【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水稻遗传学,特别涉及快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化方法及其应用。
技术介绍
1、目前的转基因方法主要分为三大类:直接遗传转化、种质系统介导和载体介导。直接遗传转化主要有基因枪,电击,peg,脂质体等。种质系统介导主要有生殖细胞浸泡,花粉管通道,胚囊子房注射等。载体介导主要有农杆菌质粒(载体)介导,病毒载体介导。目前最常用的农杆菌载体介导,该方法具有高效,可以插入大片段基因,经济、快速等优点。对于不同种类的植物,对相应的农杆菌载体介导方法有不同的要求,例如所使用的培养基的组分种类和比例,或培养的条件参数的差异,都会对植物能否达到快速高效的转化、分化的目的产生决定性影响。因此,对于植物遗传转化,能够在某种植物获得良好的植物组织脱分化和再生效果,并不代表将其用于其他植物中也能获得较好的效果。培养基中某些关键组分的比例的调整,或者培养环境条件的改进,是实现某种植物组织培养、脱分化和再生的关键技术。目前对于水稻组织的转化,主要是通过成熟胚诱导愈伤后进行继代扩繁处理后,再进行农杆菌载体的转化实现的。此方法周期长,愈伤再生困难。
...【技术保护点】
1.一种用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,包括诱导培养基、共培养培养基、筛选培养基、分化培养基;
2.根据权利要求1所述的用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,所述基础盐培养基包括硝酸盐和铵盐,还包括磷酸二氢钾170-400mg/L,硫酸镁80-370mg/L,氯化钙166-300mg/L,硫酸亚铁27.85mg/L,乙二胺四乙酸二钠37.25mg/L,硫酸锰80mg/L,硫酸锌30mg/L,硼酸15mg/L,碘化钾0.83mg/L,钼酸钠1mg/L,硫酸铜0.5mg/L,氯化钴0.025mg/L,甘氨酸2mg/L,VB
...【技术特征摘要】
1.一种用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,包括诱导培养基、共培养培养基、筛选培养基、分化培养基;
2.根据权利要求1所述的用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,所述基础盐培养基包括硝酸盐和铵盐,还包括磷酸二氢钾170-400mg/l,硫酸镁80-370mg/l,氯化钙166-300mg/l,硫酸亚铁27.85mg/l,乙二胺四乙酸二钠37.25mg/l,硫酸锰80mg/l,硫酸锌30mg/l,硼酸15mg/l,碘化钾0.83mg/l,钼酸钠1mg/l,硫酸铜0.5mg/l,氯化钴0.025mg/l,甘氨酸2mg/l,vb1 5mg/l,vb3 2mg/l,vb6 1mg/l,肌醇200mg/l;其中,硝酸根的浓度为(18-33)mmol/l,且no3-和nh4+的物质的量比例为(0.75-8):1。
3.根据权利要求2所述的用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,所述诱导培养基包括基础盐培养基,还包括蔗糖、葡萄糖和麦芽糖,以及脯氨酸0.2-1g/l,谷氨酰胺0.5-1.5g/l,酸水解酪蛋白0.2-1g/l,天门冬氨酸0.2-1g/l,agar 6g/l,24-d 2-3.5mg/l,6ba 0.2-1mg/l;其中,蔗糖的浓度为10-20g/l;
4.根据权利要求2所述的用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,所述共培养基包括基础盐培养基,还包括葡萄糖和麦芽糖,以及脯氨酸0.2-1g/l,谷氨酰胺0.5-1.5g/l,酸水解酪蛋白0.2-1g/l,天门冬氨酸0.2-1g/l,agar 7g/l,24-d 2-3.5mg/l,乙酰丁香酮20-50mg/l;其中,葡萄糖的浓度为5-15g/l;
5.根据权利要求2所述的用于快速高效的水稻成熟胚农杆菌转化的产品,其特征在于,所述筛选培养基包括基础盐培养基,还包括麦芽糖20-40g/l,甘露醇10-20g/l,脯氨酸0.2-1g/l,谷氨酰胺0.5-1.5g/l,酸水解酪蛋白0.2-1g/l,天门冬氨酸0.2-1g/l,agar 8g/l,24-d 2-3.5mg/l,kt 0.2-1mg/l,特美汀300mg/l,头孢200mg/l,以及真核抗生素,所述真核抗菌素及其浓度为潮霉素50mg/l或g418 200mg/l或basta 15...
【专利技术属性】
技术研发人员:段芳,
申请(专利权)人:武汉艾迪晶生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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