磷酸与硫酸二甲酯或氘代硫酸二甲酯之间的摩尔比为1∶8-10。
4.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,采用0.1M的氢氧化钠水溶液调节反应液的pH值为4.0。
5.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方
...【技术特征摘要】
1.一种用于mrna合成的氘代加帽化合物,其特征在于,具有如下式(i)或式(ii)所示的结构:
2.一种如权利要求1所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
3.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述鸟苷二磷酸或氘代修饰的鸟苷二磷酸与硫酸二甲酯或氘代硫酸二甲酯之间的摩尔比为1∶8-10。
4.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,采用0.1m的氢氧化钠水溶液调节反应液的ph值为4.0。
5.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,提纯方法为:用二氯甲烷萃取反应液以去除未反应的硫酸二甲酯,然后将水相用水稀释并用氢氧化钠调节ph值至5.5-6,然后上样到deae sephadex上,用0.03-0.2m的碳酸三乙胺溶液洗脱。
6.根据权利要求2所述的氘代加帽化合物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述7-甲基鸟苷二磷酸或氘代修饰的鸟苷二磷酸与咪唑的质量比为2:1,且7-甲基鸟苷二磷酸或氘代修饰的鸟苷二磷酸与三苯基膦、2,2′-...
【专利技术属性】
技术研发人员:曹学峰,于宏超,潘雪华,丁硕,陈天毓,
申请(专利权)人:青岛糖智医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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