转座子系统及其用途技术方案

技术编号:40961815 阅读:19 留言:0更新日期:2024-04-18 20:40
本发明专利技术涉及转座子载体、包含该转座子载体的转座子系统、转座子试剂盒、插入了该转座子载体的细胞及其用途,其中通过证实外源基因被有效地转移到靶细胞的染色体中以产生高产量的转基因细胞而完成了本发明专利技术。特别地,证实根据本发明专利技术的转座子可有效地将TCR或CAR编码基因转移至免疫细胞,并且表达TCR或CAR的细胞对抗原表现出高反应性,因此,预期多种TCR‑T细胞和CAR‑T细胞可以通过使用根据本发明专利技术的转座子系统来产生。具体地,通过使用本发明专利技术的转座子可以低成本获得高产量的CAR‑T细胞,从而可以通过降低CAR‑T细胞治疗剂的生产成本来降低治疗剂的价格,而传统的CAR‑T细胞生产CAR以及转移到靶细胞需要很高的成本。此外,证实本发明专利技术的转座子可以有效地将抗体基因,例如靶向肿瘤病毒的中和抗体,转移至用于大规模生产抗体的HEK293细胞中,从而可以容易地通过本发明专利技术的转座子大量生产各种抗体。具体地,由于根据本发明专利技术的转座子不限于可以作为载体转移的基因的类型,因此预期除开发抗体基因外,转座子还可以根据各种目的被积极地利用在开发表达各种基因的基因组修饰细胞系。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及转座子载体、包含该转座子载体的转座子系统、转座子试剂盒、插入了该转座子载体的细胞、及其用途。本申请要求2021年7月9日提交的韩国专利申请no.10-2021-0090133和2022年7月11日提交的韩国专利申请no.10-2022-0085306的优先权和权益,其公开内容通过引用整体并入本文。


技术介绍

1、嵌合抗原受体(car)-t细胞用作通过以下方式生产的细胞治疗剂:将与肿瘤抗原(例如cd19)结合的抗体序列插入t细胞,这通过将抗体序列与t细胞信号传导所需的结构域(例如cd3/4-1bb/cd28)相结合来实现。将这些car基因插入t细胞的方式有多种,但大多数方法都利用慢病毒递送系统。慢病毒的特点是它可以持续表达基因,因为它整合到了细胞的染色体中。这些慢病毒的生产成本较高,这是导致治疗药物价格上涨的主要因素。然而,一旦生产出来,它们就可以用于多个患者。

2、然而,个性化tcr-t是通过在每位患者中找到对新抗原做出反应的t细胞受体(tcr)序列,并使用基因转移系统将该基因转移到t细胞中来产生的。然而,由于tcr-t是针对每个本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种转座子载体,其包括:

2.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述5'ITR选自以下项:

3.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述5'ITR包含由SEQ ID NO:7、5'-ACACTTGG-3'和SEQ ID NO:8表示的核苷酸序列中的一者或多者。

4.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述3'ITR包含由SEQ ID NO:13和SEQID NO:14表示的核苷酸序列中的一者或多者。

5.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述5'ITR的核苷酸序列被包含在所述转座子载体中沿5'至3'方向插入靶DNA的位置...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种转座子载体,其包括:

2.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述5'itr选自以下项:

3.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述5'itr包含由seq id no:7、5'-acacttgg-3'和seq id no:8表示的核苷酸序列中的一者或多者。

4.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述3'itr包含由seq id no:13和seqid no:14表示的核苷酸序列中的一者或多者。

5.根据权利要求1或2所述的转座子载体,其中所述5'itr的核苷酸序列被包含在所述转座子载体中沿5'至3'方向插入靶dna的位置的上游,或

6.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述转座子载体包含具有所述3'itr的核苷酸序列的反向互补序列的反义dna,所述反义dna在所述转座子载体中沿5'至3'方向插入靶dna的位置的下游。

7.根据权利要求6所述的转座子载体,其中所述3'itr的所述反向互补序列包括由seqid no:15至17中任一项表示的核苷酸序列。

8.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述转座子载体包含在所述5'itr的下游且在所述3'itr的上游的一个或多个靶dna序列。

9.根据权利要求8所述的转座子载体,其中,所述靶dna序列选自治疗性多肽编码序列、sirna编码序列、mirna编码序列、报告蛋白编码序列、抗原特异性受体编码序列、重组抗体编码序列或其片段、中和抗体编码序列或其片段、免疫检查点抑制剂编码序列、细胞因子受体编码序列、car编码序列或其片段、以及t细胞受体(tcr)编码序列或其片段中的任意一者或多者。

10.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述转座子载体包含启动子、一个或多个靶dna、以及poly(a)信号,其中所述5'itr、所述启动子、所述靶dna、所述poly(a)信号和所述3'itr按顺序能操作地连接。

11.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述转座子载体是环状质粒、线性化双链dna(dsdna)、发夹dsdna或微环dsdna。

12.根据权利要求1所述的转座子载体,其中所述转座子载体的大小为1,000至20,000bp。

13.一种用于递送靶dna的转座子系统,其包括:

14.根据权利要求13所述的转座子系统,其中所述转座酶蛋白包含由seq id no:18表示的氨基酸序列。

15.一种用于递送靶dna的转座子试剂盒,其包括:

16.一种细胞,其中导入了:a)权利要求1所述的插入有靶dna的转座子载体;以及

...

【专利技术属性】
技术研发人员:林采烈金英爱郑智元朴洗訚
申请(专利权)人:莱奥真生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

相关技术
    暂无相关专利
网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1