一种金属螯合亲和填料配基的合成工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种金属螯合亲和填料配基的合成工艺，该方法通过一种名为羟乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)的骨架化合物经过酯化，活化，胺化以及水解过程从而得到一种类TED结构的螯合配基胺类化合物(TED‑1)。采用本发明专利技术的技术方案制备的螯合配基，具有非常强的金属螯合能力，运用该配基制备的亲和填料在蛋白纯化中金属离子脱落少，使用寿命较长；同时该配基的合成工艺操作简单，成本低廉，适宜进一步推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质纯化填料的制备，特别是一种金属螯合亲和填料配基的合成工艺。

技术介绍

1、固定化金属螯合亲和层析技术(immobilized metal-chelated affinitychromatography，imac)是近年来出现的一种新型亲和层析技术，主要用于生物大分子的分离。相对于传统的分离蛋白质技术，亲和层析技术优点在于其在蛋白质的分离纯化过程中具有选择性和特异性，可以在某些复杂的环境中快速、简便、有针对性地得到纯度高的目标蛋白。

2、固定化金属螯合亲和层析技术是利用某些蛋白质和一些金属离子之间的特异性相互作用来分离纯化目标蛋白。这种特异性结合的原理是具有一个或多个自由配位位点的金属离子能与蛋白质或多肽表面的供电子基团氮、氧、硫等这些含有孤对电子的原子以配位键的形式结合。通过与电子对供体原子的配合，金属离子被固定在多齿状螯合化合物上。当过渡金属离子在溶液中时会和水分子结合，蛋白质表面含有电子对的原子与过渡金属离子结合力比水分子与过渡金属结合力强，从而蛋白质抢夺金属离子空轨道形成螯合物。当对结合的目标蛋白进行洗脱时，洗脱液可以本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种金属螯合亲和填料配基的合成工艺，其特征在于，包括如下步骤：HEDTA经过1)酯化，2)活化1或活化2，3)胺化以及4)水解过程得到产品，所述产品结构式如下：

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤1)酯化过程为：HEDTA与叔丁醇反应，得HEDTA-三酯。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤1)酯化过程为：反应器中加入HEDTA、EDC、4-二甲氨基吡啶、叔丁化试剂、有机溶剂，反应结束后，旋蒸除去溶剂得HEDTA-三酯。

4.根据权利要求3所述的工艺，其特征在于，所述叔丁化试剂为叔丁基三氯乙酰亚胺酯，所述有机溶剂为二...

【技术特征摘要】

1.一种金属螯合亲和填料配基的合成工艺，其特征在于，包括如下步骤：hedta经过1)酯化，2)活化1或活化2，3)胺化以及4)水解过程得到产品，所述产品结构式如下：

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤1)酯化过程为：hedta与叔丁醇反应，得hedta-三酯。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤1)酯化过程为：反应器中加入hedta、edc、4-二甲氨基吡啶、叔丁化试剂、有机溶剂，反应结束后，旋蒸除去溶剂得hedta-三酯。

4.根据权利要求3所述的工艺，其特征在于，所述叔丁化试剂为叔丁基三氯乙酰亚胺酯，所述有机溶剂为二氯甲烷，乙腈，甲苯，丙酮，n,n-二甲基甲酰胺中的一种或多种。

5.根据权利要求3所述的工艺，其特征在于，所述酯化过程具体为：反应器中加入1.4～2.8g hedta，2.0～4.0g edc，4-二甲氨基吡啶1.3～2.6g，叔丁化试剂3.0～6.0g，有机溶剂4...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建军，张文冬，曹飞婷，
申请(专利权)人：常州天地人和生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：