【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种枯萎病抗性dcaps标记及其应用。
技术介绍
1、枯萎病是黄瓜生产上普遍发生的主要真菌性土传病害，其病原菌主要侵染黄瓜的根或根颈部，危害茎维管束组织，黄瓜枯萎病发病率一般在10％～30％，严重时可达到50％，甚至导致绝收。目前生产中黄瓜枯萎病防治方法主要为农业防治、生物防治及化学防治。但对于枯萎病这一土传病害，采用化学防治和生物防治效果不佳，虽然生产上南瓜嫁接可以解决枯萎病的危害，但南瓜作为砧木会影响黄瓜果实的风味，降低商品价值。
2、通过分子标记辅助选择的方法高效的选育抗枯萎病的黄瓜品种是当前黄瓜育种工作的主要部分。但存在以下技术难题：首先，黄瓜抗枯萎病材料较少；其次，目前已公布的大多数分子标记很难与相关性状紧密结合。因此能用于对黄瓜枯萎病抗性进行分子标记辅助选择的分子标记少之又少。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种黄瓜枯萎病抗性辅助选择标记，并用于抗枯萎病黄瓜的筛选。
2、本专利技术黄瓜枯萎病抗性dcaps标记，黄瓜枯萎病抗性dcaps标记正向引物msei-1f的核苷酸序列为5’-aacacctggtgtgcaagttcaatta-3’；黄瓜枯萎病抗性dcaps标记反向引物msei-1r的核苷酸序列为5’-gataccctgtagatggtttcgttg-3’。
3、本专利技术上述黄瓜枯萎病抗性dcaps标记的应用，黄瓜枯萎病抗性dcaps标记用于抗枯萎病黄瓜的筛选。
4、本专利技术黄瓜枯萎病抗性d
5、s1、提取待测黄瓜植株基因组；
6、s2、以s1获得的为模板，用黄瓜枯萎病抗性dcaps标记正向引物和反向引物进行pcr扩增反应，得到pcr产物；
7、s3、对s2得到的pcr产物进行msei酶切；
8、s4、s3酶切产物鉴定，酶切产物片段大小为69bp的对应黄瓜样品为抗枯萎病黄瓜。
9、进一步的，s2中pcr反应体系为20μl，成分比例如下：
10、
11、
12、pcr扩增反应程序为：94℃预变性10min，94℃变性30s，53℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环，72℃延伸10min。
13、进一步的，s3中msei酶切体系为15μl，成分比例如下：
14、
15、酶切体系于65℃水浴酶切2小时。
16、本专利技术黄瓜枯萎病抗性dcaps标记在不同的黄瓜材料中具有通用性，操作简便结果明确。本专利技术通过分子标记辅助选择的方法，在黄瓜的幼苗期即可对黄瓜枯萎病抗性进行辅助选择，大大提高了育种效率缩短育种年限。本专利技术可以用于今后黄瓜抗枯萎病分子标记辅助选择，并加快育种工作效率。
17、本专利技术黄瓜枯萎病抗性dcaps标记在不同的枯萎病抗性黄瓜材料中都可以进行很好的区分。本专利技术的黄瓜枯萎病抗性dcaps标记与黄瓜枯萎病抗性基因紧密连锁；因此,本专利技术抗性dcaps标记可以高效区分不同黄瓜样品和品种是否具有抗黄瓜枯萎病的特性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记，其特征在于，黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记正向引物MseI-1F的核苷酸序列为5’-AACACCTGGTGTGCAAGTTCAATTA-3’；黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记反向引物MseI-1R的核苷酸序列为5’-GATACCCTGTAGATGGTTTCGTTG-3’。
2.权利要求1所述黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记的应用，其特征在于，黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记用于抗枯萎病黄瓜的筛选。
3.根据权利要求2所述的黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记的应用，其特征在于，按以下步骤进行抗枯萎病黄瓜的筛选：
4.根据权利要求3所述的黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记的应用，其特征在于，S2中PCR反应体系为20μL，成分比例如下：
5.根据权利要求3所述的黄瓜枯萎病抗性dCAPS标记的应用，其特征在于，S3中MseI酶切体系为15μL，成分比例如下：
【技术特征摘要】
1.黄瓜枯萎病抗性dcaps标记，其特征在于，黄瓜枯萎病抗性dcaps标记正向引物msei-1f的核苷酸序列为5’-aacacctggtgtgcaagttcaatta-3’；黄瓜枯萎病抗性dcaps标记反向引物msei-1r的核苷酸序列为5’-gataccctgtagatggtttcgttg-3’。
2.权利要求1所述黄瓜枯萎病抗性dcaps标记的应用，其特征在于，黄瓜枯萎病抗性dcaps标记用...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔浩楠，丁卓，李亚航，张宁，郑婉霜，
申请(专利权)人：河北科技师范学院，
类型：发明
国别省市：
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