【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因检测，具体涉及一种融合基因测序文库的制备方法及应用。
技术介绍
1、融合基因是指两个基因的全部或一部分的序列相互融合为一个新的基因的过程，其有可能是染色体易位、中间缺失或染色体倒置所致的结果。目前，多项研究表明基因融合可能与各种癌症的发生发展紧密相关，这些融合基因还可能是潜在的药物靶点，需要进行检测。
2、目前，检测融合基因的技术路线通常包括文库构建步骤：提取样本的rna，打断成小片段，逆转录生成cdna，再生成cdna二链，末端修复，连接测序接头，纯化，pcr扩增得到一定浓度的文库，利用捕获融合基因的panel探针进行过夜杂交，进行洗脱后再次pcr扩增得到上机所需要的文库浓度。
3、上述常规文库构建步骤繁琐且实验流程冗长，反馈效率低。另外，医院病理科收集的组织常常为使用福尔马林固定石蜡包埋处理后的切片，核酸降解严重，需要足够多的样本才能提取出足量的rna用于建库测序。
技术实现思路
1、基于此，有必要提供一种融合基因测序文库的制备方法及应用，可以...
【技术保护点】
1.一种测序文库的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述逆转录生成cDNA所要求的RNA投入量不低于1ng。
3.根据权利要求1或2所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述逆转录生成cDNA的步骤为：使用oligo-dT和随机引物在逆转录酶的作用下生成cDNA，反应程序为：25℃，10～25min；37～50℃，30～60min；80℃，5～10min。
4.根据权利要求1或2所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述酶切的参数条件为：加入包埋接头的Tn5酶，55℃孵育，然后加...
【技术特征摘要】
1.一种测序文库的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述逆转录生成cdna所要求的rna投入量不低于1ng。
3.根据权利要求1或2所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述逆转录生成cdna的步骤为：使用oligo-dt和随机引物在逆转录酶的作用下生成cdna，反应程序为：25℃，10～25min；37～50℃，30～60min；80℃，5～10min。
4.根据权利要求1或2所述测序文库的制备方法，其特征在于，所述酶切的参数条件为：加入包埋接头的tn5酶，55℃孵育，然后加入sds水溶液，室温孵育。
...
【专利技术属性】
技术研发人员：李彬，何彬，郭琼钰，周雪，王蓉，李拼，曹现涛，魏光，侯龙辉，陆亚平，
申请(专利权)人：国药武汉精准医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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